nós estamos aqui com a doutora elvira veloso seu professora da faculdade de medicina da usp o professor de dermatologia e coordeno a parte médica dos laboratórios citogenéticos do hospital israelita albert einstein e do serviço de hematologia do hc-fmusp que é do sus e vamos falar sobre exames cariótipo e fish eye e aí e é obrigada a doutora elvira por estar aqui conosco participando da tv abrale estamos aqui com essa roupa porque nós estamos bento do laboratório de citogenética aqui do vai começar você pode poderia explicar para gente o que é citogenética citogenética é a ciência
do promoção não é como a gente estuda as alterações e os cromossomos humanos a gente sabe que pro mossomo quer dizer o ovo que é por e somo que é corpúsculo então são são corpúsculos esse correm que a gente vê do microscópio durante a divisão da célula a verdade de cromossomos eles representam a condensação final de todo o constituinte genético que a gente tem posses que esses a dupla fita de dna é muito longa ela vai se enrolando dentro do núcleo umas proteínas que são histórias você novelão e depois disso ela só uma figura muito
muito longa tem quilômetros de extensão e depois de uma fase final a divisão celular ele só formar então esses cromossomos se na espécie humana e sem ser 46 cromossomos 22 deles são pares iguais são os que a gente chama de autossomos e dois deles são os sexuais então a mulher tem 46 xx e o homem tem 46 xy os primeiros 22 de um até 22 são os cromossomos que ele chama de ultrassom é isso é o que é o que é são os cromossomos na espécie humana só pra compensado tô lembrando até histórico da citogenética
uma ciência que apareceu mais ou menos de 1950 onde se descobriu por exemplo que a síndrome de down é uma doença cromossômica ela na verdade isso pacientes que tinham síndrome de down e entre somente um cromossomo que é o cromossoma 21 e um ano depois em 1960 já se descobriu a primeira normalidade que era adquirida de uma leucemia então você logo 1960 se descobriu cromossomo filadélfia que todo mundo sai é um marcador de uma doença uma leucemia quem sabe overlord crônica depois com o tempo 1970 vai aparecer uma técnica super importante a técnica do bandamento
com aquela capacidade que a gente tem decorar os cromossomos em várias bandas mas regiões claras e escuras a gente começa a entender que as doenças principalmente as leucemias tem uma série de outras anormalidades cromossômicas então troca de material genético entre os cromossomos mais ou menos de 1980/1990 que chega as técnicas moleculares então a reação de polimerase em cadeia e aparece também uma técnica que a gente vai falar hoje que a técnica de fish hoje a depreciação in situ por fluorescência que é uma técnica que a lia uma técnica de citogenética convencional uma técnica molecular e
o que é o exame cariótipo então cariótipo na realidade é um estudo onde você pareia todos os cromossomos de cada fase um dos cromossomos do cromossoma 11 até o vinte e dois e aí os cromossomos sexuais e quando você parei você enxerga se existem diferenças entre cada um a música o seu amor é o seu parceiro em relação ao ideograma que a gente já tem de cada um dos cromossomos estão olhar se eles são parecidos ou seja o padrão é um patrão o padrão tá bem definido para cada um dos ossos promoção quando você analisa
tudo isso esse pareamento de cromossomos e comparam com outros se chama cariótipo estudo do pareamento dos cromossomos e as anormalidades que eles possuem tipos diferentes em tipo de alterações diferentes e como é que a gente no meu neto então a gente pode analisar talvez o cariótipo se existe alterações ganhos e perdas e rearranjos desses cromossomos e aí que se determina as doenças não algumas das doenças são promoções dicas algumas são herdadas outras são adquiridas nas é dessa maneira que a gente consegue determinar as anormalidades cromossômicas como é feito o exame de tais como cariótipo vai
depender de uma célula em e eu preciso receber uma mosca do que eu quero estudar essa moça tem que estar fresco e tem que ter célula vir então pode ser o sangue periférico pode ser uma medula óssea como elas leucemias pode ser um gangue nos linfomas pode ser medula óssea no meio uma multi de qualquer maneira a cela tentar viva não pode depois gelado não pode estar submetido a altas temperaturas o pode viajar muito a gente tem um período de estabilidade desse cromossomo dessas peças dessas células e uma coisa que é importante também é saber
qual é a hipótese diagnóstica o material não pode chegar sem a gente saber o que a gente quer estudar porque a gente vai utilizar técnicas para a cultura dessas células que dependem de que tipo de doença aquela aquele a tela rosa perder isso pelo muito provável a gente começa a colocar dessa mostra numa cultura a gente geralmente de vídeo essa mostra em duas pra gente ter sempre pelo menos uma cultura dessas duas celas e dependendo da hipótese diagnóstica a gente vai deixar essas células crescendo mais ou menos um tempo de cultura só por volta algumas
