[Música] falou em microbiologia falou em um meio de cultura e aí pessoal eu fico nossa de cabelo em pé quando às vezes eu vou não visitará um laboratório eu as estou trocando idéia com o pessoal gente o povo acha que meio de cultura é rápido e fácil de preparar não tem nem que ter cuidado né não é se começar errado ali já era não tem jeito você pode ter os melhores estufas se pode trabalhando com a melhor marca de meio de cultura do planeta se você não seguir alguns cuidados e as recomendações do fabricante para
produzir pra preparar aquele meio de cobrança o laboratório não dá pra confiar resultado tá que é o meio de cultura nem os cuidados aí com os meios culturas desidratado graças a deus hoje em dia já não precisa mais mistura um kadim disso um kadim daquilo cadin daquilo outro eu fiz um meio de cultura um pozinho com água às vezes tem um suplemento mas é mais fácil né é um pozinho desidratado então abril ele fala aguinha vem ni mim tô passando sede agroscope demais e aí já começa a ter problemas se deixar ele absorva água ele
não vai a qualidade deles vai cair fotossensível alguém já viu um meio de cultura embalada em frasco transparente tem uma razão pessoal tem alguns constituintes ele dentro que estão relacionadas às reações bioquímicas que a gente espera dos microorganismos tempo que são fotossensíveis e aí o mais legal que tem uns que depois de preparado tem que ser condicionado no escurinho alguém aqui a jaguar do meio de cultura em frasco âmbar ou e rolou em papel alumínio alguma vez na vida ai que lindo ela sempre me surpreendi positivamente é assim porque existem alguém já ensinou pra ela
ela leu o manual está escrito lá né precisa porque não ler o rótulo ler o rótulo que está escrito lá um que eu vou lembrar agora de cara da rbc que é um dos o futuro que não é o que está na instrução normativa 62 e 63 que é pra bolores e leveduras mas existem outros a gente tem que ler não utilizar caso se perceba alteração de couro presença de umidade no frasco ainda a preparar a estocar conforme orientação do fabricante então você tem que olhar se é no escuro se por acaso às vezes um
meio de cultura se compra ele pronto já preparar placa pronta tudo pronto ou algum suplemento olha lá sempre tem o desenho da outra escrita manter a temperatura digital ou tem até o desenho do termômetro 5 a máxima ea mínima de conservação que eu acho super bacana você bate o olho já vem às vezes quando a gente recebe aqui na br quality as meninas as minhas análises já ficam procurando cabelo desenho porque daí elas vão guardar conformidade ali e conferir se já chegou naquele jeito também é preparar e se chocar com uma orientação do fabricante utilizar
a água destilada organizada pessoal eu tenho que utilizar a água de qualidade e água muito pura para não tem interferência nenhuma lhe com os meus constituintes do meio de cultura então tem que ser água destilada tá não pode ser organizada não pode a água da torneira na vida tem um poço a menina então não vai rolar tá tem que ser essa aí no preparo de meios contendo água em sua formulação tudo que ficar sólido depois que eu preparar deixar de tratar por cerca de dez minutos antes de iniciar o cozimento pessoal aqui é regra de
ouro e quase ninguém tem esse cuidado na pressa na correria do dia a dia imagine carol que eu vou pesar botar água fica esperando dez minutos de começar a cozinhar só você se organizar isso não vai mudar nada não vai aumentar em dez minutos a sua rotina tenho certeza disso pesa tudo que tem água pesa coloca água mistura com vazão de vida e deixe descansando 10 minutos qual a importância disso tem agora um dos constituintes al agha nesse tempo a água vai hidratar bem lá você vai ter um ao h o meio de cultura vai
ser mais lisinho vai solidificar mais fácil vai estar mais longe em todo lugar zinho ceb da placa voltar bem organizado bem equilibrado em termos de nutrientes rico e isso é super importante é regra de ouro só quem não faz isso faz o teste depois me conta faz toda a diferença pessoal esse é a segredinho master tá então para preparar um meio de cultura a primeira coisa eu vou usar luvas máscara e óculos é porque é importante usar máscara quando eu vou pesar o meio de cultura levanta muito sozinho que ele possa ir lá além de
fingir dinho é tóxico então usem a máscara está a luva vai da regra do seu laboratório tá você não usa mão em nenhum momento que seu hotel com isso pato então não tem contato e a luva às vezes se você não foi uma pessoa muito disciplinada você acaba sujando muito mais alunos do que acha que tipo assim nada vai chegar em mim que eu tô com a luva então cuidado que a luva também requer higienização e óculos de segurança normal também o pozinho não é legal ver nos olhos tá meio desidratados armazenado adequadamente e água
