E aí o Olá Lulu sejam bem-vindos a segunda semana da disciplina de imunologia clínica então na semana anterior a gente acabou vendo um pouquinho sobre alguns testes diagnósticos que a gente utiliza para imunologia Clínica é alguns uma diferença em relação ao antígeno e anticorpos e agora a gente vai ver alguns parâmetros que são importantes para os testes sorológicos dentro da patologia clínica então é nós temos sempre que analisar alguns pontos principais para ver se realmente o teste é fidedigna verdadeiro e se ele é bem aplicável a determinada patologia então sobre esses parâmetros dos Testes sorológicos
nós temos alguns conceitos básicos que são bem importantes que varia da titulação então titulação é um processo que a gente vê em relação à quantidade né de amostra positiva verdadeira então é o seguinte a o jilo e essa moça e nesse processo de diluição a menor concentração a gente vai obter na maior titulação por exemplo em testes como o r t r e o vdrl nós utilizamos a titulação Avenida verificar qual o título que tem e maior concentração de anticorpos contra determinada patologia principalmente na contra simples é um teste inespecífico Tá mas auxilia muito no
diagnóstico por exemplo titulação da do vdrl é feito na direção de um para dois contra 4 para 8 16 32 64 e assim consecutivamente então quanto maior a titulação maior número de anticorpos gente vai ter e uma mostra isso serve um acompanhamento ver importante o acompanhamento em determinadas patologias Além disso nós temos os testes de referência sensibilidade e especificidade falso positivo é falso negativo o Gerson cruzada quando a gente tem interação entre um antígeno eo anticorpo não específico a ele precisão exatidão o acurácia reprodutibilidade eliminar de reatividade Então nós vamos ver cada um desses tipos
de conceito e sua importância dentro do padrão da imunologia clínica então por exemplo quando a gente pega o nosso sangue centrífuga nós vamos obter uma amostra que temos por emissor antígenos e anticorpos nessa mostra EA partir dele a gente vai verificar se realmente a gente tem determinada patologia ou não então os desses primeiros pagamos o senhor temos são os testes de referência teste de referência é um teste que já é pré-determinado que nós sabemos saber sabemos determinada concentração de uma amostra e nós realizamos os formatos distintos então é um padrão ouro que a gente utiliza
para lá a patologia por exemplo teste de referência em relação a concentração de uma substância dentro de uma doença ele é importante é realizado por um método mas nem sempre pelo mesmo método em outra patologia por exemplo quimiluminescência o teste padrão para uma patologia e a Western blotting para outra patologia então nós temos diferenças entre uma e outra um determinado teste de referência e testes padrão que determina né um padrão ouro em cada a minha cara patologia o Limiar de detecção esse Limiar de detecção ele é a menor concentração ou quantidade de um método pode
detectar então é a concentração mínima de uma substância que é detectável em um determinado objeto por exemplo a dosagem de anticorpos a gente consegue detectar concentrações mínimas é por isso que ficou gramas em uma rádio em município é porém Nem sempre é a quantidade é assim alinhar né da doença então às vezes no início de uma fase de uma doença às vezes a gente não detecta a quantidade de anticorpos E aí a gente passa para outro método que seja capaz de detectar né nem que seja os anticorpos em uma concentração pouco menor ou até mesmo
outras substâncias que vão determinar a presença de uma patologia por exemplo um PCR que a reação decadente polímeras pois pode pegar o material genético em determinadas fases da doença nós temos determinados limiares de detecção ou também janelas imunológicos né então isso é importante a gente saber em cada patologia para saber qual o teste aplicar Além disso nós temos a sensibilidade sensibilidade é caracterizado como um Resultado positivo verdadeiro Então esse Resultado positivo verdadeiro é também a sensibilidade Clínica diagnóstica é quando você tem um ensaio que apresenta Resultado positivo Para uma determinada doença ou uma desordem clínica
então se esse teste é sensível ele determina realmente se você tem aquela patologia tá aqui ela patologia eu consigo detectar com a quimiluminescência consigo ver com esse teste detectar uma mostra e dizer Você está com HIV tá então a civilidade capacidade de detecção verdadeiro Resultado positivo verdadeiro já especificidade é o resultado negativo verdadeiro então é a capacidade do tef ser negativo para indivíduos que não apresentam a desordem Clínica ou a determinada doença Então ela específico para um epitopo diante é por exemplo assim você tem os anticorpos esses anticorpos eles têm uma determinada especificidade para o
antígeno de um patógeno tá vamos pegar por exemplo HIV o HIV ele tem a glicoproteína gp120 né na superfície da membrana então um teste específico ele vai determinar que aquele anticorpo contra o antígeno do HIV não contra o antígeno da rebelva Então essa especificidade é importante para detecção da doença e ele é um resultado negativo verdadeiro tem uma pessoa a gente realmente essa doença e já a reação cruzada Esse é um quesito bem importante porque porque nós temos antígenos passamos substâncias que são parecidas com outras substâncias de patógenos por exemplo então reação cruzada é quando
