o olá tudo bem com vocês viram este equipamento meio arcaico aqui ele é uma prensa de gutenberg oposto turnês gutemberg o que ele faz evolution em imprensa como conhecemos permitiu que participamos de pontos onde as pessoas precisavam copiar livros textos de jornais toda forma de texto na mão para uma situação pau em que utilizando essa presença utilizando os tipos ou seja letras os moldes para carimbar essas letras eu pudesse automatizado produzir material empréstimo em larga escala e melhor com altíssima fidelidade ao contrário aqui com de eventualmente uma palavra outra eram substituídas por que eu estou
falando isso porque é importante eu poder replicar determinado material especialmente quando ele resguardo informações interesse é de grande importância de maneira de alta fidelidade e fidelidade justamente porque esse nosso material impresso aqui e pode ser uma ótima analogia para o dna para essa moleca onde nós armazenamos informação assim como gutenberg pode prever a necessidade de copiarmos textos com altíssima fidelidade as nossas células precisam copiar o dna com altíssima fidelidade seja para reproduzir em manterem a reposição celular ou mesmo para contar em um organismo tudo quanto especialmente para produzirmos a próxima geração porque se por acaso
eu bagunçar demais esse nosso livro consequência final pode ser que simplesmente eu não tenha organismos viáveis sendo produzidos o nosso objetivo dentro do contexto celular é partir de uma única molécula de dna ou seja um único cromossomo aqui representado realizarmos o processo de replicação do dna e no final temos a cópias de sinopse cromossomo ou seja eu quero partir de uma molécula inicial e chegar em ponto final onde eu tenho dois que não são os filhos que sejam fim digno da nossa cópia inicial pessoas com pode ser o interesse por exemplo de compreender os processos
de replicação do dna vou deixar uma pergunta que eu gostaria de responder no final desse vídeo nós temos uma doença chamada doença de maré ela ataca particularmente aves galinhas perus etc ela é muito combatida com vacinação especialmente uma vacinação ainda entra ovo ou logo no primeiro dia de nascimento justamente pelo potencial danoso que a mesma causa é importante não expor os pequenos gatinhos pequenos dentinhos a essa doença era causada por um herpes vírus diaries que gera uma alta mortalidade e um desenvolvimento interrompido além de uma proliferação celular anômala ou seja as células proliferam muito causando
como consequência descamação celular todo mundo retina um desses dentro dos animais além de outras deficiências que em última instância impedem a utilização de seja como poedeiras seja para o abate e fornecimento de carne como será que eu posso utilizar compreender o nosso processo de replicação do dna e produzir vacina para evitar que as aves apresentam em esse essa doença em questão ao 7 mil como que o dna se replica eu que isso tem a ver com essa produção da vacina outro ponto importante é entender que ocorre a replicação do dna ou seja em que momento
da vida da célula e xvii ponto importante evento vai acontecer ele vai estar dentro do nosso ciclo celular a nossa fase s ou seja a fase de síntese síntese dir dna é justamente nesse ponto do ciclo onde eu vou partir da minha única molécula em duas moléculas consequência compatível sequência igual que nós estamos pensando nesse ciclo celular normal onde eu tenho um passo de divisão celular para mim digita no nosso caso é uma mitose não posso de crescimento o celular uma fase um uma fase s de síntese depois uma fase g2 aqui representada onde as
células se recupera do processo de síntese antes de efetivamente entrar na mitose no processo de divisão que nós iremos explorar mais adiante no nosso curso o mais importante aqui é compreender que uma célula se transforma em duas graças a replicação anterior do dna porque essas duas células-filhas preciso apresentar cópia simples de minas dessa nossa molécula logo o processo de replicação do dna ele é imprescindível para divisão celular continuando a nossa linha do tempo que veio lá da existência desses fatores hereditários propostas tremendo passamos pelo princípio transformante descobrir e aí a molécula de dança conhecemos a
estrutura desse nosso dna e agora nós precisamos compreender como o mesmo é replicado em 1958 - o lençol fizeram experimentos que foram extremamente importantes para compreendermos como que essa nossa molécula de dna passa pela replicação descobrindo que essa replicação ela é semiconservativa e vamos entender mais adiante daquilo que para entendermos os experimentos demais não são estao nós precisamos compreender duas coisinhas antes a primeira delas é que o processo de difusão ele ocorre quando por ventura nossa gotejando vamos uma solução em outra versão aqui eu estou achando esse corante vermelho um copo de água corrente vermelha
alimentício convencional de vocês não percebam que ele vai difundindo e se espalhando sem que eu mexo no meu colo novamente seu cheiro usasse uma colher e agitar esse processo é muito mais rápido mas naturalmente a difusão ocorre e esse líquido isso nosso copo de água vai ficando completamente vermelho ou seja nossa difundimos o nosso colete vermelho não tô doendo outro ponto nós precisamos lembrar também é da nossa tabela periódica tabela periódica ela contém os diversos elementos que você tenha certeza que vocês adoram relembrar eu vou pedir para nos darmos uma olhadinha aqui nesse cantinho específico
