Aula 8 - Determinação de lipidios com extração à frio

o Olá turma tudo bem a na sala de hoje é sobre determinação de lipídeos com extração a frio Essas são as frio Ela usa uma mistura de solventes a gente usa clorofórmio metanol uma proporção que ele que essa mistura fique homogênea e depois a gente adiciona então água com Sulfato de sódio para que a gente consiga separar as fases e a fase lipídica real pular vai ficar no cloroformo enquanto que a fase polar vai ficar no metanol vamos pegar as nossas amostras esses tubos de centrífuga quando amostra não tem boca de vidro pouca gordura a

gente pesa mais à mostra e quando a gente tem uma morte tem bastante de perder bastante gorduras de casamento as pesadas amostras a gente vai adicionar à mistura de solventes né mas falar por um forma e vai estar aqui nessa estrada do meia oro vai acionar o fato e vai ficar de novo então eu vou lá trabalhar no centro a gente fazer a verdade então nós vamos 6 horas nossas amostras aqui para determinação de lipídeos com extração a frio tubos de centrífuga de 50 ml a gente ajustou as quantidades de solventes e de amostra Por

que coubesse tudo nesse estudos Então já identifiquei alguns aqui e nós vamos fazer então a nossa moça de arroz a nossa mostra de morango e a nossa mostra de linhaça então eu vou começar temos diferenças né é uma outra de linhaça ela vai ter pouco mais de gordura a gente pode pá é tão cerca de um grama meio por aí já é suficiente amostra de morango tem muito pouco então dois anos e meio talvez até três e arroz também tem bem pouquinho porque não é arroz integral e arroz branco então a gente também tem diferença

Independente se ele fosse branco ou parboilizado a a tendência é sempre ter menos a a quantidade de lipídios porque sofre um processo de polimento Remove a camada externa dos grãos né E com isso a maior quantidade de gordura é removida Vamos iniciar o começar com a linhaça tão usam Becker de apoio e aí a gente coloca a mostra o tubo dentro Beck para que ele fique de pé parados aqui a gente vai pesar amostra não precisa anotar o peso do tubo a gente só precisa saber mesmo a massa da amostra o pessoal a cerca de

um grama para a linhaça então E aí A história se repete essa operação para todas as amostras pesagem simples né todo mundo já tá acostumado a fazer depois de feito isso então a gente vai para a tradição de do solvente de extração eu vou finalizar aqui e a gente já vai adicionar daqui a pouco a gente retorna é tradicional tradição do sol vem cá a amostra atrasada né renasça morango arroz e morango Lembrando que esse método ele permite que a gente trabalha com amostras úmidas tranquilamente são 8 ml de clorofórmio em cada tubinho E aí

e finalizei aqui a ação de clorofórmio nas amostras agora eu vou adicionar metanol 16ms para que eu consigo até então uma uma uma organização né nessa minha solução a solução homogênea sem separação de fase E aí com isso eu já iniciam o processo de extração com a mistura desses dois solventes e com água né naturalmente presente na amostra A1 a sensação de rosas sorvetes adicionados né Vamos parar a situação esse agitador ele é o mundo organizador de sangue é o movimento dele é orbital e a gente vai então usá-los para homogenizar acusar novas aqui ó

e Geralmente eu coloco uma borrachinhas né para que a gente a nossa fique bem empresa não vai a durante o processo de educação essas amostras vão ficar que cerca de meia-hora Agitando Na primeira fase e e como apagar posicionada em entrevista Roberto Então meia hora desta ação é e já se passaram 30 minutos né processo de agitação agora a gente vai parar e continuar nossa situação dessa etapa a gente precisa adicionar mas por fora e também sulfato de sódio para que a gente Cê pode as a suspensão aqui né que a gente cê paga as

fases da nossa moto Ah então dá para vender né aqui morango gente ó e tem a nossa ali mas só tem uma separação e de gordura faz a costa né e sozinho Apolar No entanto quando a gente vai adicionar mais água mais toda forma grátis para desfazer essa mistura a gente vai ver a separação da fase e eu vou lá para Capela se preparar então couro forma e também o fato E aí e não 8 ml de clorofórmio em cada tubinho o telefone detectado em todas as amostras agora vamos para o sulfato de sódio um

e-mail por extenso E acabamos detectar então o metanol e O sulfato de sódio e eu quero que vocês vejam né E como você parou bem a fase então aqui a gente tem uma fase metanol fase mais polar que aqui a gente tem uma fase com o clorofórmio e a fração ao falar vamos homogeneizar um pouco não precisa muito que a gente vai deixar e cerca de dois minutos eu até te pegar um vórtex para uma realizar melhor E aí depois a gente deixe em repouso e separa e coleta então a fração que vai ficar no

