Microbiologia Aquática - Componentes e tipos de meios de cultura

é bom na sala de hoje nós vamos começar a falar sobre os meios de cultivo não ou meio de Cultura uma chama Então vamos ver sobre os componentes quais são os tipos como é que eles classificam nectons se tem visto nas aulas práticas sobre isolamento né que outra coisa é um pouquinho sobre a parte teórica né dos mesmo tipo hoje falar dos meios de cultivo é importante a gente falar um pouquinho sobre a composição química das bactérias né então como qualquer sistema vivo as bactérias são compostas por elementos químicos bom então se a gente observar

aqui ó e a composição de uma bactéria na composição Genética é um a gente vai ter aqui e é alguns elementos químicos que a gente chama de macroelementos ou seja os elementos que são mais abundantes humana posição de Marcelo então por exemplo carbono em relação ao peso seco em torno de metade né cinquenta por cento oxigênio dezessete por cento nitrogênio treze por cento hidrogênio 8,2 por cento fósforo 2000% enxofre 1,800 tenham menos de 0,01 por cento e esses elementos químicos por sua vez eles se arranjam nesse se organizam em macromoléculas que a gente também tem

composições diferentes então dentre os os compostos aqui a gente tem as proteínas que em relação ao peso seco é como foi mais de cinquenta por cento de pedidos em torno de quase dez porcento polissacarídeo cinco porcento lipopolissacarideos lembra o que é o componente das membranas externas gram-negativas 3,4 por cento de DNA 3,1 EA Hina entrando de vinte por cento bom então fez tem elementos químicos que se arranjem macromoléculas e para as bactérias crescerem elas precisam destes elementos na poder produzir biomassa poderia sofrer divisão celular com a gente viu né fissão binária E com isso produzir

novas células e bom então com relação ao peso úmido nessa não exclui a água na água a banho em torno de setenta e oitenta por cento de uma célula bacteriana além dela né quando a sentir Desconsidera a água acho que tem os macronutrientes Então são elementos que as bactérias para crescer uma necessitar uma grande quantidade entre eles hidrogênio oxigênio carbono nitrogênio fósforo enxofre selênio enquanto que outros elementos é a gente vai ter necessidade de menor quantidade e alguns deles não vão ser requeridos pelas bactérias Mas eles podem eventualmente ser metabolizados então que nessa imagem está

vendo aqui uma tabela periódica em que a gente tem com cores diferentes mostrando esses elementos né então esses em amarelo são essenciais para todos os Mc's o hidrogênio carbono nitrogênio oxigênio nesse que você tinha comentado aqui esses aqui em rosa são cátions essenciais é cátions e ânions para a maioria dos microrganismos estão ali vai precisar de sódio magnésio cálcio potássio cloro E esse sim Verdes são metais traço e são metais aqui que alguns deles são essenciais ou seja as bactérias não vão crescer se não tivesse metais do manganês ferro cobre níquel antes cúbico é Cobalto

níquel cobre e Zinco né molibdênio vanádio eles são usados para algumas funções especiais tambor o Silício a rádio esses e marrom são não essenciais mas são metabolizados tão alumínio germanius um o bismuto o London nessa alguns exemplos titânio brilho lítio e esse sem em azul são não essenciais e que não são metabolizados então nióbio os meu iridion em todos os gases nobres Aqui também era nenhum ergométrica bom então só para se ter uma ideia aqui na complexidade de elementos químicos que podem compor os microrganismos e confusões diferentes né o e os microrganismos por sua vez

estão imersos no meio químico né então a água o meio que tem muitos muitas substâncias dissolvidas né então a bactéria por exemplo apresente um meio Onde você vai ter os por exemplo fitoplâncton que vai produzir matéria orgânica gente vai ter os números do elementos metais traço ferro levantei vitaminas etc Então os microrganismos estão imersos numa uma sopa é um caldo nutritivo como tirar falar mais para frente bom então com relação a esses elementos presentes no ambiente a gente tem importância de fonte de carbono é o carbono é um elemento essencial já que ele é a