nós temos o carbono nós temos um detergente e nós temos o oxigênio vou lembrar vocês aqui em cima nós temos o nosso número atômico que a quantidade de prótons que eu tenho naquele átomo seria justamente a quantidade de prótons que define o elemento então um carbono ele é um carbono porque ele tem 6 prótons nitrogênio é um nitrogênio porque tem que sete próprio e oxigênio oxigênio porque ele tem o outro próprio e aqui embaixo nós temos número de massa do nosso o croqui cena me falando a massa dele quer somatório de prótons com o número
de nêutrons então aqui se eu tenho 6 prótons em uma massa de 12 eu tenho seis neutros aqui ó é por causa do nosso nitrogênio se eu tenho 17 aqui embaixo tem 14 significa que eu tenho 7 prótons inset nêutrons neste átomo em sua conformação mais abundante na natureza que nós podemos fazer é modificar o número de nêutrons de cada um desses anos ou seja mudar esse meu somatório sem alterar o valor aqui em cima nossa anatômico e assim mexer modificar o peso densidade daquele ato sem alterar sua característica química como um todo isso pode
ser explorado no laboratório logo eu posso ter ponto nitrogênio com piso de 14.1 mais denso de 15 é justamente isso que essas são está utilizaram incluindo a esse nosso conceito de difusão os horários experimentos que eles fizeram eles realizaram ultracentrifugação em um gradiente de uma solução de cloreto de césio que que acontece e quando nós realizamos uma centrifugação muito mais muito longa numa solução de cloreto de césio nós vamos primeiro que estabelecer um gradiente nessa solução um ao final de três dias a uma rotação muito mais muito alta aproximar dele a 450 mil vezes a
velocidade a força da gravidade nós temos um deslocamento diferencial dessas nossas moléculas em solução usar uma olhadinha aqui para entendermos um pouco melhor em cima nós temos o tubo que estava rodando nossa entre então estava aqui nesse nosso grande girando girando por três dias subsequentes estava olhando aqui para cima dele os nossos pontinhos pretos aqui eles estão representando por exemplo as nossas molécula de cloreto de sérgio que será que elas vão para o fundo do nosso tudo porque eu tenho uma força de centrifugação empurrando eles parece direção observe que eu também tenho uma força de
difusão assim como nosso corante vermelho fazendo com que ele se difundam no nosso tubo como um todo e fiquem a mãe fica em um homogêneo durante esse processo logo nós temos uma diferença física que observada que acontece com as moléculas que estão mais aqui em cima ou seja mais próximas do topo do nosso tubo elas vão apresentar uma densidade menor mais difícil empurrá-las para baixo do nosso bolo aqui em cima eu tenho o nosso nitrogênio leve aqui embaixo nessa caixinha laranja como eu tenho nitrogênio com uma densidade maior ele vai mais facilmente para o fundo
do nosso tubo estando lá no fundo desse nosso tubo ele justifica a presença de um nêutron a mais encerrado o que que mel são está o fizeram eles trabalharam com nitrogênio no dna produzido na obviamente presente nas bases nitrogenadas intensidade maior densidade menor ou seja alguns com 8 nêutrons mas o gatinho no bloco de 15 aqui o número de massa de 15 aqui ou então o número de massa de 14 que saiu natural um pouco mais leve assim eles conseguiram distinguir qual era a molécula que estava presente no ciclo linho mais importante avaliar as combinações
das a nossa moleca ou seja mais próximo do fundo do tubo eu tenho o nosso dna mais pesado mais próximo do topo do tubo eu vou ter o nosso dna mais leve e assim nós podemos interpretar os resultados obtidos por meio da ação estão quais foram os modelos possíveis créditos vamos imaginar que nós temos uma molécula que ela apresentava duas chitas achamos duas moléculas então eu ganhar esse união pelas ligações de hidrogênio e formavam uma dupla fita de ônibus aqui em cima nós poderíamos ter um modelo de replicação que fosse conservativo presta atenção nas cores
eu queria uma molécula parental composta de duas fitas azuis e na primeira geração a produzir uma fita que é exatamente a parental e uma cópia idêntica dela em amarelo ou seja essa fita que essa dupla fica aqui ela é completamente igual a parental seja as duas fitas utilizadas para produzir ela são as oriundas a parental ou aqui embaixo eu tenho duas fitas completamente novas o meu produz uma segunda geração essas duas uma dessas fitas do prefeito aqui já veio da geração anterior é outra nova e aqui em cima novamente eu venho com uma fita azul
que é a mesma dupla fita parental aqui em uma nova produzida ea cada geração nós vamos enriquecendo para as novas e reduzindo as nossas fitas velhas o modelo semiconservativo ele seria uma situação tal em que eu tenho aqui a minha dupla fita azul azul e na primeira geração eu já produz um híbrido ou seja uma fita velha e uma fita nova uma fita velha e uma fita nova ou seja ele é semiconservativa ele conserva em cada uma das suas filhas apenas uma das fitas responderemos na segunda geração nós aumentamos aqui agora no meio uma molécula
que é feita só duas moléculas que são feitas só de fitas novas e aqui em cima moléculas livres de ficar nova com fita velha mas podemos ter um terceiro modelo aqui de aplicação dispersiva esse modelo seria uma mistura na verdade não tem muita lógica se cortar um pedaço de um menino novo com um pedaço de ganhar velho você teria basicamente uma bagunça calceiro conceito e contexto disso você tem uma homogeneidade dos pesos porque eles seriam distribuídos de maneira aleatória sem nós tivéssemos esse resultado aqui qual seria o nosso esperado lá na centrifugação oi dindinha original
de nitrogênio 15 pesado que está mais próximo do fundo do tubo na primeira geração nós teremos um dna aqui no fundo tumo e um ganhar aqui em cima e na outra geração nós continuaríamos tendo dna aqui embaixo no tubo mais densos e de nessa lá em cima mais leves não tem mínimos formas intermediárias para o modelo de especie vo nós começaremos apenas como ganhar pesado esse daí é pesado estaria no mais próximo ao fundo no tubo quando eu tivesse esse meu híbrido produzido meu amigo ele assumiria uma posição intermediária aqui quando eu tivesse mais um
