#3 - Toxicologia Forense (190)###

o Olá pessoal passando aqui só para lembrar vocês que hoje é o último dia para solicitar o certificado esse certificado ele comprova que vocês fizeram o curso e pode ser utilizado como horas complementares para faculdade o certificado de 40 horas e é um grande diferencial pertence ao currículo então certificado ele acompanha o material complementar do poço que é um e-book exclusivo e que tem todo o conteúdo dos slides e com certeza esse conteúdo está incrível bom vamos para a nossa aula E aí [Música] E aí E aí o Olá pessoal tudo bem com vocês essa

é a nossa terceira aula do curso de toxicologia forense a sua professora Karine na aula de hoje nós vamos falar sobre as técnicas de análise toxicológica e laudo pericial da área de toxicologia forense bom pra que nós tenhamos uma né uma boa qualidade dessas técnicas de análise pericial né de toxicologia nós precisamos né de qualidade de controle este qualidades nosso laboratório né Para que tem uma boa aplicação uma boa aplicabilidade das técnicas e confiabilidades no processo judicial tem um quantas amostras chegam no laboratório A gente precisa pegar essas amostras e realizar as análises de acordo

com métodos confiáveis então a toxicologia forense ela desempenha um papel fundamental para é a causa e o efeito do determinado evento Então qual a função da toxicologia forense é estabelecer Qual a causa e qual o efeito daquele daquela determinada situação por exemplo crimes e abuso de drogas podem Ou não levar a uma overdose então a na toxicologia forense eles vão dizer se aquela pessoa morreu mesmo por overdose daquela determinada droga ou se foi por algum outro motivo tá para que se tenha um resultado satisfatório então né necessita-se de um rigoroso controle de qualidade que se

estende desde a coleta do material da amostra sua identificação e posterior processamento Então tem que ter controle de qualidade desde o momento da coleta né a cola é que o armazenamento a identificação processamento até emissão do laudo E aí a gente fala sobre a qualidades Laboratórios né os laboratórios for e eles possuem um sistema de qualidade que é classificado em dois tipos então o sistema de qualidade ele pode ser de dois tipos ele pode ser o controle de qualidade tá o controle de qualidade ou a segurança da qualidade isso envolve o sistema de qualidade dos

laboratórios de toxicologia forense ambos tanto controle quanto à segurança né eles têm por finalidade a capacitação do na lista as condições laboratoriais a integridade dos equipamentos utilizados para análise forense os cuidados com a documentação dos procedimentos e resultados além de uma validação desse resultado né Assim como uma boa metodologia para uso dos Testes então o controle EA segurança né o sistema de qualidade ele preza principalmente aí e o cuidado com tanto desde a coleta o conto o cuidado ali com processamento das amostras com a integridade dos equipamentos equipamentos bem equilibrados para que o resultado ele

tem ali uma confiança a validação de métodos é um dos quesitos fundamentais dentro do sistema de qualidade desses Laboratórios então é importantíssimo validar esses métodos antes que faça as análises né pois eles irão conferir credibilidade ao resultado Então os métodos eles consistem principalmente em lineares em linearidade curva de calibração precisão estabilidade especificidade Então tem que existir a validação dos métodos dos equipamentos né Pelas curvas de calibrações Pelas curvas de precisão pela estabilidade pela linearidade Então são todos métodos de segurança de qualidade Laboratorial então como evitar ainda outro requisito importante né que é dentro desse sistema

de qualidade o que a gente chama de cadeia de Custódia quem assiste aí os nossos cursos de perícia criminal forense Sabe desde o início qual a importância da cadeia de Custódia né é um termo que se refere as documentações que os laboratórios realizam para rastrear todo o processo de análise de material biológico então é importante a cadeia de custódia para a gente ter toda a documentação desde a coleta até o processo final tem o controle o cuidado Se todas as etapas foram realizadas de forma correta né como já foi descrito anteriormente desde a coleta né

o transporte análise o descarte a estocagem né tudo isso tem que ser analisado para evitar possíveis erros na identificação possíveis erros aí na identificação do material do doador a vítima ali daquela daquele material biológico de análise bom a cadeia de Custódia pessoal ela envolve principalmente né alguns temas específicos né ela deve conter algumas informações como por exemplo quem manuseou a mostra tem que saber onde ela foi obtida Quando foi realizado o manuseio né E aí ela está dividida em dois tipos de cadeia de Custódia a cadeia de Custódia externa que é aquela que é fora

do laboratório EA cadeia de Custódia interna que são os cuidados que devem ser tomados os registros de inscritos dentro do próprio laboratório então a cadeia de Custódia externa ela compreende o momento da coleta do material o transporte até o laboratório EA cadeia de Custódia interna ela vai ser aí de O que é a mostra chega no laboratório o registro os exames realizados os testes o armazenamento descarte até a devolução então a cadeia de Custódia externa é desde a coleta transporte até o laboratório interno é desde o momento que chega ali durante a realização do processamento