base da vida tão carbono orgânico vai ser utilizado pela maioria dos microrganismos ou inorgânica alfabetizadores O bicarbonato por alguns netos que são autotróficos hidrogênio amônia nitrito Nitrato n2 que a forma gasosa de nitrogênio ou formas orgânicas aminoácidos nucleotídeos fósforo fosfato enxofre forma de sulfato aminoácidos que tenham enxofre como metionina e cisteína homocisteína algumas vitaminas também potássio vai ser essencial para a atividade de enzimas magnésio estabiliza ribossomos membrana de ácidos nucleicos atua na atividade de enzimas cálcio se você essenciais para alguns organismos né sódio do balance olho daqueles que são magros Então os meios de cultivo

eles devem levar em consideração e a composição química diferencial dos organismos e suas capacidades metabólicas e e os micronutrientes são chamados também de elementos-traço metais-traço São tipicamente co-fatores de enzimas dos principais é o ferro que utilizado na respiração celular a gente vai encontrar lá no na cadeia transportadora de elétrons não se tocou umas potencial e enxofre e a gente também tem os fatores orgânicos que são os micronutrientes orgânicos então a diferenciação entre os dois e aqui a gente vai ter vitaminas aminoácidos purinas e pirimidinas outras moléculas orgânicas também são requeridas maioria das vitaminas vai atuar

como coenzimas ou seja são partes não proteica se das enzimas tá essenciais para o funcionamento das agências é então que tem uma tabela mostrando alguns elementos químicos e as suas funções o tempo por exemplo o boro para atuar como um alto indutor para O Corão sensing lembra que ocorre sem aquela capacidade das bactérias de se comunicar Então as sentirem que tem uma uma quantidade mínima de bactérias a população EA partir da elas passam a exibir diferentes propriedades como por exemplo formação de biofilme Na expressão de genes de patrões de patogenicidade por exemplo o Cobalto é

uma vitamina B12 A análise mas com a trança carboxilase cobre na respiração na cadeia transportadora de cromos e oxidase nas plásticas Celina na fotossíntese a Easy mas como superóxido dismutase o ferro também vai ser encontrado citocromo nas catalases peroxidases proteínas ferro-enxofre oxygenases todas as nitrogenases o manganês atua em várias enzimas também no fato sistema dois na importante para a fotossíntese molibidênio também algumas enzimas nitrogenases por exemplo níquel em hydrogenases como coenzima emetogenicos em outras enzimas e Lennon meio medicina enzimas tungstênio também enzimas vanadium e também nitrogenase Bruma velocidades também cima 5 o anidrido carbônico polimerases

de ácidos nucleicos muitas proteínas de ligação ao DNA e e já dos fatores de crescimento A gente tem de cursores de vitaminas o ácido fólico por exemplo também um no metabolismo de carbono moléculas que só tem um carbono biotina na biossíntese de ácidos graxos é ações fixação de CO2 vitamina B12 é a síntese de desoxirribose metabolismo também de um carbono a tiamina essa descarboxilação B6 transformações a Minas certo ácidas ácido nicotínico pegou sou danada demais é uma molécula carregador de energia hidrogênio e energia e riboflavina professora de também a FAD a vida mononucleotideo e democrática

e também carregador de energia hidrogênio ácido pantotênico e gostosa coenzima a sua lipóico descarboxilação do piruvato e alfa-cetoglutarato a vitamina K transporte de elétrons Então veja aqui a gente tem vários elementos né vários elementos traço e fatores de crescimento quiser se as funções essenciais para os microrganismos sem eles incríveis eu não pode crescer então ciúme meu organismo não é capaz de sintetizar alguns e esse composto a gente tem que fornecer a ereção a gente quiser Cut fácil é mesmo então só falou bastante de cultivo composição química para chegar aqui na no o tema dos meios

de cultivo Então porque a gente cultiva as bactérias porque uma das formas da gente estudar os microrganismos né saber como a sua fisiologia né estudar as propriedades daquele organismo se ele produz um tipo de pigmento se aqui microrganismo consegue a reproduzir a assistir o fermentar determinados açúcares então a gente só consegue saber se a camisa cultivo tá mexer falar tema da aula de hoje mas tem um problema um grande problema com cultivo Será que a maioria das bactérias podem ser cultivada a resposta é não na verdade a minoria das bactérias é cultivado apesar de praticamente