ciclo de replicação nós iremos agora conforme adicionamos novos trechos de linha novo vamos reduzindo a proporção nesse nosso dna original aqui azul e mais pesado com nitrogênio 15 essa nossa fitinha que ela vai subindo e ficando cada vez mais próxima do bordo do nosso tudo a última possibilidade é justamente o modelo semi com ser e no qual nossa novamente e partimos de uma molécula aqui 1515 apenas com átomos de nitrogênio mais pesados no primeiro ciclo de aplicação nós temos no mundo tecla intermediária por quê porque ela será composta as duas células moléculas filhas tanto de
uma fita original 15 conta de uma fita nova produzida com átomos de hidrogênio 14 lá ao fim nós teremos um híbrido nessa mesma posição e uma molécula nova produzida apenas com nitrogênio fatores diferente da replicação aqui defensiva no qual nós iremos subindo toda a nossa molécula de maneira homogênea assim sendo mas não são está usando esse experimento em laboratório utilizando microrganismos foram cultivados originalmente apenas com nitrogênio pesado para que todo em a deles fosse considerado um dna composto por um terreno 15 e depois desse foram colocados no contexto onde nós teremos apenas hidrogênio 14 para
fornecerem montar essa nossa molécula de dna e não tivemos eles uma geração duas gerações que avaliamos os resultados nós olhamos claro que meçam está o povo tiveram experimentalmente nós podemos ver aqui neste pequeno resumo a nossa geração zero aqui ela tinha um nitrogênio mais pesado aí quando nós temos a nossa geração nos deslocamos isso para a nossa posição de híbrido ou seja essa posição aqui 14 e 15 quando nós fizemos a segunda geração nós tivemos um cenário tal em que eu mantive a banda desse nosso dna na posição 14 e 15 e apareceu uma outra
banda mais alta que ela poderia ser explicada pelo ganhar apenas composto de nitrogênio 14 logo os experimentos de mel são são store confirmaram que o modelo semiconservativo ele era o mais provável para explicar como ocorre a replicação do dna coisa agora que nós já temos um modelo para replicação ocorrer em si que nós precisamos efetivamente para a ligação corra eu sou do nossa analogia com a prensa de gutenberg nós precisamos na prensa de gutenberg ou seja preciso de um maquinário incapaz para realizar essa replicação nós vamos precisar de papel e tinta seja nós precisamos dos
insumos necessários para esta produção e nós vamos precisar também dos tipos que seriam aqui no nosso caso a nossa informação original a ser copiado seja as letrinhas e a mais importante a ordem que essas letrinhas deveria ser utilizada grosseiramente pensando o dna funciona da mesma maneira eu vou precisar de uma máquina e a celular envolvida com o processo de aplicação eu vou precisar de nucleotídeos e elementos para montar essa nova molécula que eu precisarei aqui da nossa fita antiga para que esse nosso modelo de replicação semiconservativa consiga realizar uma cópia de uma das fitas reproduzir
fitas novas não tendo a mesma informação dentro desse contexto em 1959 com berg conseguiu descobrir as a prensa de gutenberg ou melhor dna polimerases as enzimas envolvidas propriamente como processo de replicação do dna arthur kornberg foi capaz de indicar em mostrar funcionalmente que existe uma enzima da página a partir de uma única molécula de dna a única molécula de dupla-fita e insumos necessários era capaz de realizar a replicação semiconservativa que mesmo são estavam proposto peças dna polimerase justamente elas são responsáveis por replicar o dna dentro das células elas vão utilizar então usa a nossa tinta
e o nosso papel ali que você não as bases nitrogenadas os nossos nucleotídeos compostos por uma base nitrogenada o fosfato e o açúcar formando um nucleotídeo e utilizar a fita molde que será nida nesse processo para a realização da síntese propriamente dita nós observamos aqui a polimerização dessa nova fita ela vai ocorrer respeitam em adição no sentido cinco linha três linhas sempre adicionando um novo nucleotídeo na posição três linhas do nosso carbono do açúcar essas dna polimerase são justamente as enzimas que vão utilizar a energia presente aqui na quebra da ligação entre o fosfato alfa
ea do cunha beta e gama e vão adicionar novos nucleotídeos aqui na nossa vida esse processo então produz uma dupla fita a partir da cópia dessa sequência presente em uma das nossas fitas originais mantendo novamente a nossa estrutura de dupla fita antiparalela com seu esqueleto de açúcar depois fácil e aqui restaurando as nossas pontes ou ligações de hidrogênio respeitando as regras de chargaff com o pagamento ats composto por duas ligações e o pagamento gc composto por três ligações com esse eu trabalho das dna-polimerases elas vão utilizar aqui o nosso núcleo tio tem fosfatado e ela
e abusada energia que está armazenada nessa ligação trifosfato aqui o fósforo fosfato alpha para o beta e gama quando eu quebrar essa ligação eu forneço a energia necessária para que as enzimas consiga encaixar o novo núcleo aqui perceba novamente também que eu tenho a minha posição cinco linha aqui em cima e a posição três linhas aqui embaixo eu vou ligar esse nosso fosfato alpha do próximo do que eu tidio possa quebra de beto engano ou seja vou soltar esse pirofosfato essa dupla de funcionado se unidos ou ligar aqui na posição ó h3 linha do nucleotídeo
