E aí o Olá Lula seja bem-vindo novamente aula de imunologia clínica hoje a gente vai falar sobre outro método que é bem importante para diagnóstico da imunologia Clínica também e para as verificar determinada patologia né mas não servir como diagnóstico principal então serve como exame de triagem tá então que é o nosso método chamado imunocromatográfico a cromatografia ela tem diferentes tipos para essa música matou grafia em fase sólida e cromatografia de fase líquida e fase gasosa para imunologia em utiliza muito a imunocromatografia né que utiliza uma fase sólida e uma fase móvel né que a
nossa mostra colocada que vai ser então analisada em chama também de análise Então essa imunocromatografia é um dos métodos principais para a nossa Triagem de algumas doenças e também dependendo da localização e foi de difícil acesso ela auxilia né a gente como um diagnóstico ela um método um pouco antigo e não tinha uma boa sensibilidade e especificidade ou seja ou não a gente não consegui ver se era realmente um falso-positivo ou falso-negativo né e a quantidade de amostra que era captada às vezes não era suficiente e não era tão confiável para ver a especificidade em
relação a determinada patologia ao longo do tempo ela veio melhorando bastante e agora ela tem uma alta especificidade e sensibilidade chega 98 99 porcento então agora sim ela serve como um dos métodos de Diagnósticos também para determinadas patologias então o método de cromatografia ele utiliza uma fase sólida e uma fase móvel então aqui a gente tem é chamado também do teste rápido né então gente conhece bastante como teste rápido a gente utiliza é isso para vários tipos de doenças é porque teste rápido porque a gente realiza ele em poucos minutos a gente já tem o
resultado então ele varia aproximadamente uns 15 minutinhos né para ter um resultado mais filho é digno mas em menos tempo já consegue realmente identificar determinada patologia aqui a gente tem por exemplo o teste da dengue nessa figura um a gente consegue identificar dois tipos diferentes de testes tá então tanto para o nosso anticorpo quanto para anticorpos da classe IgG m&g e até mesmo para identificação do antígeno tá então algumas pessoas chamam isso de sabonetinho né o teste mesmo sabonetinho vai ter uma região de onde você vai colocar a mostra essa mostra né ela pode ser
sangue Total ou o soro principalmente soro é melhor tá alguns testes utiliza até mesmo urina como o teste de gravidez O que é o nosso beta-hcg né Ele é um teste qualitativo ele serve né para dizer se você tem ou não essa determinada substância é detecta tanto antígenos e anticorpos depende muito de cada subtipo do teste por exemplo no teste da dengue que eu trouxe para vocês ele consegue identificar os dois subtipos anticorpos principais uma fase aguda ou fase mais tardia da doença né ou até mesmo uma reinfecção na dengue pode ser bastante isso né
e dependendo do tipo de reflexão gente vai ver na patologia em si pode ser um pouquinho prejudicial para doença e no caso a citar multigene de presente isso pode ir A gente pode verificar se realmente tem um antígeno se você tiver o antígeno por exemplo esse aqui é contra o ns1 Né que é uma das proteínas principais não-estruturais o vírus da dengue então a gente consegue bom estar com o vírus ainda presente no corpo em São serve apenas para dengue né serve para outros tipos de vírus também como a com vídeo a gente consegue realmente
identificar a presença do antígeno tá e dependendo se tiver gente consegue ter um prognóstico ou né saber como é que a gente vai trabalhar com esse paciente então o teste rápido né ele pode ter diferentes tipos de analito principalmente o soro que é um dos principais alguns testes exigem que a gente tem o processo de diluição Como comentei na lateral com vocês dependendo da quantidade de anticorpos que a gente vai ter em uma determinada amostra a gente precisa diluir ele para realmente ter um Resultado positivo reagente ou falso o é verdadeiro Positivo tá então isso
é muito dependente da concentração da amostra também E aí nós temos essa fase móvel é que vai percorrer por capilaridade que você consegue observar até mesmo aqui na figura Quando o senhor ele tá subindo né e atingindo as marcas de onde a gente vê os controles tá vendo que ser o controle da região de controle Então é por capilaridade ele vai subindo né até chegar no ponto quando essa mostra líquida carreira a substância ela vai levar anticorpos né contra regiões marcadas com antígenos ou até mesmo anticorpos tanto no controle quanto na porção do teste tá
então a imunocromatografia a gente pode utilizar desses Diferentes subtipos né Depende qual o tipo de teste a gente está verificando por exemplo esse teste aqui foi até chegar e ver a gente pode ter colocar colocou sangue Total mas pode ser feito com o soro né o diluente e esperou ele percorrer está vendo aqui ó na marcação tá então a também marcadinho a região do controle e não tem nem anticorpos da região teste nem para GM nem para eleger tá então isso é identificado como um não reagente tá ali a o teste foi aceito porque o
controle está marcadinho então a linha controle sempre deve estar marcada caso contrário o teste é invalidado tá até já comentei isso em aulas anteriores com vocês também Então como que é um mecanismo de detecção desses antígenos é a fase sólida ela vai ter né uma membrana de celulose revestida com anticorpos ou com antígenos depende de cada tipo de teste e eles vão estar presos a uma linha de captura tá então você vem aqui ó a região onde a gente vai colocar a nossa mostra tá é a que tá com uma gotinha de sangue vermelho ali