todo nosso conhecimento né mas atualmente nem tanto em função das método de sequenciamento mas é muito do nosso conhecimento a respeito da fisiologia diversidade as bactérias vem de cultivo é apesar disso sistema que de 01 a um por cento só das bactérias presentes do solo é cultivado em Sistemas aquáticos ele pode ser até mil vezes menos do que isso ou seja aquela qualquer amostra que a gente pegue de solo de água etc e coloca numa placa seja ela com o meio que for a gente é só vai pegar uma percentual muito muito pequeno das bactérias

que estão presentes ali então é só uma limitação é grande então vamos falar parar de fazer cultivo não porque apesar de ser é preciso ativamente o número pequeno mas em função do grande número de bactérias a gente tem muitas matérias que são cultiváveis nem são importantes para para seu estudo é o junto vamos começar a falar assim mesmo contigo eu sei que algumas terminologias a gente já ir se familiarizando tão um Eu não falo meio de Cultura o meio de cultivo são sinônimos tá então tanto faz utilizar uma tecnologia outra significa o que é um

material nutriente que serve para o crescimento de micro-organismos a o inóculo é o tema que a gente utiliza para o conjunto de micro-organismos que eu vou introduzir para dar início ao crescimento Então vai ser óculos pode ser uma amostra de água parecer uma amostra de solo pode ser uma cotonete um swab passado por exemplo na cavidade nasal de uma pessoa ou na palma da mão na superfície na pele e a cultura são os microrganismos que vão crescer a partir deste bloco seja ele qual for u a e os meios de cultivo né como eu te

falei até aqui eles devem conter todos os nutrientes essenciais que o microrganismo é incapaz de biossintetizar né ao passo que também prover as condições ideais para o crescimento daquele microrganismo munições essas que as mais importantes geralmente a temperatura PH e oxigênio mas não sei restringe a elas tá até hoje podem ter outros também outros os fatores como luz por exemplo né pode ser importante para alguns micro-organismos e quando a gente faz contigo o mais comum a gente ver mais conhecido é o cultivo em meio sólido que ele é obtido através do uso de um polissacarídeo

que o ADR polissacarídeo que ele é extraído de algas marinhas tá então é um polissacarídeo um que ele é inerte tá então ele tem um papel semelhante ao que a gente tem na gelatina com a gente adiciona a gelatina não preparado a substância ela temperaturas baixas elas verifica aí e pega e toma um aspecto meio sólido né bom então ele fica com uma consistência mais firme que da gelatina normal né mas não esse utilizar uma concentração de um a dois por cento o lagartão porque ele é tão importante ele tem duas características é que conferem

essa vantagem no uso da água em uma que a gente tem poucas bactérias Agar holísticas ou seja para a maioria das bactérias voaram meio inerte então ele serve só para dar estrutura para o meio e outra característica bem interessante que é o ponto de fusão do H que se a gente aqueceu agra 100 graus celsius na temperatura de fervura da água ele vai se fundir e vai estar na líquido então com isso eu posso manipular esse esse esse mês de cultivo contendo água eu posso transferir entre frascos colocar nas placas e se deixar esse meio

esfriar e vai solidificar então de 40 graus celcius então a temperaturas bastante fáceis da gente trabalhar no Laboratório se ele permitir a imobilização e favorece o crescimento de colônias zizibs então quando eu quero fazer um isolamento de microrganismo eu importante que eu tenho a colônias separadas e que consiga selecionar colonies específicas para fazer por exemplo processo de repicagem e isolamento e as colunas geralmente começa a ficar visíveis a partir de 10 a menos novas células e uma outra premissa importante que a gente tem é que cada cada colônia dessa aqui ela foi gerada a partir

de Cristina de UFC que é uma unidade formadora de colônia a história que pressupõe que uma bactéria caiu aqui no meio e ela foi se dividindo dividindo dividindo e deu origem a esta colónia tá inicialmente era uma bactéria é uma premissa importante é sempre verdadeira não necessariamente posso ter por acaso caído duas bactérias aqui e elas formaram essa colônia Tá mas é não é muito provável né o mais prova quem que tipo serve aqui Realmente cada colônia foi formada por uma bactéria a matéria ou por uma levedura ou um fungo né também de utilizar mesmo

