Ontogenia y activación de linfocitos B

Hola Espero que estén muy bien en este encuentro Les propongo que continuemos trabajando sobre la respuesta inmunitaria adaptativa en este caso vamos a analizar y desarrollar los procesos relacionados con la ontogenia la activación y los mecanismos efectores de los linfocitos B los objetivos alcanzar en este caso tienen que ver con analizar los procesos de selección y maduración que ocurren en la médula ósea donde los linfocitos ven pasan por etapas específicas y son evaluados por su capacidad para reconocer antígenos propios la eliminación de clones auto reactivos su migración para completar la maduración en órganos linfoides secundarios

y cómo se diferencian en las poblaciones del linfocitos B de la zona marginal y los linfocitos de foliculares también vamos a tratar de describir los eventos que conducen a la activación de los linfocitos de foliculares la participación de los linfocitos t helpers y la participación de las células dendríticas en la activación la formación del centro germinal Cómo se estructura donde el Linfocito B experimenta los fenómenos de permutación somática el cambio de isotipo y la diferenciación al linfocitos de memoria y células plasmáticas efectoras y de vida media larga finalmente vamos a definir las características distintivas en

el origen mecanismos de activación estímulos y funciones de los linfocitos B1 y los linfocitos b2 los linfocitos beforiculares los linfocitos de la zona marginal Hagamos una breve referencia de algunos temas que ya han sido tratados pero para poder volver a ubicarnos sí a partir de una stencil una célula madre todo tipotencial Sí es que se generan los precursores multipotenciales que den origen a las series de precursores de megacariocitos y eritroides y los precursores de granulocitos y monocitos y los precursores multipotenciales predispuestos al linaje B es a partir de estos precursores que obtenemos el precursor linfoide

común que nos permite por un lado definir aquellas células que de manera muy temprana migran de la médula ósea hacia el timo para dar origen al todo el linaje del linfocitos t que ya hemos estudiado y en la propia médula ósea estos precursores linfoides comunes son los que van a dar origen a los linfocitos B a través de la expresión diferencial de el marcador Lee 6d y a los linfocitos del o las células linfoides de la inmunidad innata estas células linfoides la inmunidad innata incluyen a las células nk y a un linaje de al menos

3 tipo celulares distinguibles en función de su patrón de expresión de citoquinas las células linfoides la inmunidad innata de tipo 1 de tipo 2 y de tipo 3 que expresan y secretan interferón gama interloquina 5 interloquina 13 interloquina 22 en telequina 17 respectivamente recordemos que la estructura del receptor de los linfocitos B está constituida por dos cadenas livianas y dos cadenas pesadas unidas por puentes disulfuro ambas cadenas livianas son de la misma identidad y ambas cadenas pesadas también son de la misma identidad y que el loki genético presente en el cromoso 22 para la cadena

lambda en el cromosoma 2 para la carrera capa y el cromosoma 14 para la cadena pesada está definido por la presencia de genes variable de Unión y constante o variable de diversidad de Unión y constante en el caso de la cadena de la cadena pesada y que la construcción de estos receptores para el Linfocito B es el resultado de los procesos de recombinación génica somática que ocurre sobre los genes que codifican para la cadena pesada bdj y los genes que codifican para la cadena liviana bj en ambos casos la región que constituye la región variable

de los genes de la cadena pesada y de la cadena liviana además de la inmunoglobulina de superficie el bcr está conformado por un dímelo que constituye un módulo de señalización y ge alfa ig beta también conocida como cd79 a través de estos dominios de activación dependientes de tirosina constituyen parte de la respuesta de señalización cuando el receptor se activa por otro lado el Linfocito B presenta moléculas co receptoras como el cr2 CD 21 que reconoce fragmentos activados del complemento y el cd19 y también con receptores de tipo inhibitorios como el cd22 la activación del bcr

provoca la señalización que involucra Cascadas de quinasas como la tirosinkinasa de bruton Peter esquinasa pkb activando Cascadas de maquinasas activando el factor nuclear de activación de linfocitos t y foxxo 1 Mientras que el reconocimiento de estructuras propias principalmente glicoproteínas en la superficie de células conduce a la activación del cd 22 el reclutamiento de proteínas fosfatasas que van a de fosforilar las cascadas generadas por la activación del Linfocito B haciendo una primer evaluación global de el proceso ontogénico de diferenciación de los linfocitos B desde los estadios más tempranos Asia las células efectoras podemos observar una serie

