oi oi pessoal dando continuidade as técnicas de quantificação de microrganismos nós vamos estar vendo a técnica do número mais provável é nas aulas anteriores né nós observamos e aprendemos as técnicas de plaqueamento onde a gente conte fica as colônias formadas no meio sólido a técnica do número mais provável nós não quantificamos colônias porque na verdade nós vamos estar utilizando é tubos contendo meio de cultura líquido lá então nós vamos estar trabalhando com caldo e dessa forma então é com uma combinação de tubos contendo caldo os específicos para que nos interessa né de ter específicos para
aquele grupo de micro-organismos que nos interessa nós podemos estar trabalhando de forma estatística a técnica do número mais provável para a gente ter aí o número de microrganismos que a gente é tem na nossa amostra bom a técnica do número mais provável como eu já falei para vocês é quantitativo exatamente como como craqueamento velha contagem de colônias em placas só que como eu falei para vocês nós vamos trabalhando com no com tubos de ensaio contendo meio líquido então é um método quantitativo que nos permite determinar o número mais provável dos micro-organismos que nos interessam naquela
mostra que a gente está analisando o princípio desta técnica é que é se subdividindo a amostra em alíquotas algumas dessas alíquotas que nós estamos tirando da nossa amostra elas vão conter micro-organismos outras não então a quantidade de número da quantidade de micro-organismos na nossa amostra nós vamos ter tubos onde nós temos crescimento e do micro-organismos e tubos onde nós não vamos observar o crescimento dos microrganismos né e com esse conjunto de tubos é com crescimento e sem crescimento nós utilizamos uma tabela né que já está já é disponível para gente padronizar e a gente aí
encontra nosso número mais provável de micro-organismos na determinada amostra em questão bom é a grande vantagem né da técnica do número mais provável as grandes vantagens né é a é que ela é bastante versátil e tem inúmeras aplicações como vocês podem estar observando nesses nesse slide né e temos diversão boa tarde ela vai nos permitir a quantificação de diferentes grupos ou espécies de micro-organismos e essa versatilidade então ela nos permite por exemplo está trabalhando com detecção é na verdade quantificação de microrganismos esporulados sendo eles aeróbios ou anaeróbios obrigatórios é nós podemos trabalhar com testes presuntivos
para staphylococcus áureos nós podemos trabalhar com o teste para nós vamos trabalhar né e nossa nessa aula nós vamos está vendo como faz para determinar o número mais provável de coliformes totais e termotolerantes nós podemos utilizar a técnica para quantificar esqueriquiacoli na é podemos estar utilizando também para salmonella para lhe espere na verdade é uma quem é e é uma técnica que dependendo aí do meio que você utiliza do meio de cultivo na do caldo que você utiliza você vai abranger aí diferentes microorganismos que nos interessam em termos de aplicação como eu já falei já
comente alguma coisa aqui para vocês né a gente vai ter uma maior facilidade de cultivo e quantificação de bactérias anaeróbicas porque quando a gente não dispõe de gerador de anaerobiose vai para que dentro de um ambiente a gente consiga retirar o oxigênio para os microrganismos anaeróbios é se multiplicarem em tubo fica muito mais fácil porque no tubo é acima do meio de cultura a gente pode estar adicionando óleo mineral e esse óleo mineral então vai impedir que ocorra a troca gasosa do meio de cultura o ambiente fazendo com que não ocorra a a solubilização de
oxigênio no meio por exemplo nós podemos conversar comentei né quantificação de coliformes totais e termotolerantes e escherichia coli que vai ser o alvo dessa aula né a quantificação de microrganismos é em paz das e microrganismos com baixa concentração nas amostras estão na verdade a técnica do número mais provável ela foi desenvolvida para se detectar esqueriquiacoli em água na então como é escrito a cola em água potável é da possibilidade de uma possível contaminação estaria em um número muito reduzido para a amostra a técnica se baseia no princípio de que se uma única célula do microrganismo
é alvo e chegue entrar em contato aí com meio de cultura ele seja adicionado nesse tubo de ensaio né essa única célula ela vai ser capaz em 24 horas a 48 horas de se multiplicar turvar o meio e expressar o que a gente está procurando no caso dos coliformes nós vamos estar observando além da privação também a produção de gato mas vou tá vendo pouquinho mais para frente é a gente pode trabalhar e para teste presuntivo para staphylococcus aureus como eu já falei podemos quantificar né os micos esporos e também trabalhar com quantificação de salmonella