terminologia de UFC unidades formadoras de colônias é para eu ter culturas puras eu tenho que fazer um ressolamento por três vezes então faço o isolamento aqui pego uma dessas colônias aqui é fácil isolamento outra vez a gota colonizou lado e relacionamento mais uma vez só uma forma de purificação das colônias para que eu tenha o máximo de garantia na máximo de segurança de que eu tô trabalhando com cultura pura tão aqui trouxe umas imagens de algumas algas por exemplo gracilaria uma que é muito utilizada para extração do Agra Então agora ele a gente compra ele

não farmácia de pó é um pó meio claro né bege esse pó gente estou no meio de cultivo líquido depois que ele é fundido né a gente consegue hackear o canal placa e depois aumentar sólida a gente consegue selecionar né uma determinada é E aí fazer o processo de repicagem ou sobre a classificação dos meios de cultivo tão três causas principais das características principais o maior estado físico outra composição química e o Tipo funcional tá o estado físico é o meio se ele é líquido seu sólido ou sólida a composição química será definido o sintético

serem Indefinido ou complexo e o Tipo funcional se ele é simples é rico se ela seletivo diferencial é o meio para enriquecimento ou anaeróbico a gente tem outras categorias também mas em são os principais tá em relação à a Mas está difícil a diferença entre o meio ele se líquido semi-sólido ou sólido é a quantidade de água no meios líquido eu não tenho adição de água então não coloco água nesse meio então eu vou ter só o material nutriente né o composto nutriente diluído em água Tais microrganismos não crescer aqui esse meio líquido o meio

sólido como falei tem aquela ele percentual de um a dois por cento de água tão meio fica bem é uma dimensão notificado e o meio semi-sólido ter uma quantidade menor de água onde fica uma consistência mais pastosa muito utilizada para gente ir realizar testes de motilidade de microorganismos e com relação a ser Indefinido ou definido Tom o meio Indefinido o complexo é o meio que ele é feito a partir da geralmente é uma digestão de substâncias que tem um alto valor nutritivo então é comum utilizar é sangue e fusões de cérebro decoração soja levedura também

então esse material ele é só fuma digestão uma quebra parcial Oi e esse material ele é concentrado e depois não é vendido na forma de um pó né e a gente faz uma ressuspensão adicionar água nesse pó faz uma diluição acrescentou água que se for meio sólido E aí tem o nosso meio Indefinido o complexo porque ele recebe esse nome de indefinido ou complexo porque é um meio que a gente não sabe exatamente a composição se essa soja ela foi cultivada não só se é um novo determinado lote a soja que eu utilizei para fazer

aquele e-mail eu fui cultivada no solo mais pobre entrou genial em fósforo diferente de um outro lote eu vou ter pequenas diferenças na composição do descer essa essa matéria prima podem refletir na composição do meio né então eu não vou não vai ser totalmente sem por cento reprodutivo eu fizer com um lote em relação a outro lote daquele meio de cultivo que eu comprar um e já o meu definido o sintético eu sei exatamente todos os compostos todos os elementos químicos que estão presentes no meio então aqui eu preciso acrescentar é todos aqueles microelementos todas

vitaminas Tais traços sais etc tampão tudo tudo exatamente para compor o meio adequado para o crescimento dos microrganismos então no meio definido o sintético Eu tenho um controle absoluto sobre a composição química do meio de cultivo Lu a relação entre simples e Rico tá meio simples é o meu em que eu tenho uma única fonte de carbono então comparada com o meu Indefinido complexo aqui eu posso ter várias fontes de carbono posso ter açúcares proteínas lipídios que vem aqui dessa matéria-prima lá no meio simples eu vou ter só uma fonte por exemplo glicose no meio