destilada ou semelhantes de boa qualidade nós já comentamos então eu peso na balança de preferência calibrada dissolvo e espera até de sor dispersão total aí se for um meio que contém água antes do aquecimento da fervura o segredo do sucesso são os dez minutos de hidratação senão já vai direto pra se for meio caldo né sem água já vai direto pra de é distribuir nos frascos de armazenamento para esterilização aí quando tem água aquece até fervura cuidado leiam o rótulo às vezes um mesmo meio de cultura de marcas diferentes vão ter tempo de cozimento diferentes
e vai pegar um vai estar escrito assim aqui essa térreo quando levantar fervura desligue não está escrito em português mineiro não tá escrito até fervura nunca levantar fervura desligue isso é que a gente interpretar e outro vai ter escrito assim a queda quando começar a ferver ura marque um minuto dois minutos três minutos então leiam sempre a regra ou a dica na verdade é o seguinte tem um formulário um receituário de preparo de meio de cultura eu fiz esse dia para um cliente quando vou falar quem é óbvio né mas eu fiz o cliente vai
lembrar quando ele assistisse aqui quando ele estiver vendo aqui agora ele vai ver a gente fez não tem lá um meio de cultura tal quais são as marcas que eu uso no meu laboratório e como que prepara a cada marca o cuidado de esterilização façam isso no laboratório de vocês vai dar um tempo um trabalho no começo na hora de fazer mas depois se bota lá nas salas preparadas médico cultura ó show de bola funciona que é uma beleza tão distribuem frascos com capacidade de uma duas ou três vezes o volume do meio que é
isso aqui pessoal não pode ter piada em cima não tá porque principalmente água na hora que for é responde e ciaga como você vai conseguir distribuir um negócio não tem nem lugar para o calor circular ali dentro está tudo cheio de médico cultura então não enche normalmente a gente que usa por exemplo frasco de 500 de 250 ml a gente põe até os 150 180 por origem não enche deixa um head space que ele rende space é importante e esterilização quando indicado porque a gente conhece meio de cultura que a gente prepara que não precisa
não deve não precisa não não deve ser esterilizado já fala disso a suplementação quando o caso identifique se toca e no dia no momento de usar prepara para uso eu vou quem lembra em um meio de cultura que não precisa e não deve e esterilizar vrb o que vem na cabeça de todo mundo tá que é o mais comum existem alguns meios de cultura inclusive relacionadas à pesquisa de patógenos também que acontece isso qual é um cuidado diferente qual é o cuidado plus a mais que eu tenho que ter quando eu vou preparar um meio
de cultura que não deve ser esterilizado olha só de preferência eu vou usar espátula estéreo na pesagem tá depois que o cozinhar o meio eu matei todo mundo mas eu não preciso contaminar o meio à densa e deixar o e meio vai crescer eo povo não gostar de muita água já começa a crescer dentro frasquinho mesmo então eu peço com isso o espaço esterilizada faça pesagem da forma mais rápida possível pego a água está é destilada normal tá coloco e dra já a tampa ali na hora de hidratar deixar data de estampar dinho voltou com
ele ou para o banho maria o fogareiro kaboul levantou a fervura que tinha que levantar de acordo com a marca eu vou ver te isso em frasco mistério carol está super quente a hora que caí dentro do frasco de vidro vai matar todo mundo eu que não vou arriscar vai que tem um laquê no morro então é um cuidado plus que a gente toma então a esterilização os meios eles são muito sensíveis ao calor o hc foi aquecido demais ele acaba prejudicar a capacidade de edificação dele fica prejudicada existem alguns indicadores de ph alguns outros
sites que podem na temperatura muito alta inativar desestabilizar precipitar e aí no final da história quando eu estiver pronta uma bagunça do doido uma sopa de legumes mas não é meio de cultura tá então cuidado aí com o calor quando a gente fala de esterilização em calor úmido a gente fala de autoclave 121 graus 15 minutos cuidado 121 graus 15 minutos é uma convenção que pode ser contrariada dependendo do fabricante eu tenho um meio de cultura aqui que o próximo o ciclo de fertilização de recomendado é 118° por 30 minutos está escrito no rótulo e
