o Olá seja muito bem-vindo ao universo da biologia molecular eu sou do educação E hoje nós vamos falar sobre enzimas de restrição Você sabe o que é uma enzima de restrição Você sabe como ela funciona e esse marcado aí você sabe tá pensando que enzimas de restrição está no passado no vídeo de hoje você vai saber o que é como ela funciona e como ela está sendo utilizada atualmente inclusive com sequenciamento de Nova Geração eu vou rodar dentro enquanto Rodovia se você ainda não for inscrito no canal não se esquece se inscrever Depois deixa um
comentário para mim que eu quero saber o que você achou desse vídeo beleza receber já já E aí [Música] o envio de restrição tem uma ferramenta da biologia molecular que é utilizada há muito tempo já várias décadas e o que é uma enzima de restrição que são as enzimas de restrição Essas são nucleases são portanto enzimas que cortam as no Play Books principalmente é uma nuclease e corta DNA dupla fita em lugares específicos Esse é o grande lance da enzima de restrição é uma nuclease mas não é uma graça qualquer porque fragmentar DNA e RNA
que no caso o DNA dupla fita convencional por várias enzimas que fazem isso mas essa aqui tem algo especial que ela vai cortar em lugares específicos chamados sítios de restrição esse sítios de restrição são necessariamente sequências palíndromos e o que são sequências ou palavras falem dromica são aquelas sequência ou palavras que podem ser lidas de ambos os lados Em ambos os sentidos um exemplo dá uma olhada aqui embaixo palavra radar a palavra radar só você ler no sentido convencional É da esquerda para direita você vai ler a dar só que no outro sentido da direita
para esquerda você também vai ler a palavra radar assim acontece também com frases inteiras como essa frase aqui anotaram a data da maratona nem daqui para cá anotaram a data da maratona da direita para a esquerda também anotaram a data da maratona você consegue ler essas palavras Em ambos os sentidos e no Genoma espalhada aí no Genoma dos organismos existem regiões que são palindromicas também tem consequências para hidrômetros com essa daqui por exemplo gat3 e você nem de um lado aqui gat6 ou se ele não não é não é mas não se esqueça Nós não
fomos de DNA dupla fita é a outra fita que você consegue ler no outro sentido g h t t c a t t c e as enzimas de restrição e elas cortam regiões sequências que são palindromicas que podem ser lida tanto em um sentido como no outro como exemplo que existem várias regiões dessa maneira com várias sequências específicas essa aqui é só um exemplo delas dá uma olhada nessa outra que que é uma sequência palindromica real muito utilizado de uma enzima de restrição muito conhecida muito famosa na biomol que a enzima até a capacidade de
cortar o fragmento de DNA dupla fita justamente quando ela encontra esse sítio de restrição com essa sequência que é hoje a att sempre que a segurança utilizei lá no meu exemplo quando a enzima de restrição encontra esse sítio ela vai fazer um corte uma região muito específica ela vai cortar dessa maneira aqui o frio em DNA e aos fragmentar as duas fitas remanescentes serão só sequência que essas extremidades que aqui no caso são chamadas de extremidades coesivos né que tem um pedaço Extra que tem cima de restrição que faz o corte cego né Ela poderia
que não é se verticalmente outros Ela poderia fazer um corte aqui justamente no no G e aqui no GC item extremidade Saga essa particulamente faz esse tipo de corte eu tô mostrando aqui para vocês girando extremidades coesivas e essa enzima de restrição aqui ela foi a primeira enzima de restrição identificada na école de uma Cepa chamada ry 13 por que que eu tô falando para você que tem a ver com informação porque a nomenclatura da enzima de restrição utiliza essas informações que eu acabei de mostrar aqui para vocês que está grifado aqui em cor diferente
essa enzima de restrição por exemplo ela é chamada de eco R1 A nomenclatura utilizada para identificar eco então que vende cole R porque vem dessa Cepa específica da Nicole e um porque dentre as enzimas de restrição descobertas a partir da école essa quem foi a primeira máximo sugestão são enzimas que vende micro-organismos e bactérias e essa aqui no caso de Cole na cepa ry3 de todas foi a primeira resiste à água ar3 existem outros em cima de restrição também provenientes da école que foram descobertas foram identificadas depois é que eu tô mostrando outros exemplos de
sítio de ração em cima gestão existe uma cacetada esse aqui é só algumas alguns exemplos mesmo mas existe um monte aí com as suas nomenclaturas específicas e e onde acontece o corte você vai ver que a discriminação do sítio de restrição é da dessa maneira como por exemplo é assim mesmo tem que faz um corte cego né diferente da que eu mostrei ela faz o corte exatamente aqui né você a TG anos ter o corte e a outra fita complementar seria um c a t g e como são utilizadas as enzimas de restrição bom Elas
já foram muito mais utilizados hoje existem outras técnicas que substituíram as enzimas de restrição Mas até hoje ela é bastante utilizada principalmente em clonagem ela é muito para fazer com laje Principalmente quando você pensa naquelas extremidades coesivas Isso facilita muito o processo de inserção do alvo no plasmídeo por exemplo é utilizado em uma técnica chamada pcr-rflp o PCR em seguida de uma restrição acontece que alguns produtos de PCR depois de digeridos por enzimas de restrição específicas podem ou não gerar fragmentos em privada de fato e isso a fragmentação ou não do fragmento pode estar associado
a uma característica de interesse isso é utilizado como um marcador molecular mas hoje em dia até hoje em dia está sendo utilizado uma aplicação específica lá no sequenciamento de Nova Geração te conhecido como Dinho Type 1 by sequência ou simplesmente GPS GPS lá dentro de MGS da técnica de sequenciamento Nova Geração tem duas vertentes uma delas é o sequenciamento direcionado que não tem nada a ver com isso que eu tô mostrando mais uma outra que é muito interessante para em organismos que ainda não tem o seu Genoma completamente sequenciado muito bem caracterizado que ia fazer
a digestão do Genoma inteiro com uma duas três enzimas de restrição e o perfil de restrição se associado a características de interesse e se algo econômico etc então é uma maneira de fazer genotipagem-por-sequenciamento nova geração ainda que o organismo sequenciado não tem um gênio muito bem caracterizado eu sou Eduardo caçando universo da biologia molecular Eu espero que você tenha gostado desse conteúdo se você gostou compartilha com alguém que possa interessar por ele beleza a gente se vê no próximo vídeo tchau tchau tchau