armazenamento até o momento do descarte os laboratórios de análises forenses eles devem seguir normas e diretrizes que englobam a coleta a cadeia de Custódia no processamento da amostra os testes confirmatórios dentre outros então dentro do laboratório tem que ter em normas e diretrizes que vão padronizar todos os testes que serão realizados esses testes eles têm que serem feitos testes de confirmação Tá bom então tudo isso tem que ser bem ela e as normas e diretrizes Para quê Para quê né haja essa lista dos resultados é o que sempre vai mostrar todas essas normas essas diretrizes

elas são para que a gente encontra EA excelência dos resultados laboratoriais forenses tá bom é necessário então que se tem um rigoroso controle de qualidade seja esse controle de qualidade externo ou interno revelando aí com precisão a causa determinada do evento ocorrido porque esse é o objetivo final da toxicologia forense é determinar Qual foi a causa daquele acontecimento as quantidades de amostras biológicas solicitadas para análises né Elas dependem do que vai ser estudado por exemplo as mortes que envolvem a ingestão de determinadas substâncias elas requerem aí a coleta de grande quantidade de material durante a

E você tá então a quantidade de amostra a ser levada para o laboratório mas sempre dá para andar de cada caso então por exemplo se for uma morte por ingestão de uma substância química vai ser necessária uma grande quantidade de material biológico Para ser retirado durante a autópsia UFG LG que é um guia para os laboratórios de toxicologia forense ele recomenda a coleta em quantidade suficiente das amostras para diversas análises e sua repetição quando necessária então o médico Legista Eles já têm esse conhecimento então ele já faz coleta de uma quantidade grande de material porque

às vezes um determinado é teste ele não fica bom é preciso repetir é preciso confirmar então é o ideal é que se tem ali uma coleta de uma quantidade boa de amostra Para que sejam feitos os testes laboratoriais diversa e elas podem ser utilizadas para análise de toxicologia forense por exemplo sangue urina encéfalo coração dele conteúdo gástrico e em situações de extrema decomposição podem ser coletados ainda cabelo o osso tecido muscular então diversas amostras podem ser utilizadas para que a gente tem ali A análise né de confirmação de substância química pode ser órgão pode ser

secreção em fim e aí a gente vai escrever um pouquinho sobre cada uma dessas amostras os métodos de coleta e como que elas são processadas dentro do laboratório de toxicologia forense tá a gente começa que falando pelo sangue né que ele é escolhido aí nas análises toxicológicas né Ele é uma mostra que é bastante escolhida É principalmente a escolha do sangue periférico Ah tá para análise que esse sangue periférico é periférico ele é obtido por punção das veias subclávia e femural tá é a principal forma de coleta é o sangue o sangue periférico obtido das

veias subclávia e femoral devido ao fato de que a possibilidade de contaminação desses locais por difusão de outras regiões é pequena então o sangue de escolha e para análise geralmente é sangue periférico das veias subclávias femural pela chance de contaminação devido ao colabamento né das veias em casos de hemorragias Por exemplo essa coleta ela não se torna possível das veias subclávia femoral aí depois quando a gente não consegue fazer a coleta das veias subclávia femoral então é é realizada a coleta da veia da cavidade cardíaca tá então quando a gente não consegue ter a e

as veias subclávia femoral seja por algum colabamento alguma hemorragia aí Óbvio assim então o pela pelo sangue da cavidade cardíaca que é passível de concentrar mas os analistas devido a sua rede essa redistribuição pós mortal ou até mesmo o sangue de cavidade torácica né que esse ele pode estar contaminado por fluido de outras regiões então o ideal sempre é usar o sangue de veia subclávia e veia femoral se não der tenta usar o sangue da cavidade cardíaca em último caso e tenta o sangue da cavidade torácica que é um sangue que é mais facilmente de

ser contaminado então geralmente deixa ele última opção quais são as substâncias que são facilmente detectadas no sangue principalmente aí cianeto álcool monóxido de carbono são substâncias que são facilmente detectadas no sangue além do sangue tem um o outro tipo de amostra que pode ser utilizado aí na análise de toxicologia forense que é um novo vítreo na Ele é bem utilizada ele constitui um fluido transparente que se localiza na cavidade posterior do olho e preenche o espaço entre o cristalino EA retina tem muitos casos é utilizado também aí o movimento é para análises toxicológicas ele é

mantido ligado por uma rede de fibrilas Ea viscosidade ela deve-se à presença de ácido hialurônico tem um vidro ele é muito utilizado né é uma mostra de fácil coleta e por estar relativamente protegido de contaminações em o compartimento né entre o olho EA retina representa e uma amostra privilegiada então é uma mostra também de escolha para análise toxicológica é uma é uma amostra que fica protegida de contaminação seu uso é o Fado é em análises de cadáveres carbonizados em decomposição ou politraumatizado então o principal uso do humor vítreo é quando se tem aí cadáveres de

interiorizadas ou carbonizados né sua análise análise deste mundo vídeo é que é aí uma um treinamento baseado em centrifugação filtração emprego de hialuronidase que a enzima que vai digerir o ácido hialurônico e o uso é indicado principalmente nesses casos mencionados que são de cadáveres carbonizados ou em decomposição além do sangue e do movidro o outro né uma outra mostra que pode ser utilizada para análise toxicológica pode ser o conteúdo estomacal né então é uma mostra importante para as análises toxicológicas Principalmente quando o histórico se refere a ímpar o são por via oral então é uma