rico eu vou ter um meio altamente nutritivo né com várias fontes diferentes e é utilizado para o cultivo de organismos que a gente chama de fastidiosos aos organismos que exercitam durante a quantidade de nutrientes para o crescimento meios seletivos e não seletivos e e os meios seletivos são seletivos se diferenciam pela adição de substâncias no compostos que vão favorecer o crescimento de alguns microrganismos e evitar o crescimento de outros então serve quando eu quero utilizar por exemplo para isolar determinado microrganismo específico né bom então vou trouxe aqui o exemplo para vocês e uma sempre meio

de cultivo é chamada de Agar macconkey que é o meio que ele seleciona para bactérias gram-negativas e e ele ainda tem outra propriedade ele é diferencial que eu vou falar mais adiante em um meio seletivo e diferencial para fermentadores de lactose é um meio ele tem os sais biliares e Cristal Violeta Então as bactérias as enterobactérias ou seja bactérias que estão presentes no nosso trato intestinal elas é recebe aqueles sucos biliares né sobre os que têm propriedades detergentes tá então nem todas as bactérias têm capacidade de crescer na presença desses detergentes então se eu quero

isolar bactérias que são entéricas enterobactérias seu eu adiciono possa adicionais sais biliares porque as que forem enterobactérias vão conseguir crescer e em quantas outras não vão conseguir crescer na presença de sais biliares que Como já falei de ação são funciona como detergentes aprendiz tem o pessoal Violeta também tem o mesmo o mesmo uma função além disso esse meio ainda tem um indicador de PH então eu posso ter algumas bactérias que são enterobactérias que fermentam à lactose e outras que não fermentam à lactose Então as que fermentam à lactose elas vão produzir uma ácido esse ácido

vai reagir com o meio vai se tornar um meio roxo a ser mais coloração enquanto que as que não fermentam a única fonte de carbono que as vão ter aqui vai ser a peptona Talvez seja o hidrolisado de proteínas de esse caso aqui é um gelatina e carne e caseina proteina do leite com esse ela vai liberar os amônia tá do no meio e amônia base fica o meio a alcalinizar o meio então meio se torna Amarelo então eu consigo além de selecionar sol a matéria se eu consigo diferenciar as bactérias que são lactose positiva

e lactose negativo tá então aqui tá mostrando os ingredientes se as quantidades que a gente tem para fazer um litro e meio a mesma cor Então peptona não é um hidrolisado de um indivíduo pancreático de gelatina receptor na Protásio poltrona e hidrolisada de carne e caseína caseína é a proteína que tem encontra no leite lactose na na saber se ela fermento não sais biliares cloreto de sódio na na questão do nosso regulação vermelho neutro está Violeta h e água destilada para montar esse me e me diferencial então ele tem algum indicador geralmente um corante e

vai mudar de couro quando ocorrer alguma reação metabólica então aqui eu trouxe para vocês um videozinho que mostra as bem interessante que mostra um time leves né um ele vai acelerando tempo ele mostra vários meios diferenciais bom então vou passar aqui esse vídeo para vocês e vou há nada aqui I love you E aí Olá seja por cento Claros ali no ele vai permitir sol ou crescimento de organismos que são tolerantes ao saltar como alguns Estados E aí [Música] hoje eu vou fazer o primeiro lançamento E aí E aí o esquecimento não emitido é através

da da turbidez do caldo e aqui sal e Manitol meio tá para também organismo e [Música] I love you [Música] Oi Cláudio é mitou sal tolera Instagram seleciona para o organismo se tornasse ao açúcar mentol e um indicador é não vermelho indicador de PH bom então Aqueles organismos que usa o Manitol não criar posições sobre produtos ácidos e vai tornar o PH ácido e vai mudar o meio e vermelho para amarelo acontecido E aí E aí [Música] E aí os vídeos rápidos a usar crescente o meio Amarelo Olá meus amores então pode ser em cima

para receber vídeos novos vídeos pequenina HDMI espinho não sais biliares e ninguém bactérias gram-positivas exceto o colesterol coccus alguns um grupo de tá coloco organismos são positivos para explicar nazi hidrolisam essas Colina em ES Colatina que reage com o citrato férrico e produz uma coloração escura utilizar escolher [Música] o chão só eu vou deixar aqui tá fazendo o quê Vai dormir aqui hoje inteiro a água de azul de metileno e Usina é um meio seletivo e diferencial contém eusina Y Elena azul azul de metileno é a indicador de PH E essas metilene das bactérias gram-positivas