você produz um anticorpo por exemplo conta um continuar tá então esse anticorpo é um antes a aí você tá vendo aqui a uma porção aqui o e Pitu pô do antígeno B é muito semelhante ó Faz igual a porção do antígeno A então esse anticorpo anti já ele consegue se ligar perfeitamente quase ao antígeno b então isso é uma reação cruzada que eles estão compartilhando um tipo tá uma porção semelhante ali então essa reação cruzada é determinada pela ligação de uma de corpo não específico ao antista e isso pode acontecer Também com esse exemplo lateral
e no é cê ele também interage não fortemente né mas também interage com um anticorpo anti ar porque tem um epitopo semelhante tá então esse que aparecidinho mas não totalmente igual e ele tem uma ligação mesmo que seja fraca tá para isso a gente tem uma constante de dissociação tá então esse determina a força de ligação entre os antígenos é importante essa reação cruzada para indicar que às vezes você tem uma determinada patologia Mas pode detectar anticorpos contra a outra por exemplo doenças auto-imunes podem dar um resultado falso-positivo no vdrl tá de um padrão de
1 para 4 até um para oito então essa titulação quebrou-se falou anteriormente Então isso é interessante porque a essas reações cruzadas tem que ser analisados como a maior cidade porque evita né arr os falso-positivos tá bom E além disso nós temos a exatidão EA precisão então a exactidão ela é um valor obtido mais próximo do verdadeiro possível daquela mostra então é preciso analisar em a figura figuras aqui na lateral nós temos um alvo né E quando o nossos valores são exatos e precisos todos eles ficam muito próximos uns dos outros quando o valor ele exato
mas é impreciso eles ficam próximos uma mesma região ali praticamente Tá mas não tão perto um do outro então o valor exato É o mais próximo acertar por exemplo a tenho 1 micrograma de antígeno viral então no teste ou de ter que tem 1,58 0,9 então eles são próximos a exactidão Mas não tão precisos assim a visão ela é concordância dos resultados então por exemplo eu vou obter a eu teria uma concentração exata de 1 micrograma Só que eu obtive em três métodos diferentes três microgramas Então os 3 testes que eu testei todos eles detectaram
aproximadamente três microgramas de concentração de antígeno viral então eles foram precisos mas não exatos na mesma concentração então um teste inexata e impreciso ele é assim um Pouquinho complicado porque ele não fica nem próximo do valor Está correto e nem todos eles são próximos dos outros tá E além disso nós temos a reprodutibilidade tá então é tão resultados iguais de uma mesma mostra então a gente consegue reproduzir isso né entre um teste outro cuja técnica pode ser distinta tá ou realizado por pessoas diferentes também então quanto mais você consegue reproduzir um valor aproximado de uma
detecção antigênica ou de detecção de anticorpos melhor é a sua técnica tá mais correta essa técnica então isso são padrões que a gente deve seguir para reproduzir ele modo né exato específico né exato e preciso também determinadas práticas para determinar os testes e doenças ó E além disso nós temos o katoff tá o katoff é o ele é o Limiar de reatividade é onde os valores acima do ponto de corte são positivos abaixo do ponto de corte são negativos Isso serve para algumas variações que a gente tem determinadas técnicas práticas que pode ter por Essência
tá então lembra que o prof a falar um pouquinho anteriormente da nós temos nenhum católica em relação a Florence autofluorescência celular e a partir daqui que Serra seria a fluorescência pela ligação dos antígenos né com sorocromo então é esse katoff é um ponto de corte onde resultados antes são negativos nós podemos considerar em alguns pontos como threshold também tá então para o outro se colocou aqui na lateral segura quatro vão analisar nós temos algumas ahm Oi tá uma mostra em azul aqui ela subiu antes tá a fluorescência um PCR a gente consegue obter esses dados
tá e a outras amostras ela tiver um pequenas variações eu escrevi esse treco de por mais que uma mostra subiu ela subiu a depois o máximo número de ciclos que a gente pode ter para detecção Então a gente tem que ter pontos de corte para determinar um de amostra ela é positiva e onde amostra ela negativa no caso do PCR ele pode formar dímeros de primer por isso e a fluorescence pode subir em Pontos bem maiores né do que o número de ciclos especificados como correto então esses parâmetros eles são bem importantes para gente seguir
em uma prática para determinar a maior capacidade correta dos resultados os valores precisos e exatos realmente das concentrações de antígenos as concentrações de anticorpos gente vai ter então nós para isso a gente segue esses padrões que são bem específicos para cada tipo de técnica então e cada laboratório também vai ter uma certa especificidade em relação a esses padrões né então é tem pessoas que utilizam técnicas e o laboratório que difere um pouquinho da técnica utilizada em outro laboratório só que se o valor da mostra por igual entre um e o outro tá tudo correto Então
tá tudo certo a gente tem que seguir esse padrão para detecção o mais correto possível tá a sensibilidade e especificidade são padrões bem importante que ele tem que seguir para ver verdadeiramente né O que é reagente não reagente dentro de um teste imunológico espero que vocês tenham entendido um pouquinho sobre agora esses parâmetros são importantes para a gente analisar dentro de outras técnicas é um abraço até a próxima ao [Música]
