[BIO] Extração de pigmentos - Fisiologia Vegetal

[Música] bom todos nós sabemos que as plantas são organismos althoff porque são organismos autógrafos porque são organismos capazes de produzir o seu próprio alimento e isso é possível porque as plantas são capazes de transformar a energia luminosa e energia química algumas as plantas algumas algas e algumas bactérias têm essa capacidade pela presença de pigmentos que elas possuem estruturas organizadas organelas especializadas no interior do seu tecido que permite então essa transformação da energia luminosa energia química na aula de hoje nós vamos falar um pouquinho sobre o efeito da luz no sentido de será o elemento responsável

tanto pela since como também pela capacidade que ela possui de degradar os pigmentos e também vamos observar é na prática como nós podemos promover a extração de pigmentos no caso o experimento explorar filiando-se os carotenóides e a partir dessa extração nós podemos inclusive quantificar o teor de pigmentos tecidos vegetais então como nós estávamos falando a luz é um elemento extremamente importante para as plantas porque é a fonte de energia que elas utilizam para a produção de carboidratos então as plantas quando ela se desenvolve inicialmente elas têm estruturas que são denominadas próprios filhos os próprios índios

eles se nós observarmos é na origem dessas estruturas que são os plásticos os plásticos e então são é organizada pelas responsáveis pela reserva de diferentes substâncias tanto substâncias que é possuem cor como é o caso dos cromos plásticos como substâncias que não possuem cor e são geralmente as substâncias de reserva que é o caso dos leucócitos à luz ela é um elemento muito importante pra que esse próprio sítio que seria um plágio inicial antes deles dele ter um estímulo para se tornar um cromo plástico ou um leukoplast a luz é o estímulo então pra que

ele possa dar origem posteriormente a 111 uma estrutura um cromo plástico então esse próprio chile vai se transformar em et o plus tu e esse é o plástico por influência da luz ele vai estar então origem ao cloroplasto voltando então a nossa sequência o próprio estilo então dá origem à noite o plástico e este é o plástico por influência da luz para originar o cloroplasto o cloro plástico tem esse nome essa denominação porque ele é responsável por armazenar clorofila então acordou fila é o principal pimento é fotossintetizantes porém além deste segmento nós temos a influência

de outros pigmentos que participam do processo fotossintético de modo indireto mas também são responsáveis pelo processo da fotossíntese então a cor o fila é o principal segmento presente nos cloroplastos mas como é organizado com cloroplasto então nós vamos observar na sequência relembrar a estrutura de um coro plástico que com certeza você já estudaram nas disciplinas em outras disciplinas disciplinas como a biologia celular vamos relembrar a estrutura então de um cloroplasto o couro plus tem uma estrutura que possui dupla envoltório ou seja um envoltório interno e o envoltório externo entre esses envoltórios nós temos um espaço

interbrand no interior do cloroplasto nós temos estruturas é empilhadas que são denominadas tê-la cordes essas pilhas de tila cordes se intercomunicam umas com as outras por meio das janelas estromais preenchendo todo interior do cloroplasto nós que nós temos então o estroma do cloroplasto e do estroma estão imersos desde ribossomos proteínas enzimas e também material genético é nessa estrutura do tio acorde que fica ancorada a molécula de clorofila a moléculas de clorofila como vocês já que estudaram é uma molécula relativamente complexa mas muito importante para o processo da fotossíntese agora o filho então ela é ancorada

na membrana do tio acorde por uma calda uma cauda longa de hidrocarbonetos e nós temos também a presença de uma função ao que denomina essa calda como futebol e essa porção que âncora a moléculas de clorofila dentro do chile acorde externamente a membrana voltado para a face é externa do chile acorde nós temos então a cabeça da molécula de clorofila que é constituída por um anel por ferir nico que por sua vez é constituída por vários anéis pirró licos e é esses anéis biólogos eles têm no seu centro um átomo de magnésio a diferença entre

fla e agora fila b que são os dois segmentos mais importantes no processo fotossintético é bastante pequena a cor o fla ela apresenta um grupo metil o segundo anel que holly qo enquanto a clorofila b possui um grupo aguerrido nesse mesmo o anel pioli no restante as fórmulas são idênticas essa é a única característica que diferencia a qual o fla da clorofila b dessa forma então pra que um couro plástico tenha é clorofila no seu interior e portanto possa exercer a função fotossintética é necessário então que o estímulo luminoso transforme o etíope mulatu em cloroplasto

na prática que nós vamos observar observar hoje nós vamos então utilizar uma metodologia relativamente simples para promover a extração desses pigmentos incluindo os canais assim como a lusa é necessária para que o action plástico se transforme em couro plástico e é seja induzido a sintetizar a clorofila o excesso de luz também ele é prejudicial para esse pigmento de forma que é o excesso de luz ele pode promover a degradação da coroa fila como a planta evita essa década essa degradação normalmente então o pigmento clorofila dentro do corpo plástico ele envolve o centro de reação que