e listéria monocytogenes é a quantificação né de bactérias como salmonella esferas ela normalmente são um pouco difíceis nós aí vocês vão ser um pouquinho mais para frente né com qual a prática porque essas bactérias normal o top muito estresse durante o processamento quando presente e muitas vezes esse estresse o estresse subletal onde essas bactérias ela se inoculadas diretamente no h no meio sólido lá no meio de cultura seletivo cromogênico é elas não conseguem se recuperar em termos metabólicos e a gente é fala que no alimenta o tem ausência ou seja vou gente não consegue detectar
a presença dessas bactérias entretanto em meio líquido essas bactérias elas conseguem se recuperar por causa do maior contato que ela tem com é o meio de com os nutrientes né em termos de atividade de água ph e disponibilidade de nutrientes no meio líquido então ela se recupera então se se tivermos células né que sofreram estresse subletal que em meio sólido normalmente nós não conseguiríamos quantificar é como um meio líquido a gente consegue fazer essa recuperação das células e acabar curte ficando ok e é importante né hoje vocês estarem sabendo disso porque ele espera monocytogenes aí
na nossa instrução normativa nº 60 que vem aí vai ano que começa que entre gol né agora em dezembro então quando vocês começaram trabalhar é vai ser e serão esses padrões microbiológicos nós podemos ter a presença em diferentes tipos de alimentos de até 100 unidades formadoras de colônias número mais provável de listéria então vocês podem lançar mão da técnica do número mais provável então é uma técnica muito importante que é dependendo do tipo de processamento que você tá o microrganismo que você o ócio microrganismo alvo é a técnica é bem casa bem aí nas condições
tá certo bom é normalmente né quando se trabalha com a técnica do número mais provável a gente trabalha com a inoculação de pelo menos três diluições decimais sequenciais da mostra é essas três alíquotas por diluição e os cinco então a gente trabalha a técnica dos tubos múltiplos na nós trabalhamos normalmente com é 3 séries de 3 tubos tá ou três séries de 5 tubos na verdade é o mais comum são três séries de três tubos se você não sabe não tem certeza né do número do microrganismo que você pode ter no seu produto então você
pode aumentar o número de séries mas nunca diminuir o o número de séries para menos de 3 ou o número de tubos de dentro de cada série é para menor que 3 tá certo porque porque isso porque nós vamos estar utilizando essa tabela que ela é gerada de forma estatística onde nós vamos os estar utilizando aqui vocês podem olhar aqui né são os números insistem 000 as suas combinações né é um 2012 11 né e 332 que que é isso roberta isso aqui é a combinação dos tubos que a gente vai utilizar vamos parar para
vocês no próximo slide então na primeira série de tubos na eu tenho três tubos inoculados na mesma com a mesma diluição então a gente adiciona aí um ml de amostra de alíquota da diluição que nós e nesses em cada tubo tá certo e é se nós tivemos três tubos positivos nós vamos ter número três se for dois nós estamos número dois se for zero vai ser o número 0 se na segunda série nós vamos estar utilizando uma outra diluição então só que a gente tá utilizando a 10 a menos um aqui na segunda coluna nós
vamos estar utilizando a 10 a menos 2 e na terceira coluna 10 a menos 3 sempre fez tubos e nessa coluna que a gente vê o número mais provável por grama ou mililitro de alimento que a gente está analisando tá certo bom ai não entendi nada roberta que que é isso que bagunça é essa de tubo que séries né não tô entendendo então vamos ver aqui nesse slide nós vamos ter então na técnica do número mais provável séries de 3 tubos há três ou cinco tubos tá então aqui nós temos por cor cada cor é
uma série tá então nós temos uma série aqui a segunda série aqui e a terceira série em azul tá é eu vou sempre estar trabalhando na primeira série a nossa primeira diluição que pode ser dessa menos um pode ser direto então se eu tô trabalhando com leite pasteurizado por exemplo eu não preciso é de fazer a minha primeira de primeira diluição com 10 minutos eu posso inocula diretamente aqui alíquotas de 1ml de leite em cada tubo né e depois fazer uma segunda diluição e depois uma terceira diluição então você pode inocula direto ou pode no