a essa amostra ela vai percorrendo as regiões né Tá fazer sólida Até chegar na linha teste Onde tem um anticorpo específico contra o antígeno pesquisado tá e a linha controle ela vai ter anticorpos contra anticorpos marcados essa marcação ela se dá ou com Ouro coloidal ou Prata coloidal Então são duas substâncias né que a marca e faz uma coloração tá igual que a gente viu e faz uma pequena coleçãozinha deixe como mostrar slide permite que a gente consegue verificar a olho nu aqui ó tá então esse ouro coloidal prata coloidal estão Associados anticorpos já que
são carreados pela porção líquida né que vai migrando por capilaridade Até chegar na linha controle então por isso que a linha controle sempre tem que estar marcada Porque caso não ocorra marcação esses anticorpos Aqui ó pode estar sem funcionalidade específica o tempo PH a manutenção dessa nesses testes podem influenciar muito nesse processo tá então tem que ser manter a temperatura correta é e o tempo de utilização porque eles podem perder a capacidade de ligação específica com antes de isso nos dá aos reagentes tá ou a fase não reagente Então por capilares E essas amostras uns
mini migrando né até chegar nas regiões de linha teste ele controle caso ocorra a ligação do antígeno com o anticorpo esse anticorpo aqui ele é específico contra o antígeno também se estão vendo Então ele vem se liga ao antígeno E aí ocorre uma ligação como se fosse um sanduíche né entre um anticorpo preso na linha teste o antígeno específico contra ele eo anticorpo que foi arrastado né Por capilaridade então ocorre a marcação dessa linha e a linha controle é marcada com o anticorpo contra anticorpo então qualquer anticorpo vai se ligar aqui principalmente esses marcados com
Ouro ou Prata coloidal bom é quando a detecta anticorpos né então a gente tem que ter na salinha controle tá aonde corpo contra o nosso ouro prato legal marcado com anticorpo potinho a mesma coisa e na minha teste é o que vai variar tá na linha teste você vem que a fixação é de um antígeno específico então por exemplo eu estou procurando anticorpo contra o vídeo tá então eu vou ter que ter um antígeno preso aqui na superfície do antes da corrente tá por exemplo proteger Spike que ele superfície do tio covid-19 Então a nossa
amostra é colocada migra por capilaridade a raça os anticorpos marcados por coloidal tá recente cor pertinho de corpo então ele vai se ligar os anticorpos da amostra e a minha controle tá e a anticorpo específico se houver ele vai se ligar o antígeno eo anticorpo marcado com ouro prata coloidal vai desligar na porção FC então tem uma marca sãozinha também tá tem uns duas porções tem que ser marcadas caso a gente tem um anticorpo contra o análise específico então para análise do teste se quando a gente coloca à mostra e a gente não tem nenhum
anticorpo nem antes de específico somente a linha controle vai estar marcada então a gente identifica isso como não reagente quando a gente tem o anticorpo ou o antígeno de interesse pesquisado essa substância vai se ligar na linha teste e aí o anticorpo marcado vai se ligar nele também então ambos vou ficar marcado a encontrar tanta linha teste quanto a linha controle marcadas então isso dá um resultado chamado reagente Positivo tá e quando o nosso anticorpo na linha controle não estiver marcado isso é muito importante nós vamos invalidar o teste é o teste inválido porque uma
dessas substâncias não está funcionando direto corretamente então se Dilma não está o Senhor Jesus também não estão Então esse teste é invalidado sempre quando linha controle estiver não estiver marcada não estiver marcada esse teste é Impacto sempre nas for marcada aí a gente vai analisar se deu reagente ou não reagente pela linha controle tem um esses métodos de diagnóstico de imunocromatografia eles podem ser a como diagnóstico realmente né de uma determinada patologia o cliente precisa de um teste rápido como é feito né Atualmente como o covid-19 né tanto para antígenos gente consegue precisar realmente os
antígenos ou anticorpos e anticorpos Guarulhos tem a uma grande parcela da população que se vacinou tá então você realmente Todos deveriam ter anticorpos isso pode ser variável também em relação a determinados tipos de Patologia a durabilidade desses anticorpos ou os antigos sitiantes da para presente é porque você tem geralmente o quadro infeccioso tá então esse método imunocromatográfico termine serve com o método de triagem para algumas patologias e apreensão em alguns centros então a gente consegue identificar se ele der reagente aí a gente vai procurar né um método mais específico que geralmente encheu de padrão-ouro então
o padrão-ouro é um método que a identificar a patologia de um modo bem específico tá com grande grau de confiabilidade com uma sensibilidade e especificidade tá dizendo que corretamente não está esse é um reagente é positivo ou é um realmente negativo verídico tá então o método de imunocromatografia nós utilizamos muito como triagem independente da patologia com um método de Diagnóstico também tá então espero que vocês tenham entendido um pouquinho agora de como funciona esse método imunocromatográfico tá é um método fácil de ser realizado né nós conseguimos comprar em farmácia ele é comum o método diagnóstico
eles vão esperar gravidez por exemplo aqui é um dos metros que a gente vai aprender uma próxima aula e a agora a gente identificou como realmente funciona principalmente marcadores são prata coloidal o ouro coloidal é eles que vão dar essa identificação da coloração das Linhas controle sem mercado tá esse daí a gente na minha teste marcado não reagente no mercado Tá bom eu espero que vocês tenham entendido e aproveite ao grande abraço e até a próxima tchau [Música]