anterior quando eu encaixo esse novo nunca tive aqui eu crie uma nova ligação fóssil de esta libero o meu piru fosfato aqui eu posso continuar a polimerização respeitando sempre que eu usando a minha fita molde aqui eu peguei eu nunca tive que realizasse um pareamento adequado no meu caso como na fita molde eu tinha uma menina na minha oi filha eu coloquei uma adenina naquele lugar percebo que eu estou respeitando todas as características do dna nesse processo cinco linha três linhas 563 linhas nós temos um antiparalelismo conta aqui os cinco linhas vim aqui em cima
para baixo aqui o 5636 é de baixo para cima um os pareamentos de chargaff que estão todos completamente respeitados então uma maneira interessante de prestarmos atenção aqui é que existe sim a síntese no sentido cinco linha três linhas mas a leitura da fita está sendo realizado no sentido três linhas cinco linhas porque a direção da síntese está ocorrendo aqui em cima para baixo aqui tá nova é produzido no sentido 5.000 3g enquanto a velha é linda no sentido três minha sem cozinha é justamente a ampla distribuição dessas 505 litros em que leva ao surgimento de
piadinhas como essa sentido da vida é 563 as pessoas mais apaixonadas pela biologia molecular e chegam até esta que tatuagens aqui para dar norte a vida delas próprias indicando a direção cinco linha 13 anos por que que a síntese ocorre no sentido sim cunha terezinha uma pergunta relativamente interessante eu passasse evolutivo que seleciona as macro-moléculas e o funcionamento celular ele atua uma certa lógica pensamos não é que existam direcionamento nesse processo mas é mais razoável que as orações e máquinas mais eficientes e mais adequadas sejam selecionadas durante o mesmo porque elas apresentam uma vantagem para
aqueles organismos assim sendo pensem a energia está armazenada no meu no criticismo meu dntp onde o meu n aqui e vai ser até ser ou g esse meu desoxirribonucleotídeo vai ser ele for saudável o pirofosfato liberado a gente adiciona esse nucleotídeo logo a energia está armazenada ali no nucleotídeo eu treino crítico 1 15 sendo sentido 5636 então ele pode ser facilmente compreendido por que eu tivesse aqui o meu trifosfato com a energia mantida e a minha se fosse um sentido três linhas cinco linha percebam que aqui eu tenho a posição frente linha aqui eu tenho
uma ponta 5mm com a energia presente para a adição de um novo no curtir por mais que esse novo no prestígio também viesse com energia ele não a ganhar pelo menos não poderia usar essa energia para adicionar aquele no curtir dado que ela tem que ser armazenada para adição do próximo nucleotídeo e eu teria que ter essa conta completamente impacta e sem nenhum problema para que eu pudesse realizar só de som lembre moléculas energéticas tem as instáveis logo isso seriam bem risco primeiro porque eu poderia aqui perder essa nossa energia ter que reparar a molécula
de ganhar ou eu poderia ter um nucleotídeo defeituoso na nossa sala que seria adicionado e não tendo mais aqui a minha energia do fato ou seja não tendo fatos ou já não tendo mais um trifosfato ele poderia ser adicionado aqui nesse local pequeno ele já está na posição sua comida e consequentemente ele tem um filme ali aquela moleca em uma molécula que precisa ser corrigida precisa ter a energia adicionada novamente então por isso que esse processo é mais complexo que simplesmente a síntese ocorrer no sentido cinco linha três linhas o que acontece na 153 aí
primeiro que eu não preciso ter energia na minha molécula a molécula de dna ela deixa de ser aspas tão reativa não tem energia armazenada aqui nela para medir a energia ela está no meu nucleotídeo que chega com a mesma caso eu tenho um nucleotídeo que não tem energia como aqui no meu exemplo anterior ele simplesmente não é adicionado nossa nossa molécula nascente por quê porque a energia do próprio nucleotídeo precisa ser utilizada para que a incorporação na nossa fita ocorra espero que isso ajude vocês a compreender e lembrar por que que um simples sempre é
cinco linha três linhas nós dependemos única e exclusivamente energia que vem com esse novo nucleotídeo a passo mensagem facilidades e moléculas altamente energéticas vivem as dna polimerases elas enfrentam alguns problemas durante esse processo o melhor o processo de replicação enfrenta alguns problemas o primeiro deles é eu tenho uma dupla fita essa torcida precisa ser aberta de alguma forma tem vai fazer isso não vai fazer isso nós precisamos que para essas ligações de hidrogênio para poder iniciar a replicação dessa nossa molécula existe um trabalho esforço será que as próprias dna polimerase são capazes de realizar esse
processo animais que isso eu preciso continuar abrindo essa nossa fita eu preciso ir empurrando e continuar esse nosso processo nem simples e aqui eu estou representando assim sem pressa filho e a fita contrário como será realizada assassina aquela realizada da mesma maneira ou existe algum outro problema que pensa é uma do top tá eu estou abrindo lá no meio eu vou alterar a porção dessa nossa moleque será que você vai fazer algum tipo de problema vamos compreender a primeira estrutura que nós precisamos conhecer a justamente a nossa bolha ou forquilha de replicação bolha essa estrutura
como um todo aqui que está sendo representada que apresentará uma forquilha neste lado e uma forquilha do outro lá porque ele é porque eu tenho aqui uma bifurcação no qual está sendo aberta e eu estou realizando a síntese tanto desse lado quanto deixa lado aqui e isso forma uma bolha nessa nossa molécula de dna eu percebo que conforme eu vou abrindo especialmente quando estou trabalhando aqui uma molécula seja circulares eu vou aumentando a tensão do outro lado e um gerando superhelis expositivas o que significa eu tenho uma dupla hélice que ela vai ficando mais torcida