colar uma divisão depois uma segunda com cê consecutiva e uma terceira consecutiva e pode ser uma quarta uma quinta e sim depende depende do que é os microrganismos que você é espera ter ou se você não sabe a gente acaba fazendo um monte de séries de três tubos tá no nosso caso aqui né no caso de coliformes vocês lembram lá da aula de microrganismos indicadores que eu falei para vocês que uma característica importante deles é a capacidade de produzir gás após fermentação da lactose então no caso né para que a gente é consiga detectar esse
gás formado pelas bactérias a gente tem que adicionar aqui dentro um tubinho de ensaio bem pequenininho aqui na verdade chama tubo de durhan vou mostrar para vocês tá certo então o que que seria é um tubo de dura né então aqui é um meio de cultura na verdade esse aqui é um o caldo ec falar que nós vamos ver mais para frente e aqui dentro vocês podem observar é o tubo de dura tá certo vocês podem observar que aqui é fechadinho e aqui ele é aberto então aqui a gente não tem crescimento nenhum de microrganismo
já né é esse nesse tubo aqui a gente pode observar uma turvação e a presença de gás aprisionado aqui dentro do tubo tanto aqui conta aqui só esse gás que está aprisionada aqui ele veio da onde tá ele veio do crescimento bacteriano então aqui nós temos bactérias esse caso nesse caso ter a fonte de carbono e lactose a então nesse caso as bactérias que grande parte das bactérias que estão crescendo aí utilizando é a lactose como fonte de carbono estão fermentando produzindo gás e esse gato ele está sendo preso aqui tá certo bom então na
verdade isso aqui esses três tubos aqui eles podem ser considerados uma série daqueles daquelas três séries que a gente que eu falei para vocês né e nesse caso aqui na teríamos dois tubos positivos e um negativo tá certo então uma série aqui tá bom então vamos voltar a explicação inicialmente eu tenho os meus três as meus três as minhas três séries de três tubos ou onde eu vou estar fazendo de luz sonhos tá e vou estar inoculando de noções um ml de cada diluição do meu produto dentro de cada tubo tá então eu fiz uma
diminuição de 10 a menos um então eu por exemplo nós por exemplo estamos avaliando a qualidade a presença de coliformes em leite pasteurizado ou leite cru o que nós vamos fazer eu vou começar aqui no meu nesse caso do exemplo nós estamos começando na direção dele tá menos um então lembra lá dentro dele só isso que nós fizemos na praça lá que a mente não tá aqui é a mesma coisa nós vamos fazer divisão dessa - 1 - 2 - 3 meses 4 -5 e assim por diante e na sequência não é para inocular aqui
no caso da técnica do número mais provável nós vamos estar na primeira série de tubos que essa série foi de laranja nós vamos inocular em cada tubo 1 ml da diluição da essa menos um do leite do segundo turbo da primeira série 1 ml da diluição deve tá menos um e no terceiro tubo 1 ml da diluição 10 a menos um na segunda série eu vou estar trabalhando com é a direção dessa menos dois e vou ficar fazendo o procedimento um ml em cada tubo da diluição dessa minutos na terceira série eu também vou estar
inoculando um ml de cada é um ml de cada me desculpe gente foi está inoculando 1 ml da diluição 10 a menos 3 em cada tubo tá certo ok e depois não é eu vou estar 5 bando na temperatura desejada para aquele determinado microrganismo que no nosso exemplo aqui ou coliforme tá então nós temos claro os coliformes nós temos uma sequência do teste que nós vamos estar observando é eu vou para cá passando agora aqui para vocês tá então como que a gente faz a quantificação de coliformes totais e termotolerantes bom é como nós está
falando para nos microrganismos indicadores né a nossa legislação está mudando bom então é os teste o teste não é de coliformes totais e termotolerantes eles na verdade não vão ser mais exigidos pela legislação tendo então substituído pelo teto pela quantificação de enterobactérias tá ou por a pela quantificação de esqueriquiacoli especificamente dependendo aí do tipo de alimento então vocês obs vocês observarem lá na instrução normativa 60 da de dezembro né de 2019 vocês não vão estar observando coliformes termotolerantes tá e sim aquele que acolhe ou é contagem total de interno bactérias ou enterobacterial micro-organismos contagem total
