e aí oi oi pessoal hoje nós vamos dar início ao estudo das técnicas de quantificação de microrganismos viáveis por plaqueamento tá quando a gente está trabalhando com quantificação de microrganismos a gente pode fazer o a quantificação total ou onde nós estamos nós vamos trabalhar com contagem microscópio e nessa condição é poucas técnicas a gente consegue quantificar os microrganismos viáveis o que vocês conhecem é o de leveduras né utilizando o azul de metileno é com todo com bactérias a gente não consegue fazer isso fica bem complicado então uma das técnicas que a gente utiliza para ver
para quantificar essas esses microrganismos viáveis é a técnica de plaqueamento o ok bom é quando a gente está falando em bloqueamentos técnicas de plaqueamento nós temos três técnicas que podem ser utilizadas a praticamente em superfície também chamada é conhecida como spread-plate o plaqueamento em profundidade conhecido como por plate e o plaqueamento em profundidade com sobre camada nós vamos estar vendo esses 3 tipos de plaqueamento para contagem de microrganismos viáveis entretanto para iniciar nós vamos ter que aprender a preparar a nossa mostra porque não é simplesmente pegar o alimento e jogar lá na placa e incuba
tá que a gente tem que preparar essa mostra quando nós temos alimentos sólidos ou pastosos tá nós utilizamos então um o diluente normalmente esse diluente é água peptonada tá aqui é feito com peptona bacteriológica na concentração de 0,1 porcento então a gente trabalha com 225 ml de água mas a nossa amostra né que seria nosso alimento aqui eu fiz um exemplo zinho da carne moído que eu nós vamos estar pegando 25 gramas dessa mostra e essa mostra então pesada nós vamos estar misturando um saquinho tá então nós vamos estar colocando 25 gramas da mostra nesse
saquinho que a gente chama de saquinho para estou meio quer que o onde nós vamos fazer a organização da mostra com o nosso de leite tá vamos estar então levando essa mostra pro estou maker que vai ser homogenizado normalmente nós trabalhamos aí com 390 golpes por minuto por 2 a em três minutos tá então esse equipamento nessa se vocês observarem aqui tá essas paz elas batem nesse saquinho que vai estar colocado aqui dentro né esse impacto esse cada golpe que a gente fala né ele vai então de fazer com que ocorra a mistura desse alimento
com é o nosso diluente aqui tá e aí então nós vamos ter a nossa mostra que foi diluída 10 vezes por quê que nós eu tô falando para vocês que foi diluída 10 vezes né ou como nós chamamos no laboratório é nós vamos ter a diluição da e do menos um porque bom nós temos 225 ml de diluente mais 25 gramas da nossa nossa do que o nosso alimento tá ou 25 ml se a gente tiver trabalhando com o alimento líquido e a gente pode estar trabalhando a gente faz mesmo procedimento no total nós vamos
ter 250 é ml sou gramas aí no total ok e aí se a gente fizer uma continha 25 gramas ou ml que a gente tem há sobre 250 que é o total volume total que nós temos nós vamos ter igual a 0,1 ou dez a menos um que é a nossa diluição é de 10 vezes ok bom uma vez então a gente tenha preparado a primeira diluição quando a gente tá trabalhando aí principalmente com alimentos pastosos ou alimentos sólidos tá é nós vamos passar é a fazer outras diluições é mas coberto por que que a
gente precisa fazer outras de emissões bom a gente não sabe qual o número de microrganismos viáveis que tem naquele determinado alimento então para que a gente não corra o risco de perder a análise né porque cresce muito microrganismo na placa a gente não a ver as colônias que a gente trabalha com as diluições tá eu posso tá trabalhando a partir da divisão das a menos não ou e até fazer de lição 10 a menos dez né 10.000 dez mil vezes uns 10 20 mil vezes assim por dentro 100 mil vezes assim por diante ok então
como que nós vamos fazer a diluição nós vamos ter nossos tubos nesses tubos de ensaio nós vamos ter a inove ml do nosso diluente que vai ser algo apertou nada tá zero por cento e nesses tubos então nós vamos estar colocando né a nossa mostra alíquota da nossa morte então inicialmente nós vamos ter aqui a nossa amostra diluída né 10 10 vezes e aqui nós vamos estar tirando é uma alíquota de 1 ml e trans e do pro nosso tubo que contém 9ml que nós vamos ter um total de 10ml 1 ml de amostra mais
9 ml de água peptonada que vai dar então a nossa diluição 10 a menos 2 e se eu quiser continuar né fazendo então aí as nossas a nossa a nossa diluição eu vou então ou organizar e homogenizador tipo forte tá ou senão a gente pode também agitar vigorosamente na batendo outubro na palma que nosso a mão e depois nós vamos estar tirando uma miele desse tubo que contém 10 ml contendo né a nossa mostra + diluente e passar para um novo tubo né onde nós vamos então será direção a 10 ou menos tens ou uma
diluição de mil vezes e assim sucessivamente se eu tirar após a organização desse turbo que eu tô chamando 10 - 30 ml e colocar em outro tubo contendo 9 ml de água seccionada eu vou ter uma diluição de 10 a menos 4 ou de 10 mil vezes e se eu tirar após homogenização um ml desse outro tubo que eu estou falando de 10 a menos 4 ou 10 mil vezes e passar para um outro tubo contendo 9 ml eu vou ter uma diluição então de 10 a menos 5 ou de 100 mil vezes ok e
aí