de etapas con algunas características distintivas en función de el sitio donde ocurre el proceso de diferenciación en función de la dependencia o no dependencia de antígenos para el desarrollo de estos procesos y distintos eventos que van ocurriendo en las transiciones entre los distintos tipos de células analicemos entonces con un poco más de profundidad algunos de estos eventos que van ocurriendo durante la transición y la diferenciación de los linfocitos B el desarrollo de los linfocitos B comienza cuando stemsell presentes en el Nicho del endostio o stemsell presentes en el Nicho perivascular son desarrestadas para diferenciarse a

progenitores multipotenciales progenitores multipotenciales que se predisponen al hijo de linfoide y la expresión específica del factor pack cinco este factor Define el linaje del linfocitos B permitiendo la diferenciación en los estadios provee prevé y Linfocito B inmaduro en estrecha relación con las células del estroma de la médula ósea como podemos observar en la imagen de la izquierda digamos las células del estroma están en una relación directa con estos estadíos precursores de linfocitos B que se están diferenciando en el vídeo que podemos observar todo lo que vemos en rojo son células que están expresando la quimioquina

cxl-12 mientras que todo lo que vemos en verde son células que están expresando rac1 la recombinasa que permite la recombinación de las cadenas sí fíjense como en el estadio provee los linfocitos que se están diferenciados Están manteniendo una Unión estrecha con las células seguramente células reticulares presentes en el estroma de la médula ósea mientras que en los estadios prevé como veremos más adelante hay un poco más de si bien hay relación con las células del estroma hay un poco más de movilidad es un poco más libre esta relación veamos un poco más en detalle qué

es lo que está ocurriendo en cada uno de estos estadios en relación con los eventos más importantes que definen estas transiciones entre los distintos estadios del Linfocito B teníamos una célula del estroma que se encuentra en estrecha relación con las stemsell a través de moléculas de adhesión belia 4 beca 1 y que como consecuencia de la progresión a los distintos estadios multipotenciales va a modificar la expresión de alguna de sus moléculas de adhesión la expresión del kit le va a permitir unirse al factor stencil Y definir los primeros eventos de El linaje de Linfocito B

lo que definimos como estadio provee temprano en donde vamos a encontrar los primeros eventos de recombinación de la cadena pesada en este caso los segmentos Dj van a comenzar a recombinarse en este estadio probé donde ya tenemos recombinada parte de la cadena Perdón parte de la región variable de la cadena pesada lo que vamos a encontrar es la expresión diferencial del receptor paleotilluquina 7 una citoquina definitoria en lo que va a ocurrir de acá en adelante dado que la célula del estroma responsables de la liberación de este factor de crecimiento va a permitir que entonces

como consecuencia de la señalización sobre el perceptor ocurra la recombinación del Gen B para poder conformar el primer evento de recombinación completa de la cadena pesada la célula ahora reconocida como Linfocito breve va a expresar en su superficie la cadena pesada recién recombinada y una cadena llamada cadena subrogante constituida por una estructura de dos proteínas que asimilan la estructura de lo que sería la cadena liviana este perceptor B lo que permite es generar o no señales el interior de la célula para permitir o no la progresión hacia los diferentes estadios las interacciones que se dan

entre la cadena subrogante de cada uno de los receptores en la superficie de este Linfocito prevé es decir la posibilidad entre movimiento que se da entre estas cadenas son las señales que permiten entonces que este Linfocito prevé continúe su proceso ontogénico por un lado generando exclusión alélica es decir suprimiendo los reordenamientos posibles que se pueden dar en el otro alelo de la cadena pesada para evitar que se puedan conformar nuevos receptores con diferentes especificidades por el otro lado también va a haber pulsos de proliferación para aumentar la frecuencia de este Clon que está prosiguiendo y

finalmente lo que se va a dar son las señales Para volver a expresar las recombinazas que van a permitir ahora en este caso la recomendación de la cadena liviana en sus genes bj primero la cadena liviana capa y en tal caso si fuera necesario la cadena lambda la expresión hará en superficie de un bcr constituido por la cadena pesada y la cadena liviana capa Holanda va a constituir el bcr Y definir a este Linfocito como Linfocito B inmaduro la identidad de este bcr es igm dado que la el el Gen mu este constante es el

primer Gen que aparece luego de los genes que conforman la región variable como consecuencia de que los procesos de recombinación tanto de las cadenas de las genes de la cadena perdón de los genes que constituyen la región variable de la cadena pesada como de los genes que constituyen la región variable de la cadena liviana son al azar e inclusive la presencia de la actividad de la enzima tdt aumenta la variabilidad y diversidad de receptores que se generan podíamos reconocer tres posibilidades de receptores presentes en estos linfocitos B inmaduros por un lado un bcr que no