é uma escolha aí quando se tem toxicação por via oral do conteúdo estomacal né porque prevalece né a substância no estômago né a forma fica inalterada do xenobióticos Principalmente nos no primeiro momento Então quando você teve intoxicação via oral ideia vai fazer aí uma coleta de conteúdo estomacal o estômago ele ligada às suas extremidades Cardia e piloro ele deve ser enviado fechada ou a boratório então o médico Legista ele faz né a coleta do órgão pega o o órgão envia ele de forma fechada né fecha as extremidades cima embaixo né usar Chaves observados na abertura

eles podem direcionar a análises Por exemplo quando abre lá o estômago pode ser que tem ali restos de toxicantes não absorvidos como comprimidos então o e sempre que se for me toxicação por via oral passa ali eles retirem o estômago vir completo às vezes quando abre controle restos e substâncias químicas ainda não digeridas como por exemplo alguns comprimidos além do sangue do movi Trio do conteúdo estomacal um outro importante órgão para análise é o fígado né Esse é um dos mais importantes tecidos coletados para análises toxicológicas pós-mortem porque porque no fígado que acontece a metabolização

de todas as substâncias que entra no nosso organismo tá então ele é um órgão que apresenta elevada capacidade de ligação a xenobióticos principalmente também a Albumina né que ela se liga muito aos componentes aí transportando muitas substâncias de Albumina que a presente no fígado então é ela é o principal órgão envolvido na biotransformação nos toxicantes é o principal órgão envolvi a carbonização dessas substâncias químicas é um fígado é um órgão que é muito importante para análise ele possui uma importa vascularização e é uma passagem obrigatória dos xenobióticos né absorvidos no intestino para a circulação sistêmica

então o fígado além de ter uma grande vascularização seu órgão de metabolização é todas as substâncias que se passam pelo intestino elas tem que ir até o fígado para que a partir dali essa essa substância ao câncer a corrente sistêmica a corrente sanguínea além do fígado né do sangue do conteúdo estomacal do movido Nós também temos os rins que são é um importante órgão para análise toxicológica tão ruim ele é o principal órgão de eliminação para a maioria das drogas né Ele é um órgão com importante vascularização e ele é rico em metallothionein nas né

bom então aí apresenta apresentando aí particular relevância nos casos de intoxicação por metais tóxicos então ao o órgão é que é o rim ele é um importante órgão para análise também além da sua vascularização ele tem aí compostos que são importantes principalmente aí na intoxicação por metais tóxicos além disso a gente pode fazer análise e também do encéfalo né que é um tecido muito vascularizado o encéfalo devido a sua característica lipídica ele permite que os compostos lipossolúveis eles através em a barreira hematoencefálica e atingir uma elevada concentração é por isso que muitas drogas elas atingem

rapidamente sistema nervoso por conta desse conteúdo lipídico que permite a passagem né essa passagem dessas drogas que atravessam a barreira hematoencefálica essa Matriz do encéfalo né acaba sendo pouco e análises toxicológicas por causa dos poucos estudos sobre a distribuição dos toxicantes EA falta de técnicas e purificações Para obtenção dos dados então o encéfalo ele não é tão utilizado para análise toxicológica o mais Ideal São amostras até que são mais fáceis de coleta né de mais fácil acesso e também por conta de um esse aqui não ser uma um órgão de mais difícil acesso ele acaba

tendo não tendo tantos estudos assim como os demais órgãos para análise de absorção e distribuição das diferentes toxinas a urina eu acho que é o fluido que é mais utilizado para análise toxicológica né a urina é um fluido extensamente utilizado em análises toxicológicas apresentando um valor aí inestimável nas análises de triagem sendo uma matriz né de eleição para a maioria dos Testes de triagem que acontece ou seja os testes imunoenzimáticos né apresentando maior concentração aí dos diversos metabolismo então a urina é o método de mais maior escolha os testes toxicológicos é uma das matrizes com

menor número de interferentes endógenos por ser constituída por água e apresentando-se com níveis significativos de lipídios e proteínas em Estados patológicos então a urina é uma ótima amostra para análise nela sofre pouca influência dos compostos endógenos é contudo o pessoal é quando a gente fala em urina né devido ao relaxamento dos esfíncteres né Outra almas com rompimento de bexiga ou falta de ter havido uma micção no momento que precedeu a morte a bexiga ela pode estar vazia no momento da necrópsia né assim muitas vezes acaba sendo inviável o exame de urina então às vezes eu