e agora eu não estou respeitando mais aquela distância entre os nucleotídeos porque ela está aumentando a sua atenção nós vamos entender isso mais e mais ainda vamos entender como isso é corrigido pelas células o outro problema que precisa ser resolvido é justamente o da fita aberta mesmo que acidemia vai tentar sempre fazer um pagamento correria o risco dessa molécula fechado novamente antes da dna polimerase chegar ou mesmo começar a interagir dentro da própria molécula está me fala a beleza dessas nossas ligações hidrogênio em serem realizados eu preciso de uma maneira para manter o dna aberto
depois que ele é aberto pela enzima responsável por esse processo nós temos também proteínas de ligação ganhar unifilamentar ou assim gosto and jimmy barnes totens ssb o que elas fazem conforme a gente vai abrindo essa nossa molécula de dna elas vão ligando na mesma até que a nossa dna polimerase chega e faça o trabalho dela mantendo essa molécula em simples fita mas nós resolvemos aqui o primeiro problema que poderia ser causado por esta molécula aberta dentro do citoplasma outro da célula eucariótica outro ponto que nós devemos entender é que as pontas eu ganhar não estão
soltas passaremos qi o número de cromossomos o dna procariótico ele é circular ou seja ele não tem pontas logo elas não estão soltas eu tenho eu carioca pelo mais linear que seja ele não estão disperso no citoplasma e ele é muito grande então nós temos um problema relacionado com essas pontas que estão presas são torcidas com forma somos amigos a fita você tá entender um pouquinho melhor utilizando duas coisas como essas e ainda bem que existe a pasta de edição gente pode acelerar um pouquinho esse processo então vamos imaginar aqui que eu tenho uma dupla
hélice percebeu tenho uma corda aqui dupla amarela é uma corda presa tem que sada a qual está aqui representando o nosso dna por causa eu realizo uma abertura dessa nossa molécula o que acontece vou começar a tencionar ela aqui nessa posição abrindo a mesma tentando forçar que ela vire um amor aberta então vamos continuar abrindo aqui nessa direção fazendo força para ficar da música mais difícil de realizar esse processo até que quando eu solta aqui ela tende a formar essa super hélices ou seja a formar uma supertorção nessa molécula peças supertorção problema porque assim como
eu já estou fazendo muita força aqui para conseguir abrir essa nossa hélice as enzimas terão o mesmo problema ou seja elas precisarão de alguma forma demais bom dia para esse processo até um ponto que será limítrofe e ela simplesmente não conseguirá abrir mais essa nossa moleque entendemos um binya completamente emaranhado vamos entender aqui eu tenho uma ponta que presa conforme eu vou abrindo essa nossa dupla hélice eu vou aumentando a minha torção aqui presente até o ponto em que eu tenha essas super hélice sendo formadas aí eu não consigo mais avançar na nossa replicação do
dna porque simplesmente porque eu não tenho mais energia e força para abrir essas duas fitas logo eu preciso de algum vizinho aqui após a abertura dessa nossa molécula de dna ela seja capaz de distorcer esse excesso formado durante a abertura e imagine que eu tenho aqui uma porção do dna que sofreu essa super porção a ganha topoisomerase ou dna girase ela entrará em ação realizando uma quebra que por exemplo de simples fita essa quebra de sempre cita permitirá uma girada por isso dna girase na nossa molécula de linha ela ao girar vai aliviar essa tensão
formada aliviar a situação formada nós teremos uma situação tal em que a fita pode ser fechada novamente e agora eu tenho uma molécula íntegra e sem o excesso de torção folga dna top iluminação mínima necessária no processo de replicação para evitar a formação de torções impeçam a abertura da nossa fita nós falamos o tempo inteiro aqui da abertura da fita que abertura da fita é necessária mas não demos nome a enzima envolvida com esse processo sambinha helicase ela justamente vai quebrar essa nossa hélice abrindo a é a sua função então nada mais é do que
como se fosse um grande zíper molecular percebam nessa animação dna-helicase que está vindo ali ela vai abrindo esta nossa fita e gerando duas pistas simples e não mas a nossa dupla fita na nossa foi ilha de replicação assim sendo eu tenho aqui a minha por quilha de replicação aberta pela ele casa e eu posso iniciar o processo de replicação processo de replicação do dna ele vai começar com a síntese de um primer o que acontece as dna polimerases elas tem um pequeno problema elas necessitam de uma posição três linha ou h livre para iniciar a
síntese sei lá do nosso açúcar a posição três linha tem que ter um olhar a linha a polimerase ela não consegue colocar o primeiro nucleotídeo ela precisa que já existiam no coletivo ele é uma enzima que consegue fazer a primazia o que ela é incapaz de adicionar esse mesmo que eu tiro de dinha ela precisa adicionar ensino curtido de r então vai adicionar esse primeiro nucleotídeo vai produzir um pequeno trecho de rma que representado em vermelho e aí sim eu terei uma posição teresinha h livre essa posição 13 nem ou a galinha e poderá ser
utilizada pela dna polimerase para que a síntese vá pro senir de maneira correta o nós podemos ver nessa situação eu tenho esse trechinho dna a dna polimerase ele entrou aqui nessa posição e ela pode ir adiante realizando a síntese ela tem agora um pequeno problema que eu iniciei a minha síntese de dna mas eu tenho um pedaço de rna no meio do caminho esses olha no glúteo seja pequenas quantidades microtiles que nós chamamos de primers sintetizados por enzimas designada de primazzi eles vão precisar de ser removidos oi adri são imprescindíveis para o início da nossa