sea reactivo es decir un bcr que no reconozca antígenos un bcr que reconozca antígenos de forma polivalente o un bcr que reconozca que reconozca antígenos pero en forma monovalente es fundamental que en este momento la médula ósea no permita o limite la salida de estos linfocitos a circulación dado que aquellos linfocitos que contengan bcrs auto reactivos podrían desencadenar En consecuencia reacciones autoinmunes Cuáles son los mecanismos que permiten establecer el control para poder limitar esta autoreactividad aquellos linfocitos que no demuestran reactividad a través de su bcr son los que van a ser seleccionados de manera positiva

y van a constituir los linfocitos B inmaduros que van a abandonar la médula ósea aquellos linfocitos B que definan un bcr que tiene la capacidad de poder reconocer antígenos de manera polivalente es decir que en la superficie los bcr van a entrecruzar esta señalización y en consecuencia van a generar estímulos de activación tendrán Dos caminos posibles un camino es directamente la apoptosis es decir la de lesión clonal de estos clones autorreactivos la otra es expresar entre comillas rápidamente La las enzimas recombinasas para hacer una edición del bcr es decir si la Por ejemplo si el

Gen variable auto reactivo era este que estamos observando en color naranja la edición del receptor lo que va a permitir es cambiarlo por otro Gen variable Y eso va a permitir que este Linfocito con este nuevo bcr editado pueda volver a ser este desafiado Ahí es donde si la edición del receptor fue adecuada el Linfocito B inmaduro que ahora muestra la reactividad podrá ser seleccionado de manera positiva si esta edición sigue siendo una edición no adecuada Entonces el Linfocito B puede volver a estadios prevé o puede directamente ser eliminado nuevamente por apoptosis sí la edición

del receptor se establece sobre las cadenas livianas y lo que permite es si el receptor había elegido en primera instancia digamos no lo había elegido sino que la cadena capa es la primera elección en el proceso de recombinación poder trabajar con las cadenas lambda para poder así tratar de rescatarse de la apoptosis en el caso de aquellos linfocitos cuyo bcr muestran reactividad pero no reactividad antígenos polivalentes es decir reactividad pero no se encuentran fuertes señalización por entrecruzamiento estos linfocitos entran en lo que denominamos un estado de alergia Es decir logran sobrevivir a la selección pero

posiblemente cuando sean exportados hacia la periferia pierden la capacidad de poder sobrevivir datos que las señales de supervivencia que van a tener que recibir a nivel periférico no van a ser suficientes y finalmente estos linfocitos enérgicos terminarán siendo eliminados a nivel periférico los linfocitos B inmaduros son los que abandonan la médula ósea para dirigirse hacia los órganos linfoides secundarios en los órganos linfoides secundarios principalmente en el vaso es donde ocurren la maduración final de estas células pasando por estadios definidos como estadios transicionales en donde son nuevamente seleccionados para limitar la autoreactividad que aún este puede

ser puesta en evidencia Y en donde vamos a observar la expresión no solo en superficie de igm sino también de igd como consecuencia de fenómenos de splice sin alternativo que se pueden dar a nivel de los genes constantes que codifican la cadena pesada la selección a través del reconocimiento de antígenos propios en el vaso en presencia de un factor de sobrevida del linfocitos B el factor baf determina los eventos que permiten la progresión o la eliminación de estos linfocitos en estadios transicionales de forma tal que finalmente vamos a poder reconocer dos linajes definidos de linfocitos

los linfocitos de la zona marginal caracterizados por una expresión en superficie alta de igm y baja de igd que se van a ubicar específicamente en la zona marginal del bazo y también en el caso del humano en los senos subcapsulares presentes en el ganglio y la segundo el segundo linaje o estirpe celular van a ser los linfocitos B foliculares en este caso caracterizados por alta expresión de igg en superficie baja y gm y que se van a van a migrar y localizarse en los folículos primarios presentes tanto en el vaso como en el ganglio a

partir del hígado fetal o inclusive en la médula ósea hay un linaje de linfocitos B caracterizado por la presencia de un marcador el CD 5 en evidencia en ratones en el caso de Humanos A través de la expresión diferencial del cd 27 del cd20 y CD 43 como un linaje de linfocitos con capacidad de auto renovación que se ubican específicamente en las cavidades cerosas sobre todo en peritoneo y que no necesitan de estímulos para la secreción de anticuerpos principalmente de tipo igm que constituyen lo que denominamos anticuerpos naturales este linaje de linfocitos este originados de