não é um meio de cultura diferente ozu não é um meio de cultura não sei se é da mesma marca mas que vocês podem ter no laboratório de vocês é bem comum tão verifiquem eu não eu não tô falando qual que é que é pra vocês ficarem instigados a entrar no laboratório olhar o rótulo por rótulos estão fazendo tudo certinho é proposital não vou contar com o que só estou dizendo que é um médico que vocês têm talvez a marca que vocês usem se essa convenção mas tem uma marca de um meio de cultura comum
que é diferente nunca estou lembrando tem uns outros aí também mas esse porque é muito comum eo monitoramento é a gente tem que saber se a nossa autoclave está funcionando direitinho da prova o manômetro tem que ser calibrada tem que ser equilibrado até o termômetro deve equilibrar tentem ser equilibrado mas com que eu sei no caso livro uma vez por ano uma vez a cada seis meses quando o que eu sei que isso não está desandando nesse meio tempo eu uso os indicadores químico e biológico e aí eu estava me estabeleci dentro do meio da
minha rotina como vou fazer isso para saber se a temperatura está sendo atingida se o calor está a distribuir adianta botar um indicador biológico só da autoclave só tocava desse tamanho você vai botar um indicador não pessoal é melhor colocar fazer menos vezes com menos freqüência mas colocar pra economizar é colocar em vários pontos do topo se por 10 não tá só vale pra ver se o calor tá circulando de forma homogênea tá a estocagem de meio de cultura carol eu preparo meio de cultura uma vez por mês é legal particularmente eu prefiro preparar medida
que eu vou precisando mas se a sua rotina pede isso beleza só tome cuidado como está estocando eles falam em até três meses na geladeira e um mês à temperatura ambiente as referências o compendium fala disso na geladeira a gente tem que tomar cuidado esse que acontece gelatinas e fez a gelatina e botou na geladeira que vai acontecer com ela no passar dos dias o que conta é começa a acontecer e começa a brincar porque ela desidrata ela resseca uma escultura mesma coisa então se você vai armazenar na geladeira fecha bem tá de preferência cobre
a tampinha lhe com um papel alumínio ou papel kraft alguma coisa para você evitar qualquer chance de perder humidade e na temperatura ambiente um mesmo à temperatura ambiente controlada é pessoal de 20 a 25 graus aí então é bacana e o meio suplementado por exemplo quem faz a análise de estafilococos populares positiva trabalha com o meio chamado pode ser que trabalhe com um homem chamado arga aguiar bairro de parque no bpp para os íntimos é só ele não no momento em que você vai usar você suplemento ele com duas coisas ou jovem suplementar depende da
marca mas a emoção de gema de ovo e teoria de potássio e aí não faça um careta tem que fazer e aí o que acontece isso você tem que fazer na hora de usar só então não dá pra armazenar tá mas depois que eu coloco na plaquinha porque a análise de estafilococos é semeadura de superfície então eu preparo as placas para utilizar né e na hora depois coloco no placar e no máximo uma semana muito bem baladinha em filme plástico a pra evitar pedro magina ele tem um pouquinho a placa tem uma dançadinha ali vai
perder humidade muito mais rápido a gente tem que tomar cuidado preparei um litro e meio de cultura divide em quatro frascos só que hoje eu vou eu aproveitei para preparar um livro todo mas hoje na verdade tem pouca mostra vou usar um só vou guardar esses aqui eu posso preparar a tirada autoclave manter líquido né e o efeito no banho maria aí já falo da temperatura do banho maria e os outros três eu guardei só vou usar amanhã como eles vão estar amanhã eles vão dar líquidos que eu preciso fazer refugir porque eles vão ficar
sólido de novo do que eu vou refundir cuidado pessoal se é que não podia supor a que se imagina aqui então cuidado com isso aí a gente a comenda preparo para o uso fusão a ió tem que ser mantido mais ou menos 46 graus é essa aqui é a temperatura que o compendium recomenda a outra também mas que eu tô lembrando agora o compêndio recomenda já experimentaram deixar o meio no banho-maria 46 graus até você usar o que acontece com ele começa a dar o mínimo começa solidificar porque tem muito meio que requer uma temperatura
mais alta para se manter sólido e líquido qual é a dica que eu dou pra vocês aqui há 48 46 até 48 que que a gente costuma falar pro pessoal gente deixa no banho-maria 48 até 50 mas cuida para que na hora que você for adicional meio na placa sob a mostra inclusive sobre a mostra mostra embaixo você tira leva para o fluxo espera um pouquinho porque daí nesse período ele já perde um pouco de calor tá e aí quando você ver tv na quarta que vai conseguir pegar na mão vai queimar só não aquele