aqueles fermentado que não fermentam à lactose produzem colônias brancas ou transparentes aqueles que fermentam à lactose produz em Colônia com roxo escuro e os que são secretados vigorosos de lactose produzem colônias Verde metálicos o nível de sensação de limpeza E aí E aí [Música] o elevador vigoroso e cole no eurogenes fermenta lactose mas não tanto quanto e cole e é a pessoa do mangueira de Nossa não fermenta lactose o ágar macconkey eu tinha comentado E aí E aí E aí E aí [Música] E aí E aí o senhor Strike a cole lactose positiva aqui lactose

negativo e aqui lactose positiva também E aí [Música] não aguentei correcting é o meu seu tipo diferencial que tem sais biliares também então vai selecionar bactérias enterobactérias azul de bromotimol e fucsina ácida e vai inibe gram-positivos os organismos que permitam as pessoas vão tornar o meio a e transformar o mesmo uma cor meio salmão 1 e as espécies de salmonella e shigella vão tornar o meio Azul quebrando as petronas em produtos alcalinos Samu ela pode produzir sulfeto de hidrogênio que produz colônias pretas e escuras e você E aí E aí [Música] E aí e olhe

já acostumou E aí Oi Total mão nela por essas coisas de sulfeto de hidrogênio a minha fiel o trem estão lavar esses exemplos de meios diferenciais a eu acho que por último eu estou meio de enriquecimento que é o meio que se utiliza para quando eu quero cultivar umas bactérias que tem em baixa concentração baixa quantidade no meio e geralmente elas perdem competição quando eu coloco no meio rico outras bactérias que estão maior quantidade crescem mais rápido e acabam ganhando a competição e excluindo não consigo encontrar as bactérias que não consigo continuar bactérias ocorre embaixo

para situação Então realmente meio de aquecimento e serve tanto para excluir alguns microrganismos a Maria na quanto para aumentar a cidade do inóculo para então conseguir hackear e consegui contar por exemplo Neo os microrganismos aqui ou utilizar para oficina para esses microorganismos bom então acabei mostrando alguns outros exemplos de cultivo passar por meio de cultivo definida para escrever que a cólica ao meio simples Ó tem glicose como fonte de carbono então ele acolhe nesse meio tempo produzir seus compostos os moléculas orgânicas meio de cultivo para e conosco e é meio de futebool definido e discutido

complexo P Cole o depósito devedor detona e discutiu para ter o bacillus eu paro é um outros também aqui nesse caso ele usa não tem nenhuma foto de carbono orgânico que ele tem que fazer carbono inorgânico CO2 do ar Então dependendo das os requerimentos micro-organismos precisa não necessita adicionar carbono orgânico bom então resumindo aqui dos meios de cultivo eu tenho os meus quimicamente definido na Cidade Canção entre quimioautotróficos fotoautotrófico o ensaio microbiológico o complexo conhecimento da maioria dos organismos heterotróficos aqueles que utilizam material orgânico e como fonte de carbono e energia meia redutor para crescimento

de anaeróbicos obrigatórios que eu vou falar mais adiante seletivo suprime algún micro-organismos indesejados favorece aqueles que têm interesse diferencial oferecer algumas colônias em relação as outras equipar as características Conde D'Eu ácido-básicos né enriquecimento é bastante similar no seletivo ele serve para aumentar o número de grande interesse a Tamires detectadas o cultivo anaeróbio para os microrganismos que não conseguem crescer na presença do oxigênio na presença de oxigênio exige a massa de enzimas que serve para lidar com os radicais livres né decorrentes da ação do oxigênio nas células com catalase peroxidase superoxide dismutase ser uma são todos

os medicamentos que possuem as enzimas bom então alguns me perguntam só vou crescer em anaerobiose seja na ausência de organismos oxigênio livre então eu posso utilizar vários trabalhos alguns laboratórios que trabalham muito com organismos anaeróbicos tem anaeróbicas são câmeras seladas com vaco sem oxigênio aqui no interior Essas luvas são utilizadas nos remédios que estão para trabalhar com material acidente na ausência de oxigênio em outros laboratórios que teriam mais eventualmente eu não tenho recurso para comprar uma câmera anaeróbica utilizar as rodas já anaeróbicas tá que são jarras que são selados hermeticamente as placas com os organismos