tenho urina na bexiga né porque às vezes a pessoa eu acabou fazendo xixi logo ali né antes da morte né ou então às vezes por alguma alteração fisiológica renal não tem urina E aí às vezes não é possível fazer análise da urina Tá mas a urina ela é o método de escolha aí para fazer os principais testes toxicológicos as amostras que são coletadas é elas devem no laboratório permanecerem ideais condições de armazenamento né Essas amostras elas são coletadas de acordo com as normas e procedimentos de laboratório forense de toxicologia analítica de maneira geral elas não

são adicionadas conservantes né olha das amostras elas vão para o laboratório para em seguida já serem realizados os testes elas devem ser armazenadas de forma adequada para que não tem nenhum problema e depois Porém quando há suspeita de intoxicação a kahina É recomendada a coleta em frasco com fluoreto de sódio então geralmente não precisa adicionar conservante as amostras quando elas já são encaminhadas para o laboratório mas em alguns casos específicos tem algumas normas para serem tomadas por exemplo a suspeita de intoxicação por cocaína então o ideal é que realiza ali a coleta né do Sangue

em um frasco de fluoreto de sódio que conserva melhor aquela mostra e que mantenha e garante a estabilidade dessa substância tá então na análise de metais tóxicos por exemplo uma amostra de sangue adicional deve ser coletada em um tubo contendo um quelante como por exemplo a deter tem um cara caso né de análise são são casos que podem acontecer às sessões de acordo com as normas de cada um laboratório então por exemplo se existe suspeita de intoxicação por cocaína aligera o indica se o tubo de fluoreto ou se for algum metal tóxico né é importante

coletar uma amostra mais um tubo a mais ali no tubo de edta quelante como é de ter a por exemplo tá então cada laboratório vai ter as suas próprias normas os seus próprios padrões isso também vai depender dos kits que são utilizados por cada laboratório tá então cada laboratório ele deve seguir o protocolo dos seus kits dos seus reagentes específicos o estômago pessoal ele deve ser coletado com as extremidades amarradas como a gente viu humor vítreo ele deve ser coletado com os dois olhos né dos dois olhos tem que coletar não só de um com

e pode ser armazenado ali sem conservante então o movimento ele deve ser colocado os dois olhos geralmente faz a coleta com o uso de seringa né E aí ele pode ser adicionado ali sem o uso de conserva e o encéfalo né coletado após a abertura da calota craniana e acondicionado em recipiente apropriado sem adição de conservantes né então o encéfalo e pode ser coletado ali com abertura da calota craniana e ele não precisa de conservante logo seguindo logo para análise e o fígado também fígado rim e pulmão eles também podem ser coletados e também não

precisam de conservantes a urina coletada por meio da pulsão da bexiga né nos cadáveres e é um metro da ideação em ti escolha então a gente falou sobre algumas técnicas que são aplicadas algumas normas que são aplicadas para as diferentes escola é trás das amostras que são usadas do laboratório de toxicologia forense todas as amostras coletadas elas devem ser armazenadas a 4 graus até elas serem enviadas ao laboratório até e após os procedimentos analíticos Elas serão armazenadas a 20 graus Celsius então todas as amostras são coletadas e colocadas no gelinho a 4° chegando no laboratório

congela elas ali a menos 20 graus Celsius coloca elas no freezer bom aqui dessa eu coloquei um quadro de materiais que são analisados pós-morte em tá acho que os principais materiais as principais amostras são sangue urina fígado e rins cérebro o movidro ou conteúdo gástrico Então como a gente falou Essas são as principais amostras biológicas a que eu coloquei a quantidade de cada uma dessas amostras que são necessárias aí para análise toxicológica tá o sangue aproximadamente 25 ml a urina o máximo que consegui fígado e rim aproximadamente 100 gramas cérebro 100g o movimento e o

máximo que conseguir o conteúdo gástrico o máximo que conseguir aqui são os principais né as principais drogas que são pesquisadas nessas nessas amostras biológicas então no sangue e na urina são pesquisadas principalmente é tanol Outras Drogas medicamentos agrotóxicos no fígado e no rim a maioria das drogas né que elas são metabolizados e muito metabolizadas no fígado e no rim o e para excreção principalmente no rim no cérebro barbitúricos né drogas diversas Outras Drogas então no cérebro muitas drogas elas afetam o sistema nervoso humor vidro é etanol Outras Drogas de abuso aqui são drogas de abuso

então diversas Outras Drogas e no conteúdo gástrico também são drogas principalmente ingeridas ou agrotóxicos tá então os quadros de o causados pela exposição aos agentes em Nova bióticos na maioria das vezes apresentam sintomas e lesões inespecíficos tá então quando você vai fazer a análise toxicológica é engraçado que muitos quadros de intoxicação às vezes é Nações não né na maioria das vezes esses quadros eles vão ter ali sintomas ou lesões inespecíficos que fica difícil de confirmar Qual que é a causa daquele acontecimento E aí isso requer a utilização de métodos analíticos que possibilitem o isolamento a