de microrganismos da família enterobacteriaceae tá entretanto a técnica decodificação dos coliformes para nós é muito importante porque ele é o microrganismo indicador tá e que a gente pode estar utilizando dentro da indústria essa técnica tá dos coliformes determinado coliformes totais e termotolerantes pela técnica do múltiplo tá é para que a gente possa estar acompanhando é a qualidade do nosso processamento tanto em termos de manipulação e quanto de higienização tá e também é a capacidade do nosso processo se o processo está sendo feito de forma adequada seu aquele processo que você tá aplicando aquela tecnologia que
você está utilizando elas realmente está sendo eficiente ali é sobre sobre para eliminar ou reduzir os microrganismos tá certo então é importante vocês aí e é aprenderem essa técnica né porque muitos de vocês no dia a dia da indústria e dependendo do tamanho da indústria você vai acabar utilizando os tubos de ensaio e os tubos de dura é pouco por causa de dinheiro tá então é um som é um teste barato fica bem mais barato você fazer esse teste como tubos de ensaio e caldos do que você está comprando os kits rápidos né os testes
rápidos que a gente tem hoje na indústria hoje nós temos vários vários meios rápidos cromogênicos rápidos tá que vocês podem adquirir para estar trabalhando dentro da indústria mesmo para coliformes totais e termotolerantes mas são caros e dependendo aí da disponibilidade financeira que você vai ter para o seu laboratório é você não vai ter conde ah está é adquirindo a empresa não vai estar adquirindo esses meios tá de cultura esses testes como petri filme não é é o chromecast cromogênicos que tem flor essência então você acaba tendo que cair nessa técnica técnicas mais baratas que essa
que nós vamos estar vendo aqui tá certo bom quando nós vamos estar trabalhando está quantificando né nós necessitamos quantificar o coliformes totais e termotolerantes nós vamos ter na verdade algumas etapas quando nós nós vamos estar iniciando né a nossa mostra a nossa análise como o teste presuntivo que é o para coliformes totais então nós vamos estar utilizando o caldo lst que é que se chama lauril sulfato triptose tá o gel é um meio rico contudo ele é tem o lauril que é um grande inibidor de bactérias gram-positivas tá por quê que é importante nós temos
um inibidor de bactérias gram-positivas porque nós estamos querendo os coliformes e os coliformes como nós vimos lá na aula de microrganismo indicadores são bactérias gram-negativas então nós não queremos que bactérias gram-positivas cresçam além disso ele vai ter esse e-mail ele tem lactose como fonte de carbono como única fonte de carbono tá porque que só tem a lactose o que nós vimos lá que a característica dos coliformes é que uma das características dos coliformes e que os diferenciam de vários e daqui a 35 graus celsius 35 37 graus celsius eles fermentam à lactose e produzem gás
tá e por quê que é um teste presuntivo porque eu a gente como a gente está trabalhando dentro da indústria né nós estamos é submetendo essas bactérias a várias condições estressantes é como eu falei nós podemos ter aí micro-organismos que foram submetidos ao estresse que a gente chama de estresse subletal ou seja o microrganismo não morre né mas eles requer alguma condição para se recuperar e continuar se multiplicando s nossa inicialmente jogássemos diretamente no caldo bile verde brilhante que é um teste confirmativo tá muitas bactérias né oi jovens não estariam não conseguiriam se recuperar porque
é um meio bem mais restrito eu vou falar para você daqui a pouco tá e é aí né ele não se recupera no nosso teste mas durante a vida útil do nosso produto a bactéria vai ter condições de se é restabelecer sair desse estresse subletal estabelecer seu metabolismo novamente seu estado fisiológico e pode vir a se multiplicar no alimento é e aí você vai ter problemas né com consumidor com a legislação com as letras legislação podendo até muitas vezes ter patógenos presentes tá então nós vamos passar do teste presuntivo para o teste confirmativo então aqueles
tubos né que eu mostrei para vocês então vou mudar o slide aqui e depois nós voltamos para ele o confirmativo proteste presenteável confirmativo tá certo então inicialmente nós vamos estar aqui com esse teste que ela teste lá do lauril tá que é o teste presuntivo eu tirei eu montei para para gente né esse conjunto aqui nós temos três séries de três tubos aqui então nesse tubo nesses tubos nós vamos estar inoculando nossa amostra é aqueles tubos que deram positivo ou seja que nós se tivermos produção de gás e turbidez como aqui nós podemos observar nós