síntese podemos observar aqui nessa nossa animação então com a nossa fita aberta a primazia e vem e começa a adicionar bases de rna essa adição de bases de é rei a permite o surgimento de uma posição três linhas o h livre para que a bem a polimerase possa efetivamente replicar assim nós temos uma consequência produzida para o processo de replicação extremamente importante vamos imaginar aqui que eu tenho uma bolha como um todo ela continua para essa direção aqui a qual nós não estamos olhando para este lado mas nós temos a forquilha desta posição avançando naquela
direção então nós estamos abrindo essa nossa fita na direção está aqui indicar essa nossa fita molde aqui então ela vai ser aberta e precisa ser líder de alguma forma para que a eu tenho conservativa ocorra percebam aqui que eu tenho uma posição na nossa fita azul 3 linha aqui consequentemente uma posição cinco linha para este lar logo eu estou lendo a minha fita nessa direção e sintetizando no sentido cinco linha terezinha perfeitamente então aqui nessa posição alívio ter adicionado um primer de rna a minha dna polimerase começou a síntese ela continua sintetizando essa nossa moleca
e conforme a fita for abrindo e acordo com a abertura dessa nossa porque ela vai continuar a síntese de maneira indefinida ou seja até terminar esse processo justamente por isso essa fita que é chamada de fita líder ou líderes trans ainda fita continuar porque ela vai continuar mente sendo sintetizada conforme a nossa forquilha vai abrindo ela by realizando assim um cuidado e nossa moléculas de dna ela mandou para ele se antipar e se a direção de síntese aqui é para este nosso lado a direção de síntese da outra fita obrigatoriamente para o lado oposto percebo
aqui que nós temos o nosso cinco linha que livre nessa posição logo aqui está o meu três linhas e eu preciso ler a nossa fita mão de nessa direção assim sendo aqui eu tenho o meu pai meu dr a eu continuo sintetizando naquela direção qual é o problema disso como eu vou abrindo novas novo trecho da minha dupla fita eu vou gerando fragmentos que precisam ter adição de novo primer dna e preciso interessa nossa síntese quando a síntese como é continua ela vai chegar nessa posição onde ela já pode iniciar assim sendo nós teremos a
criação de uma síntese desses continuar nessa nossa fita que vai ser a fita atrasada ou a fita legging sempre que a forquilha está vindo nessa direção aqui eu tenho simplesmente um esquema investir então minha filha líder está aqui em cima respeitando é sim ele está sendo lida e assim trazemos sentido cinco linhas três linha contínua aqui em baixo vou ter a minha cinta e bebês com tina ela está ocorrendo dentro dos cinco linhas três linhas 563 linha respeitando aqui o meu antiparalelismo mas conforme eu vou abrindo a minha forquilha eu posso adicionar o novo primer
iniciar uma simples até o ponto onde eu tinha o primer anterior adicionado como essa fita na fica fragmentada sendo uma síntese desses continuar justamente esses fragmentos aqui são designados de fragmentos de okazaki cientista responsável pela descoberta da existência dos mesmos esses fragmentos aqui caracterizam a síntese da fita legging ou da nossa fita atrasada sabendo agora que eu tenho distintas variações entre as fitas e tem o situações diferentes para síntese bem interessante que nós tenhamos agora as polimerases para realizar cada ti é necessário a dna polimerase preço é a polimerase que faz a maior parte dos
trabalhos pesados ou seja ela sintetiza essas nossas fitinhas aqui em amarelo sintetiza grandes trechos de dna com uma relativa eficiência e fidedignidade que acontece é que ela vai atuar ligando-se no primer ou não percebemos aqui a dna polimerase no caso tenha os melhores empresas começa a partir da posição 3 linha ou hd nosso primer a adicionar bases de dna essa adição de bases de dna vai respeitar o direção cinco linha três linhas e vai continuar nessa nossa fita líder aqui representada da do que a nossa molécula está abrindo nessa direção vocês podem perceber na forquilha
aqui na posição de baixo nós temos a nossa fita legging onde o primer vai ser adicionado novamente e nós poderia o processo de ciências descontínuo eu também tenho esses fragmentos embaixo você nos pagamentos de okazaki percebam a nossa legging aqui embaixo é produzido um primer na posição cinco minha princesinha ali onde ocorreu essa síntese e se fragmenta chamada de fragmento de okazaki conforme o nosso só porque ilha avançou a primazia pode vir adicionar um primer de rna esse frango de rna será utilizado como início para nossa dna polimerase que em sua posição três linha o
h livre e a incluir novos nucleotídeos esse processo tem que ser repetir novamente dado que conforme a nossa por que avança mais regiões disponibilizadas para a adição do primer para primazzi e para a síntese de dna pela dna polimerase e assim sendo eu tenho alguns problemas a resolver especialmente esses nossos primer de rna para estas para este problema nós temos abinha polimerase um ela está relacionada com a remoção desses primer de rna e são precisados dessa nossa fita e a síntese de uma molécula de vinha adequada aqui nessa posição então ela consegue completar essas regiões
agora removendo e não deixando mais a nossa fita um híbrido a nossa dupla fita não é mais um composto de rna e dna em alguns trechos como nós temos ainda aqui a dna polimerase um ela remove ensino esses núcleos de rna e adiciona nucleotídeo de dna no lugar percebendo que essa nossa dna polimerase ela já apresenta agora uma outra função ela não apenas sintetiza dna ela também é capaz de degradar venha isso por 15 mas elas podem ter dominios domingos enzimáticos são gonçalo em pedaços da enzima grosseiramente falando que apresentam funções especializadas por exemplo eu