identificação EA quantificação das substâncias nas amostras biológicas Então não é você pegar uma urina né é a pessoa tá com sintomas específicos que você vai saber a cocaína é uma droga depressora Aí é um cetamina é maconha LSD e não de ouro e você não vai saber pelo sintoma da pessoa Às vezes você vai ter uma noção é uma droga depressora é uma droga perturbadora essa pessoa morreu a pessoa como é que eu vou saber qual é a droga então geralmente são feitos muitos testes para que você tem a confirmação da droga que a pessoa

utilizou né tem que fazer muitos técnicos e as técnicas utilizadas são técnicas de isolamento da droga identificação da droga e quantificação dessa droga Então é isolamento identificação e quantificação e para esse bicho uma série de procedimentos para que sejam feitas essas etapas então o segundo ao estadual que foi lançado aqui em 1982 né ela classifica essas drogas segundo o seu grau aí de toxicidad tá elas são divididas em classes tá então na classe um nós temos as drogas que são altamente tóxicas para o homem e são lesões sistêmicas possuem propriedades carcinogênicas teratogênicos e mutagênicos e

prejudica o processo reprodutivo então quando toques o lojista ele vai emitir o Aldo não é de uma determinada substância química ele tem que dizer essa droga ela está né na categoria de classe um de drogas altamente tóxicas para o homem Classe 2 São aquelas drogas que são mediamente tóxicas geralmente elas causam irritação na pele classe 3 são aquelas que são pouco tóxicas causa irritação aí moderada na pele e aquelas de quase de classe 4 que praticamente elas não são tóxicas provocam aí uma irritação leve na pele tá bom Então essas são as classes das diferentes

drogas substâncias químicas então conforme foi publicado Nesse artigo aqui do em 2000 E ele fala que os mais graves problemas na sociedade né nessa sociedade moderna são as drogas de uso abusivo Então essas Esse é o principal problema social para gente pois as elevadas taxas de homicídio né que são registrados as elevadas taxas de homicídio se deve ao consumo abusivo de álcool e a presença de drogas ilícitas então é drogas que são muito utilizadas né comumente é o álcool eo cigarro e o álcool é como se fosse uma coisa normal né todo mundo falar esse

final de semana ou tomar uma cervejinha e aí só que aí as pessoas às vezes vão começando bebendo um pouquinho depois eu atendo uso abusivo dessas drogas e esse uso abusivo né de drogas ele pode causar sérios problemas em relação às drogas ilícitas né Elas podem causar também é diferente as ações no nosso sistema nervoso alterações psicoativas se com trocas né porque elas vão atuar diretamente no sistema nervoso central então tanto drogas lícitas que são aquelas que a gente pode usar comumente como ao quanto drogas ilícitas elas podem atuar diretamente no nosso sistema nervoso e

isso é um problema social né E se acha que que ele fala que esse é um problema no problema que é muito comumente aí relatado pela sociedade e essas drogas elas modificam o humor das pessoas a consciência os pensamentos e os sentimentos e aí o uso abusivo dessas drogas é o que leva aí a água cometimento principalmente aí de crimes então quando vai ser feita a análise toxicológica e tem que ser feita essa relação a essa pessoa usou droga nos o droga ela teve overdose ela sob efeito da droga ela causou em isso ela não

causou isso Enfim então existem estratégias de busca é direcionada ou não direcionada direcionada ou não direcionada de compostos de relevância toxicológica Então existe uma estratégia de busca para saber se aquela pessoa ela teve o uso de algo da substância química ou não na busca que a gente chama de direcionada né ela pode ser aplicada quando a presença de uma substância ou no grupo de substância química é suspeito ou quando o analista ele está interessado em um número limitado de substâncias né como no controle de dopagem do controle de drogas em local de trabalho tem uma

busca direcionada é quando eu chego no crime e eu vejo ali uma monte né de cocaína Aí quando eu vou fazer análise daquele corpo eu vou dizer ó eu vou fazer aqui o exame para ver se tem cocaína porque é uma coisa é uma suspeita que eu já tenho para ver se tem cocaína tá então isso é uma busca direcionada ou às vezes E aí quando vai fazer aquele exame toxicológico nos atletas o doppio eles vão lá conferir 30 tipos de substâncias químicas Então pega o xixi ali por exemplo a urina o sangue daquele atleta