meio né ou e baixo dependendo da mostra Ela não fica não fica preso para frente Ele fica duas aqui no morango agora eu já mexer pois a gente vê que tem um pouco o centro da fração Apolar um pouco de pigmento também na fração a falar é e não tentar ajeitar aqui sem embora talvez já funciona o E aí E aí e eu vou deixar aqui com frações separando né é possível também centrifugar que para acelerar esse processo é geralmente não é demorado então que nos ajuda né ah não aí ele tá mais ou metade

centrifugação vou deixar repousando e logo a gente retorna aí com as amostras já separadinho e é amor mas é no outro sair tão amorosa matas estão cantando né a gente consegue ver a separação das fases a gente vai coletar essa fase aqui em inferior descartar essa primeira fase só poder ficar com muita uma fração Apolar eu vou fazer isso então e não é alguns testes que fizemos a gente percebeu que não precisa retirar a fração a fração superior né a camada superior que ele colocar os PT tá lá embaixo e coletar é possível coletar Então

a nossa situação a forma mais ou menos esses remédios e não precisa muito eu não tenho infeccionar certa de 5ml 4ml para secar coletei algumas amostras na uma partícula junto Isso é um problema porque depois Isso aqui vai ser contabilizado como massa e qual que é o próximo passo a gente adiciona um pouco de sulfato de sódio para remover a umidade e muitas vezes ele remove as partículas também às vezes não então a gente tem que ter muito cuidado talvez deixar mais tempo de cantando para que a gente evita problemas e tirar essa opção aqui

E aí E aí G1 E aí E aí G1 E aí E aí E aí E aí e se quiser ficou um pouco melhor menos resíduos né se a gente olhar a nossa de morango vai ser muito fácil de separar pelo menos aparentemente toda a porção de pigmentos que tem no morango que são as antocianinas elas são colares então elas estão todas as frases metal não bom então fazer esse procedimento aqui vou adicionar então o cloreto O sulfato estou sem o sulfato de sódio na minha o meu tudinho aqui para facilitar então a remoção da

umidade você parabéns que seja empresas e vamos ver se vai lhe Quero ficar bem esse processo acertar o E aí E aí E aí E aí e depois disso Qual é o próximo passo todo esse processo cuidadoso distração mas eu estranho um aqui uma mistura de óleo e clorofórmio a gente vai ter que então evaporar escuro forma nessa fase de solvente Apolar e deixar somente o nosso óleo e aí por fim codificar conta de fazer isso aqui nós temos já deve ter levado Cadinho né Vamos usar becas já secos tarados né deixou na estufa essas

duas horas toda secador a gente já conhece bem esse procedimento sendo cápsulas bocadinho enfim usando técnicas agora então daqui já pesadas massa deles Já anotados e agora então depois desse processo de qualificação aqui né remoção da umidade e de algum é em algum contaminante eu vou coletar daqui quatro meses quatro meses que depois eles representam aí 25% duas ml de clorofórmio que a gente adiciono nos processos foram oito na primeira etapa e mais oito na segunda então a gente tem aí 25 porcento da nossa mostra que a gente vai depois multiplicar os nossos resultados por

quatro fazendo com que eu tenho então a mostra a representação do total de gripes na nossa mostra eu consegui com o procedimento e sempre tiver um pouco mais separar as frações eu já vou transferir elas aqui por becas a gente leva para estufa 20 minutos meia hora é suficiente para a gente evaporar ofurô forno e já fazer a pesagem das amostras EA co dificação propriamente dita a turma a gente deixou um pouquinho aqui de cantando né voltamos que realmente ela sulfato ele remove umidade memória alguma empresa faz algumas amostras ainda não ficaram totalmente classificadas O

que é o procedimento GS fazer uma situação é isso ainda peguei aqui alguns né que a gente vai fazer então processo dele filtração nessa mostra justamente e a tentar classificar e por ficar mais ainda porque tudo o que não for de filho e que depois foi fazer aqui e for só lembrando foram sorvete que tirar meu prato vai ser contabilizado como como um alicate como gordura e aí dava E uma nossa fermento né nossa nossa quantificação então só próxima grande nessa nova o melhor de mim e aí agora eu vou filtrar essa mostra aqui para

a gente ver da cômoda diferença nessa depois processo de formação e eu que já temos uma mostra bem carinha bem transparente que é o que a gente espera para depois é ter certeza que aqui só tem fração distraída né fração com afinidade no clorofórmio são fração Apolar feito isso vamos coletar 4ml transferir para o branca e a evaporar o coração e a personagem dela é tão importante por vários motivos o fato uma extração a frio download temperatura e você começou a neném contraditório mas é possível secar na estufa se eu for só quantificar esse secar