são inoculados são colocados aqui dentro dessa jarra e também tem um envelope contendo alguma substância que reage com o oxigênio pode ser por exemplo as suas córmico em um abraço inorgânico e ele vai absorver o oxigênio e o acidente de uma vez oxigênio da não consigo ativar organismo anaeróbico antigamente utilizar velas Então se colocava uma vela dentro da jarra se assim dia ela ficava Já esperava a vela apagar mas ele o suficiente para eliminar oxigênio Ainda sobra um percentual na sua mente alto de oxigênio que para muitos microrganismos ainda não é tolerável o meio de

cultivo em si também o recebe alguns composto como o tioglicolato de sódio reage com o oxigênio também ajuda a manter o meio de cultivo a Europa bom uma vez que eu cultivo o solo né tem o triplo da mesma ali para estudar eu posso não querer estudar naquele momento posso o preservar essas esculturas para um outro momento trabalhar com ela então tem dois processos principais que a ultracongelamento que a gente adiciona o crioprotetor ou seja uma substância E pedir a formação de cristais de gelo na água que é o que conta é célula então a

gente queria saber cerol em meu é um leite desnatado em pó dmso em várias substâncias são crioprotetores e um congelamento a baixa temperatura Diamantina baixo de 50 graus - 50 - 95 ou até em nitrogênio líquido é quase menos 200 graus negativos utilização é o congelamento a vácuo e a gente congela ao mesmo tempo que sublima a água né E também a baixas temperaturas há 52 minutos Oi e aí nós vamos trabalhar né nesses algumas aplicações periódicas dá para ficar uma habilidade habilidade Mas algumas delas durante muitos anos me avisa tá é bom para trabalhar

os microrganismos fiz algumas técnicas assépticas e já viram parece sobre isso trabalho com o bico de bons sempre de um bar os tubos trabalhar atrás utiliza a alguns metros de repicagem água essa diluição extinção em que a gente faz essas estrias 650 inclusive vão simulação com isso então a gente pula que inicialmente uma quantidade grande puxa algumas estrias oração esse outro quadrante o chão trânsito Esse vai ser o quadrante assim vai diminuindo e o modo que eu consiga ter algumas colônias isoladas que pois não seria possível conseguir a pinça algo mais colonizou largas toda se

juntaram Enquanto Aqui eu vou reduzir a densidade as vão ficando mais Olá A ideia é sempre pegadas colônias aqui não e existe também o chamado isolamento em meio líquido que a gente faz uma série de lições iniciais aqui funciona uma quantidade de água por exemplo pode ter uma lagoa no Rio ou no mar vou fazer um dimensões variadas E com isso eu vou tendo cada vez menos células né até uma determinada direção que eu não vou ter mais nenhuma célula aqui nesse meio então esse tipo de diluição me liga eu também é interessante para algo

elas que elas não crescem quando colocada diretamente no meio sólido ou que elas tenham gostado e muito baixa que elas não crescem e os mais altos Mas elas crescem quando estão presentes nas regiões mais baixas em função da maior competição e e são ver na prática diluição seriada dia de hoje e ir para o final falar um pouco sobre tipos de cultivo tá então os outros principais é o cultivo em batelada ou intenção Pet motivo fechado para ser fechado ou aberto e o cultivo continuou status esse motivo em batelada o fechado aquele continente o preparo

meio no início então todos os elementos que perdendo vai precisar vai precisar voltar para gente ali e inicia o crescimento dos melhoristas se ele vai passar por uma série de fase é uma fase Laden feita uma aula sobre isso mas só para adiantar a fazer que tem o crescimento ele ainda não é aparente né só se preparando para infelizmente comercial uma fase exponencial do número de células como aumentar né especialmente depois a fase estacionária quis mas Mantenha tem bastante depois a fase senescente o desmatadas a cela estão em CCE Motion por que isso acontece porque