E aí avalia ali aqueles 30 tipos de substância química ou às vezes no trabalho a no trabalho a gente vai ver dez tipos de substância química Isso é uma busca direcionada é quando você tem um Norte amento você sabe que você tá procurando tá a música não direcionada é quando você recebe uma mostra e você não faz ideia do que tem naquela mostra Então você tem que fazer uma série de testes teste há milhões de amostras todas as amostras possíveis para tentar chegar ali no isolamento do que você vai ter naquela amostra biológica Então essa

busca não direcionada ela também é conhecida com uma análise desse conhecida Total tá porque a gente não sabe o que é que tem ela é aplicada e não existem informações que possam direcionar os procedimentos analíticos com o número praticamente ilimitado de substâncias né presente na amostra Então esse tipo de análise ela é esse tipo ele requer uma abordagem concisa planejada que a gente conhece aí como análise toxicológica sistêmica ou APS a gente tem que planejar Olha eu não sei o que é que têm nessa mostra então eu vou primeiro tentar fazer um teste para tá

e substâncias aqui deu depois faço tal coisa tal coisa então tem que ser uma abordagem bem precisa bem planejada que a gente conhece como análise toxicológica sistêmica A análise toxicológica e sistêmico lá TS ela definida como a busca químico analítica lógica tá em uma dada amostra de teste por uma substância potencialmente tóxica cuja presença não é a cada e cuja identidade é desconhecida então A análise toxicológica sistêmica é uma uma metodologia aplicada quando a gente não sabe o que é que tem naquela mostra quando a gente vai fazer a busca pela substância tem uma substância

que ela não é conhecida que ela não é identificada os objetivos finais da aps são detectar a presença de todas as substâncias de relevância toxicológica presente na amostra e identificá-los com maior grau possível de certeza e excluir a presença de todas as demais substâncias relevantes então o objetivo da análise toxicológica sistêmica é detectar todas as substâncias que tem né identificá-las e depois exclui aquelas que não são relevantes deixar só as que são palavras por exemplo ai eu identifiquei aqui 10 amor dez substâncias a a coisa Rodrigo ficar cada uma delas a mas dessas apenas a

65 causa intoxicação Então as outras eu excluo vou fazer análise dessas cinco fazendo testes específicos dessa forma pessoal para atingir né o objetivo né princípio de detectar e identificar corretamente todas as substâncias relevantes presentes em uma determinada amostra uma sequência de procedimentos eles são sistematizados né então existe uma sequência de testes a serem realizados para que a gente tem ali a identificação correta das substâncias químicas a primeira etapa da análise toxicológica sistemática é a preparação da amostra tá então essa mostra ela tem que ser bem preparada para que a gente tem ali depois isolamento e

identificação dessa mostra tá então é a preparação da amostra essa preparação ela consiste em isolar se concentrar os compostos de interesse então a gente tá preparando a loja então vou isolar ele o que os compostos que eu tenho interesse danann os homens ela é realizado empregando extração em fase sólida o extração líquido-líquido são métodos de extração Então esse é o primeiro passo que é a preparação da amostra né a segunda etapa ela consiste principalmente na diferenciação diferenciação e detecção dos corpos compostos presentes na amostra então no primeiro passo a gente tem a preparação da amostra

e no segundo passo a gente tem a diferenciação e detecção ali das substâncias presentes naquela morte tem um nesta segunda etapa de diferenciação e detecção né Ela é normalmente realizada por métodos cromatográficos como por exemplo e a tomar cromatografia em camada delgada cromatografia a gás cromatografia líquida de alta eficiência diferentes métodos de detecção são aplicados e as cromatografias Então nesse a primeira etapa é preparação da Morte isolamento segunda etapa é diferenciação e de atracção por 6 e principalmente de métodos cromatográficos de forma geral pessoal são preferidos os métodos instrumentais Associados a detectores que são multidimensionais

né como por exemplo e os seletivos de massas e os de arranjo de diodos relativos em massas então a gente chama de GC E hplc então são métodos que são aplicados aí nessa etapa de diferenciação e detecção são métodos aí de espectrometria de massa que podem se associar aos tipos de cromatografia a última etapa da análise é a e da substância detectada tá então primeira etapa preparo da amostra isolamento segunda etapa diferenciação e detecção terceira etapa identificação da substância Tá bom então nesse momento de identificação né Tem uma comparação dos resultados analíticos com os bancos

de dados de referência então com ganhos significativos na capacidade de identificar as substâncias tóxicas lógicas aí observando quando os dados analíticos de baixa concentração são combinados então por exemplo a segunda etapa primeira etapa preparo isolamento segunda etapa ali diferenciação e detecção terceira etapa identificação Então diga assim olha aqui tem 10 substâncias Elas têm essas características vamos comparar com o nosso quadro de banco de dados então a terceira tá pés eu digo a essa substância é essa essa essa essa que eu faço uma comparação do lado dessa substância com o meu banco de dados para identificar

corretamente a minha mostra tá bom após a identificação da substância uma etapa de quantificação é necessária assim de permitir a adequada interpretação toxicológica então após identificação da amostra é feita a quantificação para a gente saber realmente se Aquela quantidade de droga foi suficiente para cometer aquele creme Tá bom então as etapas de análise toxicológica são é preparação da Morte isolamento diferenciação e detecção e identificação e depois quantificação tá a análise toxicológica Então ela inicia-se com os testes de triagem né ou screen seguido por um teste confirmatório então é quando a gente vai fazer também né