truque todo que a gente usa você vai e já vai ter esfriado então não vai tal bichinho que eu tô querendo pesquisar já vai ter chegado nessa temperatura ideal aqui você pode manter mais quentinho no máximo 50 mais que isso desestabilize ali os constituintes bioquímico está mas na hora de inverter na placa a conta no fluxo fechadinho tá espera um pouquinho pra ele chegar naquela temperatura de uma maneira de criança que se consegue pegar essa suplementação também quando eu vou adicionar a gema de ovo terrorista ou qualquer outro é suplemento que eu tenho adicional tem
que funcionar ele mais frio 46 e distribuição em placas mais ou menos regra geral de 15 a 20 mm disse petta não é no olho é que dá mais ou menos uns dois milímetros aí além de descer prejuízo econômico quando a pessoa está a placa de sp bonito mas enche a placa de tamanho além de prejuízo econômica que ele pode muitas vezes como tem alguns componentes que são tóxicos podem ser tóxicos muitas vezes aquela concentração excessiva ocupar o espaço todo mundo ano da placa não dando é um sobrando espaço pra oxigênio enfim vai ser prejudicial
não essa quantidade é importante está a eu esqueci de falar aqui em cima que os meios de cultura sensíveis ao calor vocês são sensíveis ao calor e e esqueci de falar da quando você realiza por filtração existem alguns isso é multiplicado para o suplemento terror itu a tartárico esses suplementos você não esteriliza apesar de você usar eles uma quantidade muito pequena no meio de cultura e aí e ser um sal por exemplo esses dois exemplos que eu dei um tipo qualquer um risco de ter uma carga microbiana é pequeno mas você pode e deveria esterilizar
por filtração tá então tem uma membrana linha filtrante tem um uma bombinha de vácuo e aí você esteriliza para o frasco inteiro passa aqui vira lá em cima no no copinho de chamas a marca comercial esteve top mas é um funil de infiltração personalização e aí tem a membrana específicos e passa recolhe o filtrado na num frasco estéreo e está pronto tá é legal isso é complicado mas é legal de fazer às vezes pra gente aqui no laboratório br quality não é porque a nossa rotina mas eu sei que na indústria às vezes é mais
difícil mas é importante então voltando e os controles importantes né o controle da eficiência de esterilização nós temos indica indicadores químicos e os indicadores biológicos que tem exemplo de duas marcas comerciais têm também como funciona isso é que aqui dentro de uma cultura está desportos e aí quando você submete isso é que a coloque dentro da autoclave e depois retira tem que em cuba porque pra dar tempo sim o esporo não tivesse sido eliminado ele vai voltar e aí ele vai alterar a cor desse dessa cultura linha que está aqui então se eu depois a
incubação o meu controle biológico alterar a cor ruim pra mim eu ruim se não alterar a opa tem certeza que quem estava ali dentro já fui subir no telhado e outro contra o importante a maioria do pessoal não faz porque acha que vai ficar muito caro de verdade não vaiou porque acho que vai gastar muito tempo de verdade não vai todos os dias quando você estiver analisando principalmente referente ao lote que você produziu de meio de cultura você deveria é incubar uma placa só como a escultura uma placa onde sol diluente vai junto com o
meio de cultura para você descobrir o que se no material que você tem certeza que está histérico está sendo utilizado para fazer crescer ou selecionar quem você quer que cresci ali está bacana está funcionando então quando você pega uma placa de meio de cultura estéreo sem inóculo sem a mostra e em cuba se crescer alguma coisa de onde que veio pessoal do próprio meio de cultura ou da placa ou de algum lugar e aí o que faz nesses casos refazer real mostrar eu já vi uma pessoa me conta uma vez que ela fazia se ensina
placa controle cresceu uma colônia nas outras todas ela desconta um não pode pessoal não existe isso é tipo muito querer ser feliz com pouca razão a não viola então ali tem um indicativo é um indicativo qualitativo as coisas não estão bem então eu repito repito e vou ver o que está dando errado porque a conta ficar repetindo repetindo repetindo resolver o problema vai investigar né o povo é o chapeuzinho de sherlock holmes pegar mello pinho vocação no laboratório que está acontecendo de errado ele de qualquer lugar às vezes pode acontecer de ser no momento da
manipulação que a gente tem hábito de fazer quando a gente faz essa placa controle que a gente acaba fazendo deixa para o final o que sobrar de e mail no fra assombrou meio hoje vou fazer placa controle não é a gente faz isso e aí tipo não é não tá representando a sua condição do momento de análise ele então isso é importante a gente fazer