horas você minhas agudas até há alguns dias do meio alemão outro porque essa é muito preguiçosa ela não gosta nesse dia é só faz mal no corpo uma história é muito difícil de dividir e depois disso a gente vai adicionar uma substância que chama colchicina que ela bloqueia o fuso mitótico e coloca ela para na metáfase que ele justamente aquela fase que o cromossomo tá mais vídeo é um depois disso a gente vai preparar essa mostra baixar um núcleo da célula com uma substância é uma solução bem e fotônica então celulares e depois ficar celular
enche a gente vai colocar uma substância que chama metanol e ácido acético que vai romper as membranas e vai fixar esse material vai sobrar então depois um pele tezinho uma quantidade de pequenininha de material que contém núcleo das células que estão em metal é esse material que eu vou colocar uma lâmina e depois eu vou vai ser submetido a uma coloração diferente que chama bandamento mandamento e g ou bandamento guimosa e aí o que que vai acontecer nesse mandamento é uma técnica especial onde vai ter banda as claras e bandas escuras e cada e como
que na verdade depois eu vou comparar e ver se aquilo tá normal ou alterado em relação à ao que a gente conhece de cada promoção essa técnica de bandamento depois a lâmina depois que ela é bandado ela vai ser colocada num microscópio microscópio óptico microscópio convencional a captura das metáforas e mede a gente captura pelo menos 20 metafase e depois a gente vai cara eu te pa isso através de hoje em dia a gente tem técnicas aparelhos que fazem isso de uma maneira mais fácil do que antigamente só no microscópio e sistemas ele tem a
capacidade de capturar metáforas como a gente também e também a partir daí de você captura metade você consegue com o computador no sistema de software separar os paisinhos e fica mais fácil antigamente de fazer isso com tesoura e cola hoje em dia a gente usa esse sistema que é bem mais fácil de você cara eu te pa e aí você em média analisa 20 metal face para poder saber se aquilo realmente tem alguma anormalidade que tipo de anormalidade a gente pode ver a normalidade eu tenho que material ganhou de cromossomos inteiros que a gente chama
trissomia apesar de um cromossoma inteiro monossomia rearranjo dos cromossomos então promoção a porta uma parte de um cromossomo e parte do outro e versões os promoções e cada cada um deles pode estar relacionada ao fenômeno biológico muito importante que é o começo o genes e daquela doença que ela eu servia por exemplo ou é assim que a gente análise na fase final a gente vai colocar essas anormalidades que a gente escreveu de uma forma clara de um laudo e utilizando uma nomenclatura internacional que qualquer pessoa que entende consegue ler qualquer parte do mundo e depois
isso muitas vezes a interpretado também pelo médico do laboratório pelo biologista do laboratório para interpretação mente é assim que a gente fala na verdade esse exame ele ajuda a definir diagnostica doenças o cariótipo ele serve para várias têm várias finalidades uma delas super importante é essa então tem algumas a detecção de uma anormalidade que a gente chama clonal fecha o diagnóstico por exemplo eu passei teu leucocitose aumento de glóbulo branco e vai tomar leucemia mieloide crônica como ele pode ter uma infecção uma pneumonia então o paciente que tem uma pneumonia não tem a normalidade promoção
ele tem e o paciente de leucemia mieloide crônica e ter mesmo elevação então nesse sentido você pode separar doenças neoplásicas e doenças não neoplásicas e doenças relacionadas ao primeiro esses finalidade do exame segunda finalidade do exame é que ela ajuda a definir subtipos de doenças existem vários subtipos de leucemia mieloide da conta e só esse vários subtipos de leucemia linfóide aguda vários subtipos genéticos de leucemia linfoide crônica de mieloma múltiplo por exemplo de linfoma dependendo da normalidade citogenéticos a organização mundial de saúde reuniu essas doenças e subtipos específicos isso é importante porque não só para
classificar doença mas porque você consegue prognosticar ter ideia se você tem que tratar de uma maneira essa doença mais agressiva o meu o que vai ser tratada só contigo terapia você precisa de um outro tratamento para resolver transplante alogênico autólogo e ainda mais do que isso dependendo de subtipos genéticos e sem drogas alçam a clássica de ser minha melhor de crônica tem um livecd você minha promielocítica aguda que tem uma validade de sua genética clara tem o ácido transretinóico então da verdade a lei de você conseguir diagnosticar prognosticar você consegue orientar a terapêutica numa fase
mais posterior no seguimento do paciente se o paciente for bem tratado essa normalidade citogenética deve desaparecer e o cariótipo deve se normalizar e tem volta a situação também é muito interessante quando você trans planta de doador diferente em relação ao sexo também você consegue bom ele atualizar através do cariótipo ser todas aquelas células pertence ao receptor fosse todas elas pertencem ao doador top busque se fosse você transplante você tem um feriado completo reaja reais com o seu próprio né esse é o negócio da célula novas olá tudo isso seja substituído por um clone leucemico desaparecer