em relação aos testes já propriamente ditos né os materiais Então essas amostras esses sangue essa urina eles vão ser enviados para trás análise tem suspeita de tal coisa então quando deixe uma suspeita né Existem os testes de triatlo a essa pessoa ela estava alterada estavam em Alerta ela estava agressivo Então já se tem existem as suspeitas então é feito uma triagem e é feito é o que a gente também discrimine que são testes que são realizados aí para a gente tentar identificar e depois confirmar tá bom então a triagem ela é realizada através de técnicas

de imunoensaio tá que dependendo do teste pode conter anticorpos para detecção de uma droga específica de um metabólito ou de uma classe de substâncias então por exemplo a chave uma amostra de urina na laboratório forense e existe uma suspeita a lide que ele tenha cocaína a gente faz um teste É lógico de acordo com a ligação antígeno-anticorpo Então pega o sangue do paciente Vamos ver que ele tem ele cocaína pega o teste e aí tem um anticorpo que se liga na Caucaia se a gente consegue ver por um teste imunológico senão aquela menina tem colocarem

ou não se realmente tem aí são enviados aí os testes confirmatórios que são testes mais específicos Tá bom então é esses testes eles apresentam alta sensibilidade mais costumam ser poucos pouco específico então por exemplo a tem uma droga total que a gente vai usar e às vezes ela não detecta No método que a gente usou imunologico então a gente usa testes mais específicos que são os testes de imunocromatografia geralmente é quando não se tem nenhuma ideia do que tenha na causa daquele sangue então você não tem nenhuma suspeita Então você já faz já vai direto

para aqueles procedimentos que eu falo então quando não se sabe de nada quando é uma busca que você não e nada faz que isolamento é a identificação Aí você faz a identificação daquele formato que eu falei um técnicas Expresso específicas de cromatografia e espectrometria de massa quando você tem uma suspeita então você pode aplicar essa triagem e estes testes iniciais como por exemplo imunológico e aí você faz o teste confirmatório para saber se realmente é Tá bom mas geralmente quando não se tem uma ideia faz os testes de acordo com o passo a passo tá

preparação isolamento diferenciação detecção identificação e quantificação os métodos analíticos mais utilizados na toxicologia forense para determinação e quantificação Luciana bióticos são as técnicas que apresentam maior sensibilidade e compatibilidade com as concentrações dos compostos de interesse Então os métodos que são mais utilizados são aqueles mais específicos né que são mais sensíveis bom então as técnicas que são consideradas padrão Ouro da tecnologia forense de fato são as análises de cromatografia em fase gasosa ou fase líquida acoplada sair à espectrometria de massa que também são conhecidas por siglas do tipo gcms lc-ms Então as cromatografia são as queridinhas

padrão-ouro da toxicologia forense eu vou apresentar para vocês Quais são as principais técnicas empregadas Então a gente tem aqui a espectrofotometria os em mundo ensaios a cromatografia e espectrometria de massa a espectroscopia que são técnicas que apresentam aí alta sensibilidade e alta e especificidade tá bom a gente vai falar um pouquinho sobre cada uma delas na espectrofotometria existe um princípio para essa técnica que a medida de absorção ou transmissão de luz então absolu e ela depende basicamente da concentração das moléculas é avaliada a densidade óptica então nesta imagem a gente consegue ver uma uma medição

né de espectrofotometria então a luz ela incide né a gente coloca a amostra que e ela dá para a gente através de uma fonte de luz Qual que é a densidade óptica dessa morte durante o meu doutorado eu trabalhei com espectrofotometria E aí eu pegava o sangue humano e eu observava ali naquele sangue né qual que era o comprimento de onda que ele mais absorvo guia então eu utilizava células como monócitos linfócitos e neutrófilos e e eu a observava após um tratamento específico se aquelas células ela absorverá mais luz em qual comprimento de onda eu

publiquei esse artigo em inglês uma revista americana se alguém tiver interesse pode me pedir depois para vocês verem meu trabalho sobre espectrofotometria com muito legal a cada substância química a gente consegue fazer a medição por espectrofotometria né então a cocaína ela tem um espectrofotômetro uma necessidade de óculos eu específico então se eu pegar aquela amostra de urina e ela batendo aquele valor de espectrofotometria eu vou saber que tem cocaína então às vezes a gente consegue ver isso por coloração nos laboratórios de análises clínicas os equipamentos que são semiquantitativos a gente também os espectrofotometria por exemplo

se eu quiser verificar a quantidade de glicose que tem numa amostra no equipamento sendo quantitativo eu vou avaliar a densidade óptica então de acordo com o kit que eu aplico quanto mais cor se tiver quanto maior a densidade óptica que tiver quer dizer quanto mais glicose eu tenho então espero que tá faltando é quando a gente consegue mensurar absorção ou transmissão de luz de uma substância tá então além da espectrofotometria tem os testes de imuno III bom né que são princípios de técnica Principalmente as técnicas de Elisa que elas fazem a ligação aqui do antígeno