é o local onde ocorre o processo fotossintético e envolve através de complexos proteicos que são denominados complexos antena ou complexos coletores de luz que são constituídos por filar clorofila b e carotenóides o objetivo desse complexo coletor de luz além de captar a energia luminosa e concentrar no centro de reação é atenuar essa energia para evitar o processo de foto oxidação da clorofila o que acontece com uma planta que se desenvolve sem a presença de luz então esquema se nós formos desenvolver uma planta na ausência de luz o que vai acontecer e esse é o plástico

vai permanecer na forma de ti o plástico ou seja não vai originar o coro plasma as características de uma planta que é desenvolvida sem luminosidade é bastante diferente do que as plantas que nós normalmente observamos a sua coloração é válida ou seja não apresenta cloroplastos geralmente o gancho pelo lar que a estrutura que normalmente se forma é e é perdida a partir do momento que a planta atingia sai de solo e atinge a superfície normalmente ocorre o desenrolar do gancho popular normalmente os ciganos popular permanece e tanto as folhas quanto o caudilho caule da planta

são geralmente de coloração amarelo pálida e normalmente também é o caule se torna bastante este o lado dessa forma a gente observa que a luz é um elemento extremamente importante para o desenvolvimento da planta não só para fins de pigmento mais de pigmentos como também para o desenvolvimento da planta após a germinação e vimos também que o excesso de luz pode ser prejudicial promovendo a foto que se da ação a clorofila então hoje nós vamos observar a extração do da clorofila utilizando um solvente que no caso é a acetona e a partir dessa extração nós

vamos observar também que é possível através de um artifício utilizarmos a o produto dessa extração para o cálculo do teor desses pigmentos então o pessoal agora a gente vai ver os materiais que são utilizados para a realização da inspeção de pigmentos e um passo a passo para fazer isso é a gente utiliza acertou 80% carbonato de cálcio grau e têxtil e aproveita de 10 m é num primeiro momento a gente corta uma área conhecida da folha citando as ruas principais então coloca se essa essa parte da planta no grau como tá aqui é para fazer

uma geração em seguida a gente coloca uma pitada de carbonato de cálcio isso porque durante a maceração as células são rompidas dessa forma os astros que estão dentro do báculo acabam está vazando e estes astros degrada uma fila para evitar que isso aconteça para inibir a ação desses astros a gente coloque uma pitada de carbonato de cálcio é então para a realização da maceração a gente utiliza 8 ml e acetona 80% no primeiro momento a gente coloca cerca de dois meses e no fim transfere-se é o produto da maceração para um tubo de centrifugação colocando

o seu restante da semana para tirar o excesso que fica no grau é essa sem divulgação dura cerca de 15 minutos e ela tem o objetivo de separar o pet do sobre a dengue o pad vai ficar na parte inferior do tubo e vai conter é os restos celulares e o carbonato de cálcio que é adicionado durante uma geração ou sobre na dante é o solvente que contém a clorofila e que vai ser utilizado para leitura no espectrofotômetro então o pessoal dando continuidade o giovanni explicou pra gente como nós fazemos o processo de extração de

pigmentos então posteriormente a centrifugação nós vamos ter o plt constituído de restos celulares e do carbonato de cálcio e o sobre nada ante com os pigmentos flor filatório filho bebê e carotenóides achando filas também estão presentes é junto de si soberana durante esses pigmentos normalmente então agora vão para o espectofotômetro e nós utilizamos basicamente três absorver as absurdas de 470 no metros para analisar o teor de carotenóides totais chanthu filas e carotenóides as observâncias de 6 4 6 e 6 63 são utilizadas nos cálculos para a o cálculo do teor de cloro filla editora fila