posso ter um domingo nossa dna-primase que é responsável por sintetizar então ele é capaz de adicionar novos domínios é o novas não utilize o nosso domínio polymer ar eu posso ter um domínio excel no criado no sentido três linhas cinco linha ou seja no domínio que ele vai remover núcleos na direção pé dia síntese ocorre no sentido cinco linha três linhas eu estou removendo no sentido três linhas cinco linha é começou a sair em cima um base para trás removendo nucleotídeos nós vamos entender em conta esses é importante outro domingo que essa nossa dna polimerase
foster não domino at nuclease sentindo cinco linhas três linhas ou seja ela vai andando e removendo nucleotides é o que a dna polimerase um faço ela remove os nucleotídeos o primer e vai com o seu domínio polimerase adicionando novos no presídio o local vai ser bom aqui é o meu essa nossa atividade é que são clássicas 5 m3 vinha da bem a polimerase viu é extremamente percebo que eu tenho aqui o pai não era ser removido em roxo a nossa dna polimerase 1 está aqui a adicionar novos nucleotídicas ela está ligado aqui na posição 13
em hd esse fragmento que foi deixado pela dna polimerase três e que vai acontecer nós teremos a enzima quebrando ou seja removendo esse nosso primer rosto aqui simultaneamente adicionando no cultivo de bem a local fazendo isso até finalizar a remoção dessa nossa região roxo de rna e adicionar dna nesse local percebam que ainda vai ficar um buraquinho aqui porque por mais que eu tenho os dois nucleotídeos eles não estão efetivamente ligados por uma ligação falsa de essa eles estão só e os apóstolos e já temos resolver esse problema e o nosso domínio de simples e
basicamente ele vai adicionando novos brt peso novos nucleotídeos nós temos a nossa fita molde aqui embaixo a nossa ficar trabalhando em cima dna ele traz um dntp de dna e adiciona ocorre uma translocação seja nossa bem a primeira ciranda e ela pode novamente nesse do seu domínio polimerase adicionar não um nucleotídeo que eu tenho uma falha nesse processo o suporte esse nosso domínio de síntese adiciona um nucleotídeo inadequado que não respeite o pagamento de enxergar pode acontecer nós podemos aí caso o dna polimerase apresente requisitar a sua função é que sobrou clássica no sentido 365
linha ou seja uma podemos ver aqui a nossa em cima adiciona uma base em correta ela literalmente da remove essa base incorreta que foi adicionada por ela a própria pelo seu domingo polimerase e aí pode novamente adicionar a e é também o local onde é que eu mandei um pouquinho mais detalhado justamente esse domínio três linhas cinco linhas de acção no caso que permite isso vamos imaginar que a nossa enzima está aqui ela está adicionando esse nucleotídeo e ela errou nesse processo você já ela adiciona um para mim não tem nada quadro percebam aqui que
nós temos um jeito como ser no pagamento correto nesse nosso sítio pós-inserção e aqui no sítio de inserção ou seja o nosso domingo polimerase nós adicionamos um separando com o p q não é o pagamento correto mas estaremos no sininho mesmo na sua molécula de dna assim sendo a polimerase vai ser reposicionar e colocar o domínio esse look as três linhas cinco linha nesta região após esse reposicionamento esse domingo não tem realmente falar em cima dar uma rezinha e nesse processo de ré ela remove o do que eu tive que foi colocado em nada canal
mente nesse nosso caso aqui uma citosina uns e ao o processo a dna polimerase pode retornar com o seu domingo polimerase para o local de síntese ao retornar com ele e ela tem uma nova tentativa de adicionar o outro nucleotídeo ela pode errar novamente mas como ela era muito menos do que é certa ela vai adicionar um nucleotídeo muito problema de correto em continuar o processo de síntese caso alá de sono que eu tô errado novamente nós retornaremos aqui em cima e faremos esse ciclo novamente sintetizando finalmente a molécula correta e como esses domínios influenciam
a taxa de erro da replicação do dna vou pensar aqui uma polimerase bacteriana que não tem esse tipo de correção ou seja que seja incapaz de retirada do curtindo que foi adicionado um corretamente ela comete um erro a cada dez a segunda ou dez a terceira bases adicionados ou seja uma arrancada sem amil nucleotídeos e seria grosseiramente uma a moradora de jardim olinda menor município do paraná e tem cerca de mil e trezentos habitantes ou seja aquela é a primeira la sierra em morador desse nosso município cultivar correção nessa nossa em ou seja ela tem
a capacidade de retornar me retirar as dna polimerases bacterianas chega uma taxa de acerto 10 oitava 10 a nona o que dá cerca de um erro a cada por exemplo deram um bilhão de pessoas que agora é grosseiramente um habitante da índia dentro do universo de mais de 1 bilhão de pessoas que lá mora e se por acaso tiver uma dna polimerase eucariótica ainda mais eficaz ela pode chegar a uma taxa de erro de uma cada tens a décima ou uma cada dez bilhões o que você mais ou menos 1 a cada um planeta inteiro
em mais um terço de pessoas que nele moram lembrando que o nosso planeta ele é esférico e não quem sabe essa nossa parte de ela parece muito baixa para nos preocupar é tanto quanto nós observamos o tamanho dos nossos genomas era começa a ficar e significativo observar esse gráfico aqui o lado onde nós temos aqui no nosso x a idade de concepção dos progenitores para um determinado cruzamento aqui no nosso eixo y a quantidade de mutações ou seja alterações no dna que nós temos na prole que venha nascer nós percebemos uma direção uma correlação positiva