vamos estar após 37 desculpa até após 24 ou 48 horas nós vamos estar transferindo uma alíquota desse caldo para o caldo vb que é esse verdinho aqui tá que é o caldo bile verde brilhante tá certo é nesse caldo aqui é o vai nos dar o resultado do teste confirmativo para coliformes totais tá certo já é para que nós possamos quantificar os coliformes termotolerantes nós vamos estar utilizando o caldo ec que se chama caldo esqueriquiacoli tá ok a diferença grande que nós temos aqui é que é tanto caldo lauril quanto o bebê né nós vamos
estar trabalhando a 37 graus celsius já no caldo é ser nós vamos estar in cuban dos nossos tubos a 45 ou 44° certo por 24 a 48 horas a roberta por que você tá falando 24 a 48 horas eu deixo 24 eu deixo quatro é né bom isso vai depender de como está o crescimento do microrganismo no seu tubo tá o que nós fazemos a gente é ele após inoculação nós vamos incubar nós os a nossa cultura esperamos aguardamos 24 horas e vamos observar os tubos é se não houver nenhum crescimento ou você começa a
observar o início de crescimento uma pequena turvação tá você é para que você tenha certeza do seu resultado você em cuba por mais 24 horas por quê porque é muitas células que eu falei já estão estressadas elas demoram a se recuperar as vezes você tem um número muito pequeno de microrganismos você ao dentro do tudo você colocou lá acabou entrando chegando um odor uma ou duas células nós temos aí uma uma demora para que esse meio fique turvo mas deus resultado que nos interessa se após 48 horas você não observar nem crescimento ou não observar
a a formação de carro ou seja você pode observar crescimento mas não a formação de gás então isso quer dizer que o seu teste é negativo carta você não tem a presença do microrganismo tá certo tá bom é como que nós vamos fazer né é o em caldas e tão é após incuba né o caldo lauril por 24 ou 48 horas aqueles tubos positivos não é que nós porque eu mostrei para vocês com uma formação de gás nós vamos estar transferindo alíquota com a alça mesmo alça de repicagem tá gente para cada tubo de vender
então do primeiro turno se eu tiver o primeiro tubo positivo de lauril eu vou tirar um pautada de malta de repicado então vou pegar tirar uma alçada passar para o primeiro tubo de beber o doce o segundo tubo por positivo tira uma alçada do segundo turno passa para o segundo tubo de bebê se o terceiro foi positivo eu tiro uma alçada desse passo para o terceiro tubo de bebê a mesma coisa eu vou fazer para o é por causa é ser tá então do tubo um produto bom do tubo do espírito mudo e três turbo
3 epa pela pele também tá é muito importante a gente anotar no tubo tá o que que nós estamos fazendo qual a diluição tá se você anotar diluição você vai saber que série que você tá trabalhando tá então nesses tubos aqui eles deveriam estar aqui 10 a menos um na primeira série dessa menos dois na segunda série aqui dessa menos três na terceira série ou outra diluição mas na mesma sequência tá certo então para coliformes totais nós inoculamos no caldo lauril tá oh e vamos estar 5 bando a 37 graus celsius por 24 a 48
horas e vamos estar observando a formação de então nós temos aqui após 24 horas de cultivo ou 48 horas nós vamos ter turvação do meio e formação de gás se não tivesse formação de gaga tubo positivo roberta não é negativo tá então tem necessariamente que ter gás e se vocês observarem aqui houve tanta produção de gás que o tubinho a ele até sumiu tá vendo ele até pluto ou aqui tá bom após então o cultivo a 20 25 por 24 horas a 35 graus celsius 37 graus celsius os dois tubos positivos nós vamos citar transferindo
alíquotas com a alça de repicagem pro o caldo bebê tá vamos fazer a mesma coisa então vamos supor tá certo aqui do meu caldo do lauril tá certo então do meu caldo lauril eu tive nada deles são 10 a menos não tive os três positivos na diluição dessa menos dois ativos os três positivos e na direção dessa menos três eu tive apenas um tubo positivo então o que que eu vou fazer eu vou utilizar cada tubo positivo inocular nos tubos do bebê e incubar 24 48 graus celsius e observar aí o tubo se ele for
positivo tem informação de gás se ele for negativo não tem formação de gás vocês podem observar que é que foi uma pequena formação de gastar esses tubos a que muitas vezes a gente tem pequenas boa eu tô quase vezes vem com 24 horas a gente observa uma bolha um pouco pequena para tirar a dúvida você deixa por 48 horas para você ter certeza se é positivo ou não tá ok então desses tubos positivos então nós vamos estar utilizando e para entrar na tabela naquela tabela que eu mostrei para você então nesse caso aqui né é