com os anticorpos e a gente consegue mensurar também por um método imunoenzimático colorimétrico por densidade óptica então quanto maior a densidade óptica quer dizer que maior a gente tem a concentração daquela determinada substância então por exemplo eu quero saber se tem cocaína então eu pego um método né de rolar ensaio e coloca aqui os pontos para cocaína coloca a urina ligou e aí eu consigo ver isso numa densidade óptica então quanto mais ligações tiver de colocar ainda com anticorpo quer dizer que maior a densidade óptica é do resultado desse exame então Esse princípio ele se

baseia em reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações que são enzimáticas a cromatografia que é o padrão-ouro né é um método físico-químico que se baseia na migração o componentes de uma mistura entre duas fases então a fase estacionária que retém elementos e a fase móvel também que ela conduz a mistura por meio de um solos através de uma fase estacionária então coloquei aqui para vocês né uma imagem de um exemplo de cromatografia então nós temos aqui a fase estacionária que é onde retém os elementos e Aqui nós temos a fase móvel que é onde vai ser

conduzida a mistura e dos da amostra e depois vai ser feita que a separação de cada uma dessas substâncias então é uma técnica que pode ser utilizada para Purificação da infecção ou auxiliar a separação de substâncias para cromatografia lá consegue fazer tudo isso ao mesmo tempo é uma técnica super aplicada e no laboratório de toxicologia forense é uma técnica pode ser utilizada para diversas coisas como a gente falou né Purificação e são ou separação de substâncias espectrometria de massa é uma outra técnica utilizada né é uma técnica analítica física para detectar e identificar as moléculas

de interesse por meio da medição da sua massa Então como o próprio nome diz a a massa dessas substâncias é quem faz a separação delas identificação das mesmas além da espectrometria de massa nós temos também a espectroscopia que ela é usada para analisar compostos em química para determinar Quais elementos diferentes compõem uma amostra pela interação entre a radiação eletromagnética EA matéria então é um método que é basicamente ele é um método químico baseado aí na interação entre a radiação eletromagnética EA matéria Então são métodos que são aplicados tá pessoal são os principais métodos que a

gente usa aí no laboratório de toxicologia forense e imunoensaios espectrofotometria espectrometria de massa ou espectroscopia sendo que a gente usa em padrão-ouro as cromatografia bom uma vez que a gente falou os principais métodos de análises de drogas né de quantificação de procedimentos de como que é feita a investigação de uma determinada droga se a gente tem suspeita ou não eu vou falar um pouquinho para vocês de como elaborar o laudo pericial toxicológico então o laudo pericial toxicológico de análises clínicas né ele deve conter o máximo de informações possíveis porque vai ser o laudo que vai

ser enviado para o juiz então ele deve identificar o processo né ou inquérito deve ter a identificação do processo ou inquérito EA entidade requisitante além disso tem que ter um método analítico utilizado e referências a técnica de isolamento que foi empregado Então tá é bem detalhado no laudo pericial Além disso tem que ter a data da recepção da amostra EA data da conclusão do exame de forma específica Além disso tem que ter também quais amostras que foram analisadas e tem que ter o nome do especialista que foi responsável pela execução das análises né tem que

ter os níveis de detecção né EA quantificação quanto que foi a chave dessa droga tão tudo tem que estar bem descrito o estado das amostras se elas estavam em boas condições né dentre outros dados que são pertinentes aí para elucidação das conclusões Então tudo tem que ser descrito no áudio de forma descritiva no geral pessoal o laudo de perícia toxicológica ele é enviado ao perito Legista que solicitou a perícia e depois ele é enviado isolado ou junto com o Aldo de autópsia ou de clínica Médico Legal A Entidade bom então esse lado ele tem que

ser enviado lá para o perito Legista e depois ele tem que ser enviada ali junto com o laudo de autópsia né para a entidade que foi requisitante as informações provenientes dos laudos toxicológicos forenses elas são de suma importância para estudar a utilização de diversas substâncias químicas bem como os efeitos deletérios oriundos de seu uso para diversos fins então esses laudos eles não são importantes não só para a justiça para determinar o caso mas também para futuros estudos então quando os cientistas eles precisam estudar determinadas drogas eles pegam aqueles laudos para eles verem Quais são as

concentrações que podem levar overdose Quais são as concentrações podem levar à morte então a parte desses laudos periciais a gente consegue também ter ali elucidação de novos estudos científicos referente a estas determinadas drogas então a senhora nossa aula de hoje sobre as as técnicas de toxicologia forense das análises de toxicologia e a emissão de laudos periciais a nossa próxima aula vai ser sobre as drogas facilitadoras de crime né Principalmente distrito pros até a próxima ao