aqui além do meio né te se exaurido né você pensa necessários para o crescimento mexendo até a liberação de compostos tóxicos é decomposição e células Então a gente tem [Música] senescência do cultivo Então esse Maria de decifrar puxados na o mesmo nas placas de Petri em tubos de ensaio nu tipo de cultivo mais comigo E essas quatro fases principais nesse tipo de curtido o time martelada fechado a gente também tem o cultivo em uma selada aberto em que os nutrientes são adicionados ao longo do cultivo alguns compostos indesejáveis podem até ser eliminado no certo. A

cultura vai crescer de maneira contínua tem que ser reiniciado em algum. Então esse é o plástico do cultivo que eu tenho na agricultura por exemplo porque a gente tem um cês conhecem nosso sistema de bioflocos a gente cultiva microrganismo assim a felicidade cultivo de camarão e peixe pedra tão funciona desta maneira Oi e o cultivo continuou através de uma status é o cultivo em que a cultura ela nunca atinge a fase estacionária Ela sempre fica na fase logo para fazer comercial como é que funciona isso porque eu vou ter uma adição continuar de e-mail e

maneira que os clientes não vão ser exauridas e também não vai ter deixar acúmulo de substâncias tóxicas e o trem são adicionados os compostos indesejáveis são eliminadas de maneira coaching a cultura se mantém permanentemente em crescente exponencial na teoria não tem um recipiente com o meio de cultivo fresco estéreo e ele era adicionado através de pode ser por gravidade ou para centrais uma bomba mobile tática tem uma entrada de ar até o meio misturar também e por gravidade também o tô com fome ahh ladrão que vai eliminando por gravidade o o efluente tá então de

modo que esse volume sempre se mantém igual porque eu tô fazer uma foto para vocês eu já trabalhei com esse tipo de sistemas e que foi o que eu montei no laboratório fiz um Natal um a gente fazer alguns cultivos aqui são bem no meio os meios de cultivo que o reservatório não é uma bomba peristáltica e aqui estamos cultivo seus status tá no frasquinho pequeno então frascos descarte aonde caiu E aí e aqui tem outro esquema mostrando pra gente a mesma coisa então não então a gente consegue controlar de maneira independente a taxa de

crescimento dos microrganismos e a densidade de celular do mês tá então a densidade celular vai depender do da taxa de diluição ou seja quanto líquido que eu coloco aqui seu adicionar meio de mais rápido essa essa cultura aqui ela pode não conseguir crescer acompanhando isso aqui passei lá o enxame de lavado a chave nós vai acabar sendo diluída demais acabar sendo eliminada do sistema bom então a taxa de luz reportagem eu não posso voltar demais e não posso gostar de menos se eu botar de menos muito pouco aqui essa Cultura vai crescer mais rápido do

que os nutrientes então ela vai abrir os nutrientes então equilíbrio entre a taxa de crescimento das bactérias entrada de nutrientes e também a concentração do nutriente limitante nutriente limitante o que vai fazer com que a colônia pare de crescer a população isso é controlado pela entrada de do Meio cartão tá do meio que vai controlar essa entrada por nutriente limitante e a taxa de eleição e vai alterar a taxa de crescimento quanto maior taxa de evolução maior a taxa de crescimento porque seu aumenta a taxa de diluição eu vou ter mais ambiente livre aqui para

crescimento das bactérias mais cliente importante então consigo ter maiores taxas de crescimento potenciais e o Gabriel mas total de saúde que vai ser em função desse nutriente limitante tá só para vocês terem uma ideia de tipos de cultivo aqui tá mostrando um gráfico da taxa de diluição como a consideração de bactérias do tempo concentração o qual é o vou diminuindo a taxa de diminuição aumentar a taxa de diluição eu vou aumentar na consideração de bactérias tá a aumentando Avenida aqui a taxa de aplicação e até um ponto que eu tenho é uma quantidade constante que

aqui é o mistério state o estado estacionário tão aqui que o o começado se concentra Esse homem é tá muito taxa de diluição vai ter o assalto que eu vou perder as bactérias aqui ó bom então é isso obrigado pela atenção e faz um