b um ponto importante que nós temos devemos ter cuidado quando analisamos o teor de pigmentos é o que preconiza a lei e lambert bm na lei de lampard ele preconiza que existe uma relação entre a absorver lância ea concentração e uma determinada substância porém essa relação entre absorber ans ea concentração de uma determinada substância ela não é ela tem a sua linearidade ou proporcionalidade em que absorvam ânsia e concentração mantida até o valor de na observância de 1,0 todas as vezes que nós vamos fazer uma análise do teor de pigmentos e o valor de absorvente

a ultrapassar uma unidade nós deveríamos então diluir essa solução para que possamos então colocar ter essa concentração na faixa de 0 a 11 e estar então dentro do que é preconizado pela lei de lã da atp por que isso acontece porque acima da unidade 1 de absorver lância nós não sabemos se essa relação de proporcionalidade se manteria podendo ela ficar constante ser maior ou então menor do que o esperado desta forma é muito importante então que absorvam ânsia não passo uma unidade de posse desses resultados nós vamos então utilizar os valores de absorver a ânsia

para promover então o cálculo do teor de pigmentos para analisar o teor de clorofila em microgramas for mr normalmente nós precisamos realizar cálculos onde ambos multiplicamos determinados valores pelas absorventes que foram obtidas no espectrofotômetro a partir então desses cálculos nós podemos obter o teor de clorofila o teor de clorofila b e o teor de clorofila total absurdo ânsia a 470 no metros ela normalmente é utilizada para o cálculo de carotenóides totais onde nós também multiplicamos determinados valores pela absurda ânsia e utilizamos para o cálculo das buscas até noite totais o teor de flúor assilah e

clorofila b que foram calculados anteriormente então como eu disse para vocês nós podemos é também obter a separação dos pigmentos clorofila todo fila b e chanthu filas ou carotenóides por meio da promotora grafia em papel para a realização da câmara fotográfica em papel nós normalmente utilizamos um tanto vindo de um vídeo de relógio como 11 na placa de petri onde nós vamos colocar uma solução concentrada dos pigmentos que foram extraídos e após a centrifugação fazemos um cilindro de papel filtro e colocamos e depositamos e cilindro de papel filtro sob essa solução obtida está dos pigmentos

que foram extraídos permanecemos então por um determinado prazo até ocorrer o movimento desses pigmentos ao longo do papel posteriormente esse material é colocado então parte mento fechado com o metanol que vai promover a separação desses pigmentos desta forma nós podemos observar que é através da promotora fim papel nós podemos observar os carotenóides as clorofilas desculpas shantou filas astor filas e os carotenóides desta forma no sobrenadar ante é extraído das folhas a partir da corrida por cromatografia em papel nós podemos observar e comprovar a separação das shantou filas no primeiro estrato astor filas a e b

no segundo estrato e por último os carotenóides eu gostaria também de aproveitar a oportunidade e mostrar pra vocês que essas práticas foram obtidas de um livro de fisiologia vegetal e nós temos um portal na internet que é livre fornecido pela editora manole que publicou este livro e neste link é nós podemos então no link deste livro nós podemos observar que além de algumas fotos que representam algumas das práticas que são obtidas aqui dá uma planta parecida com a tradição ante a mostrando então estômago os cloroplastos e as células guarda é culpa das células subsidiárias contendo

antocianina e de algumas práticas que foram realizadas de acordo com as práticas fornecidas neste livro neste mesmo link a gente pode seguir é rolando a página nós podemos observar que é estão disponíveis aqui no site do do livro as práticas de relações hídricas as práticas de fotossíntese e nutrição mineral em cada um desses locais vocês podem clicar e vão estar disponíveis na página é materiais tanto teórico né artigos explicando os resultados dessas práticas como por exemplo o diagrama de referir que nós utilizamos também é obtido neste neste site e nós temos ainda é a possibilidade

de baixar esses materiais e ter disponíveis para estudo de acordo com a necessidade os conteúdos de relações hídricas foto ciência nutrição mineral estão entre os conteúdos mais importante e mais estudado dentro da fisiologia vegetal e como vocês viram ao longo da nossa disciplina todos os tópicos foram abordados se houver interesse no aprofundamento em cada um desses tópicos basta vocês acessarem o link do livro e vão poder observar não só as práticas realizados como a fixação dos conteúdos até mais pessoal [Música]