é um secar né eu vou parar o sorvete aí por 20 minutos sessenta graus Então não é a temperatura muito elevada eu posso fazer isso também na capela deixa o tempo maior mas aí eu me certifico de que eu não vou ter ação na temperatura essa análise bastante usadas para a gente pode ficar lá no cromatógrafo gasoso os ácidos graxos estão se a gente tem ácidos graxos poli-insaturados na nossa morte como por exemplo a nossa CTI a própria linhaça né a gente pode ter alguma degradação que fala temperaturas a exposição à luz então muitas vezes

usar luz desligada num laboratório Quando possível né até mesmo a proteger os fracos o que Evite a exposição à luz que aí a gente preserva Nossa mostra pra depois ela ser trabalhada lá no crematório aqui então tem mais um encontrei uma lei para outra ver como é que ia ficar porque a linha Rosa realmente estão bastante turvas teria que deixar bastante tempo aqui para tentar separar situações ela ficou bem translúcida bem vencidas e eu vou fazer a transferência então lá para Uber essa aqui é a mostra quatro e eu vou pegar e transferir lá e

vou fazer para os procedimentos aqui e depois eu volto com a os as amostras vão suas becas para fazer a evaporação do solvente o procedimento realizado amostra já transferidas para os seus respectivos decks vamos evaporar E logo na na sequência eu vou mostrar aqui os resultados que a gente já vai fazer o cálculo o cálculo na verdade é exatamente o mesmo quando a gente faz a qualificação por extração a quente porque a extração a quente a gente strass evapora-se o solvente e e onde fica aqui exatamente a mesma concepção destrói volta ao por frente e

conte fica a diferença que a gente vai ter que lembrar que nós pegamos um quarta Nossa mostra de 20 ml de clorofórmio não o nosso solvente então eu não tenho a totalidade eu acho que vai ter que resolver a fazer a nossa o nosso calcule x 4 E aí E aí E aí bom então eu forma depois que a gente fez todo o processo de extração a frio né os alunos mistura de somente leitura forma metanol depois que a gente fez uma separação das fases né usando água né uma solução de sulfato de sódio que

coletamos a fração lipídica presente no qual é o forma elaboramos o clorofórmio E aí então a gente pode ficou quanto a massa de óleo a gente conseguiu extrair dessas amostras eu vou usar a linhaça como exemplo que foi a mostra aqui a gente mais tem óleo aqui que é um pouco mais fácil a gente realmente conseguir fazer a totalidade né a descrever as massas que o anotei né durante o processo E aí [Música] E aí E aí E aí E aí [Música] E aí E aí E aí [Música] E aí E aí E aí E

aí E aí E aí o outro lado aqui nós temos as principais massas é que a gente vai usar o cálculo lembrando eu peguei lá no início pedia um grama de linhaça na massa do béquer seco já e frio antes de colocar o solvente mais à mostra depois do processo de extração e aqui a massa depois foi vapor então o seu evento porque a obra muito parecido com o digitação por sopra a gente tem uma diferença sim porque aqui na nossa mostra a gente não pegou a totalidade da amostra lembra a gente pegou uma fração

dessa mostra para fazer a secagem e isso deve ser considerado um E aí E aí E aí E aí E aí E aí E aí E aí E aí e a gente pegou nesse total de despedimento da cerca de 16 ml de clorofórmio esses 16 ml de Puro forma a gente perde processo de tração tudo mais e aí chegamos aí em cerca de 10 remédios que a gente conseguiu recuperar né transferir para um outro todo purificar mostra e filtramos desse material foi O Cadinho bem classificado A gente pegou quatro meses exatamente para fazer a secar

né ou evaporação do solvente é 14 mulheres é um quarto dos 16 cms então por isso que no final a gente precisa compensar né pegou um quarto dessa massa ele que vai então extrapolar já falou não vai converter essa essa resultado então para o total aqui de 1,03 em casa lá em 1 [Música] E aí E aí E aí E aí E aí E ai subtração aqui das duas massas a gente tem aqui três algarismos é realmente em que importa Então a gente tem que ter o cuidado de sempre usar balança analítica não porque meu

barco é pesado eu tô sempre amo mais que um grave de amor mas eu tenho que ter consciência de que o extremo e copo gordura principalmente por trabalhar com morango e com arroz e tem menos motor ainda né a gente vai ter números muito pequenos e que a nossa balança analítica ela precisa estar calibrada a gente precisa usar ela considerar todas as casas depois da vírgula e também não é da pietà gente precisa realmente pegar 4 ml além da minha solução de clorofórmio contendo essa gorduras esse vídeo para depois fazer uma oração sorvete E aí

E aí E aí E aí e pegamos um sabor de aproximadamente né 37 por cento de virtudes na areia não era isso é