eu inventei um resultado tá então daqueles tubos que inicialmente nós inoculamos né que foi três tubos positivos de lauril nadessa - 13 tubos positivos de lauri uma 10 a menos 2 e um tubo positivo de laurina 10 a menos 3 nós inoculamos no bebê né e depois de 48 horas o que eu obtive eu obtive três tubos positivos no tratamentos 12 tubos positivos no 10 mais 10 a menos 2 e um tubo positivo no dessa menos três por que que você tá fazendo isso roberto tá falando isso nessa sequência porque lembra lá na tabela que
eu falei para vocês da da coluna da bom então então nós temos na primeira diluição na segunda divisão e na terceira demissão né então nós vamos estar utilizando isso para entrar na tabela o que nós temos aqui nós temos 32 e um só olhando aqui na nossa tabela né nós vamos ter o que 32 e um tá que vai me dizer que eu tenho aqui 150 número mais provável por ml de leite porque no caso aqui eu fiz a morte de leite tá certo é importante notar que essa tabela ela me dá a combinação de
10 a menos um 10 a menos 2 e 10 a menos 3 tá se aqui não fosse das a menos um tá se fosse um 0,1 0,01 seria um ou direta daí tá - 1 e 10 a menos 2 tá então na verdade ao invés de eu ter 150 eu vou ter 15 tá porque porque eu tô trabalhando com uma de emissão a menos tá certo se você tiver trabalhando ao invés de 10 a - 1 - 2 - 3 e você tá com essa tabela aqui e você partiu dos 10 a menos 2 ben
10 - 2 - 3 - 4 se o resultado não vai ser 150 vai ser 1500 por quê porque é só primeira diluição é 10 a menos 2 e não 10 a menos um tá isso é muito importante que vocês levaram em conta para ter o número correto aí quando você tá trabalhando com a tabela ok a mesmo tempo que nós inoculamos lá é os tubos de bebê nós também vamos estar inoculando os tubos dia ser tá e é incuba 44° celsius de 24 a 48 horas certo então nós estivermos lá no nosso caldo lauril
né nós vamos estar em cubando nós tivemos três tubos positivos dessa - 13 tubos positivos desta menos dois e um tubo que positivo dessa menos três então nós vamos estar trabalhando eu vou descer né tubos contendo 10 ml de calda é ser e vamos estar inoculando né uma alçada em cada tubo do nosso meio de cultura do nosso da nossa cultura positiva vamos incubar a 44° celsius tá por 24 a 48 horas tá certo e vamos estar observando a mesma coisa turbo positivos privação com gás tubo positivo observação com gás e tubo negativo aqui no
caso não teve nem crescimento ok e aí ele não tentei um resultado aqui para nós tá ou seja no nosso resultado final eu tenho na diluição das a menos um na três séries que eu inocula lei nos três tubos que ele não colei eu tenho dois positivos e na diminuição dessa menos dois dos três tubos que não colei eu tive um único tubo positivo e na divisão dessa menos três eu daquele tubo renal colei ele deu positivo então minha combinação que eu vou entrar na tabela vai ser dois um e três e um desculpe 21
mil então vamos lá na tabela olhando na sequência de lição a primeira de primeira diluição segunda divisão que a estrela dele são tão 21 e um isso quer dizer que eu tenho de coliformes termotolerantes 20 número mais provável e por ml do leite carlos leite que eu fiz com leite mas pode ser leite pode ser qualquer o alimento que você tá analisando tá certo ok bom é mais coliformes termotolerantes significa que eu tenho esqueriquiacoli não não significa que eu tenho esqueriquiacoli tanto é que é termotolerante não é cole tá certo então é que que eu
faço né para passar de coliformes termotolerantes e é dizer que eu tenho e cole e que todos aqueles tubos que eu te deram positivos para é ser é são por presença de cole ou por coliformes termotolerantes um modo geral bom eu vou ter que fazer testes bioquímicos e para isso inicialmente eu passo para meios seletivos muito alguns cromogênicos é né o meio seletivo mais utilizado é o zina azul de metileno que eu vou mostrar para vocês tá então como que eu vou saber o número de esqueriquiacoli que eu tenho é presente no meu alimento um
de cada tubo positivo de caldas e eu vou tirar uma alça de repicado foi repicar tirar uma lipo tazinha de cada cultura de cada tubo é um cada tubo é uma cultura tá e vou estrear no meio específico que no nosso caso é a e usinas o de metileno tá então nesse caso aqui eu teria uma duas três quatro placas tá cada uma de vindo de amostras de um tubo onde eu iria estrear e incubar 37 graus celsius por 24 horas e eu que eu vou observar se for esqueriquiacoli ou é o teste na verdade
é um presuntivo para esqueriquiacoli certo eu botei esse meio aqui que o meu usinas o de metileno eu vou ter as colônias dessa forma aqui elas apresentam aqui a cultura pura de esqueriquiacoli tá ela vai você vai observar esse brilho verde metálico bem leva placa muito bonita