aqui com o nosso material paternal por quê porque os espermatozoides são produzidos durante toda a vida assim sendo as nossas células produtoras de espermatozoides vão sendo replicados e repicados e replicadas e vão acumulando erros durante os processos erros esses que eventualmente são transmitidas para a própria caso a idade do parental não acho seja muito avançada no momento da concepção que nós olhamos aqui para essa nossa linha rosa e a prima da nossa página fêmea maternal o que nós teremos é um aumento também mas não aguento muito menos intenso nada que os óvulos são produzidos já
desde infância desde o processo de nós já temos os nossos ovócitos dois ali produzidos assim sendo nós não temos essa taxa de aumentando no tempo ou seja o erro por mais que pareça desprezível frente o tamanho nosso ele começa a ficar assim indicativo observando esse nosso panorama geral do processo de replicação do dna nós temos aqui uma bolha de replicação a qual nós estamos olhando para um dos lados que está aqui representada a nossa porque nós temos a dna helicase realizando a abertura das a nossa dupla fita nós temos a dna girase o dna topoisomerase
aliviando as tensões que são aqui produzidas nós temos a dna polimerase três realizando a síntese da sua fita líder nós temos a r a base produzindo primas aqui na nossa pimenta diz continuar nossa fita legging nós temos aqui em laranja as nossas single strings by in proteins as nossas ssb proteínas de ligação a fita simples que evitam que se ganhar feche novamente nós temos aqui a dna polimerase três atuando no primer de rna produzido na nossa fita legging e nós temos consequentemente os nossos fragmentos de okazaki fragmentos esses que estão sendo parcialmente corrigidos pela dna
polimerase 1 está removendo as regiões de rna e adicionando dna no local deixando as fitas sem ligação e nós temos a dna ligase que justamente a tua e a última enzima que tá faltando nesse nosso processo nenhum desses nossos dois fragmentos que foram produzidos pela bem a polimerase 3 a partir de determinado ponto e sintetizados pela dna polimerase 1 na substituição do primer a ver melhor como esse processo funciona esse é bom aqui que eu tive a remoção do nosso prime pela dna polimerase que eu tenho agora esse pequeno espacinho esse espacinho na verdade é
simplesmente a ausência da ligação fosfodiéster ou seja o fosfato que está na sincronia de um coletivo ele não está ligado nas três minha olha do nucleotídeo anterior aí a dna ligase vir aqui utilizar a energia de um outro recurso do app com essa energia ela será capaz de fechar essa nossa ligação estabelecendo uma nova ligação falsa de esta em resolvendo essa último detalhe nascentes molecularmente falando que nós temos o uso do app ou seja de um nucleotídeo e nucleosídeo aranha pela dna ligase quebra a sua ligação fossa.das obrigação posto fosfato alpha com o fato beta
e gama e bera esse nosso pirofosfato gerando namorar com a mp o fecha a ligação pensando o quê que eu tenho essa nossa quebra de fita simples não sumi meu dna e agora aqui embaixo nós não temos mais esse muito presente nós temos uma ligação falsa de é ser adequadamente estabelecida resumindo aqui o processo e uma maneira geral nós temos uma região que nós vamos designar de origem de replicação é um de inicia esse processo de abertura são regiões conservadas com uma sequência específica que recrutam as enzimas para iniciar o processo de replicação com da
célula entra em fase s essa fita é aberta pela nossa ele case e nos sintetizamos os nossos primeiros dr a para iniciar a síntese da nossa fita niver ao iniciarmos esse processo nós começaremos agora a expandir a sua nossa bolha para os dois lados continuam com as fitas líderes que permanece em síntese começamos a sintetizar a fita alegre ainda são nossa forquilha aqui é a fita legging da outra por kia pensando no que dá a proposta é onde paralelismo das fitas olhando deste lado da bolha nós temos a fita alegre em cima e a fita
linda embaixo do outro lado da bolha na outra forquilha nós temos aqui tá líder em cima é a fita legging embaixo também que não precisamos respeitar o unite paralelismo das filhas a replicação do dna em eucariotos ela funciona de uma maneira muito similar a replicação nas bactérias como ali mencionadas nas nossas nomenclaturas basicamente nós teremos enzimas muito parecidas como por exemplo a dna polimerase epson fazendo às vezes também a pra lembrar de três a dna polimerase uma ela precisa de duas nas polimerases a dna polimerase alfa e eu nem a primeira se delta para realizar
o processo de aplicação mas em minas gerais o processo exatamente o mesmo mudando apenas a nomenclatura dessas nossas moléculas dos últimos lá para nossa pergunta do início à aula como poderia produzir uma vacina para a doença de marek conhecendo melhor os mecanismos de oi sobrinha essa nosso vírus anime ouvido ele tem bem a como seu assunto que por acaso eu produzo um vírus que tem uma ele case e uma primazzi deficientes ou seja com uma menor capacidade catalítica mas ainda com um capacidade catalítica nós teremos uma partícula viral e consegue replicar de uma maneira mais
linda assim nós vamos tempo para que o sistema imune das aves conseguiu combater esse livro é uma maneira de atenuar o mesmo então nada mais é do que adicionando neste vírus na sequência sair de casa e da é primário do mesmo mutações alterações que reduzam a sua capacidade proliferativa assim o vírus ele é infectivo ele começar a ir envolver doença mas a própria ave consegue desenvolver anticorpos antes e a vacina se torna então protetiva para o animal caso você precise rever algum conceito que nós e nesse vídeo eu sugiro que você deixa na descrição do
mesmo ali você encontrará minutagem dos tópicos específicos e pode clicar nela e ir para uma posição específica ou então utilizar aqui na própria barra do vídeo e escolher o capítulo do seu interesse até mais e bons estudos