com essa é uma outra indicação outra coisa super importante que assim tão genética permitiu foi a descoberta de gente alguns durante muito tempo que várias das alterações cromossômicas e várias vezes associados a esses rearranjos cromossômicos foram descobertos a partir dessas anormalidades que a gente tinha que bom é muito bom este é um exame que é disponível no sus né esse exame é um exame disponível pelo sus disponibilizado em alguns grandes hospitais do sus em alguns laboratórios entretanto então reembolso baixo pelo sus e que acaba dificultando a gente conseguir realizar o cara de todos os parceiros
qual é o grande dificuldade do cariótipo cariótipo o exame que ele depende muito texto precise dos biologista que analisam esse cariótipo então em média você precisa pelo menos três a cinco anos e treinamento para violência ea conseguir analisar as alterações que não tem importância depois para prognosticar em tratar o paciente tô na realidade esse é o exame que é disponibilizado mas a gente não gosto não tem nem no prazo correto um grande problema é que a gente querendo cariótipo por exemplo quando você não tem etapas durante o processo você não tem metade tudo então o
que acontece esse exame ele não consegue ser bem sucedido então dependendo do tempo que leva dependendo da expertise center no seu laboratório pode ser pisando no seja bem sucedido porque simplesmente você não tem metal aí nesse sentido então outro exame que é importante para o exame que vende apresentar outros exames a gente pode brasília então na verdade existe uma outra técnica de citogenética que não é convencional por convencional é o cariótipo existe uma se chama de citogenética molecular na verdade é a junção da do cariótipo ou uma técnica molecular onde a gente vai utilizar as
ondinhas que são pedaços pequenos de dna marcados com substâncias fluorescentes que são os cromos aí o que que se você analisa uma pergunta que você tem será que o meu paciente tem uma translocações específica então utilizar a sonda para determinação daquela região então você utiliza essa sonda e aí a preparação é feita no ambiente um pouco mais escuro com essas sondas fluorescentes naquele mesmo material que pode ser o excedente do cariotico ele mesmo que sobra você pode utilizar e depois da da hibridização com a gente chama a gente vai analisar essas esse material que vai
ser fluorescente dentro do microscópio de fluorescência e já não é mais um microscópio e aí você não depende de metal você pode analisar nas células que não entraram em divisão por essa técnica de fertilização in situ por fluorescência ela tem algumas grandes vantagens além da gente não ter né então quando você não tem de tá fazendo consegue fazer análise do cariótipo você pode utilizar a e tetra se elas que não se dividiram ela tem também tem outras vantagens existem algumas anormalidades que eu não consigo detectar um cariótipo que elas são muito pequenininhas então nesse a
utilizar algumas transmutações que a gente não consegue visualizar num cariótipo posso de a visualizar no fio uma delas por exemplo é uma transação específica 15 25 por cento das teorias de criança vídeo só consegue deus nos ficar por técnicas moleculares qual é super importante saber o que se procura também utilizar a técnica adequada em uma outra alteração que é muito importante fazendo muito divulgado hoje em dia que é uma alteração de um jeito que fica no braço curto do cromossomo 17 e as eleições de um jeito super importante que a guardião do genoma que chama
p53 só em algumas doenças como não ia numa outro fome na leucemia linfocítica crônica quando você detecta esta deleção ausência desse jeito você tem drogas específicas como por exemplo ti nem tão da realidade ou ficção pode ser utilizado quando você precisa pesquisar alterações também muito pequenas que você não consegue ser visíveis o cariótipo aquele processo de bandamento que às vezes você precisa ter dor humanidade muito maiores para você poder detectar esses exames e complementares ou um seria substituto do último eu acho que nada substitui o cara igualzinho né o cariótipo é a base genética aquele
grande mapeamento que você faz do genoma e das alterações cromossômicas mais típicas principalmente nas doenças hematológicas na ver algumas situações quando você não acha nada e dependendo da hipótese diagnóstica você tem que complementar por técnicas mais específico nesse sentido também outras técnicas moleculares ou uma reação de polimerase em cadeia o sequenciamento também só importantes muito importante então quando você tem diagnóstico de uma leucemia por exemplo você faz o cariótipo você pode ter que comprimentar você frente outras técnicas de sequenciamento de reação de polimerase em cadeia mas o cariótipo é pelo menos na deus e mias
ele ainda é a base do início do estudo genômico dessas doenças existem preparação para exame de cariótipo não existe preparação se você vai ter que trazer uma medula o material muito nossa mesmo procedimento aspiração medular que você faz tanto por exemplo para mim alô grama aqui existe algum problema após exames não é só aguardar o resultado vai chegar em alguns dias vai ser encaminhado para o seu médico obrigada doutora elvira se você gostou do obrigada doutora elvira por sua participação aqui na tv braile pelos esclarecimentos se você gostou do nosso vídeo deixe seu like obrigado
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