hígado fetal médula ósea y que tiene esta capacidad de poder Auto perpetuarse Son los que se reconocen como linfocitos B1 y que forman parte de una línea de linfocitos con una respuesta muy muy relacionada con los procesos innatos Hagamos una primera recapitulación de lo que hemos visto a través de algunas ideas claves los linfocitos se desarrollan a partir de un precursor común mieloide linfoide que da origen a las células precursoras de los linfocitos t a un precursor linfoide común a partir del cual se le generan los ligas que correspondientes a los linfocitos B a las

células dendríticas y a las células linfoides innatas los precursores linfoides que permanecen en la médula ósea se van diferenciando a través de distintos estadios intermedios provee breve grande breve pequeño antes de dar lugar a los linfocitos by maduros que abandonan la médula ósea para completar su maduración en órganos linfoides secundarios entre el estadio provee y prevé ocurren los reordenamientos bdj de los genes que codifican para la región variable de la cadena pesada con la expresión temprana de un breve CR Y luego el reordenamiento de los genes bj de las cadenas livianas capa Holanda para dar

origen a los linfocitos de inmaduros que presentan igm de superficie como receptor de Linfocito B los linfocitos inmaduros pasan por procesos de selección en la médula ósea aquellos que generan un bcr que reacciona fuertemente contra antígenos propios son eliminados de lesión clonal o realizan edición del rcr haciendo nuevos reordenamientos del Gen B de la cadena liviana aquellos que generan receptores funcionales y no reactivos contra antígenos propios sobreviven y continúan su desarrollo en los órganos linfoides secundarios la maduración final de los linfocitos B que ocurre en los órganos linfoides secundarios e implica nuevos procesos de selección

sobre los estadios transicionales y la participación de buff una citoquina esencial para la supervivencia y maduración de las células la expresión diferencial de igm e igd en superficie Define a los linfocitos de foliculares y los linfocitos B de la zona marginal como la célula finales del proceso ontogénico de los linfocitos B los linfocitos B1 son una subpoblación de linfocitos B que se distinguen de los foliculares y los linfocitos de la zona marginal por sus características únicas en términos de desarrollo superficie celular y función se originan en una etapa temprana del desarrollo linfocítico principalmente de células

precursoras de hígado fetal y expresan marcadores de superficie celulares específicos se de 20 se de 27 se de 43 en humanos analicemos entonces Cuáles son los eventos que conducen a la activación y los mecanismos efectores de los linfocitos B tomamos como ejemplo un ganglio para poder desarrollar nuestro análisis los linfocitos tele linfocitos B son reclutados a nivel de las vénulas del endotelio alto como consecuencia de la expresión específica de moléculas de adhesión y la presencia de quimioquinas como la ccl-19 ccl 21 permitiendo entonces que en esta región específica del ganglio se produzca el reclutamiento del

linfocitos B como vemos acá en verde y del linfocitos t como vemos acá en color celeste los linfocitos B van a migrar hacia el folículo primario como consecuencia de la expresión del receptor cxr5 que reconoce la quimioquina cxlrece producido por las células dentríticas foliculares y las células reticulares ahí los linfocitos B van a permanecer un tiempo definido digamos de alguna manera migrando en forma continua entre las distintas regiones del folículo primario al mismo tiempo los linfocitos t también van a permanecer un tiempo discreto en las regiones t pudiendo establecer contacto como observamos digamos en este

vídeo con células dendríticas presentes en la región t la pérdida de los receptores CX entre 5 en los linfocitos B a nivel del folículo y la expresión al mismo tiempo de un receptor que reconoce un factor quimio táctico producido este por el endotelio vascular la espigocina uno fosfato es determinante para que los linfocitos b y los linfocitos t abandonen el ganglio pasen nuevamente a circulación y continúen su proceso migratorio a través de los distintos órganos linfoides secundarios en este esquema representamos siete etapas definidas del proyecto de activación de los linfocitos B foliculares Les propongo que

entonces analicemos en forma específica qué es lo que ocurre en cada una de estas etapas para entender finalmente qué es lo que ocurre cuando un Linfocito B se activa la primera etapa del proceso de activación del Linfocito B es casualmente la captura de antígenos de diferentes formas los linfocitos B pueden activarse reconociendo directamente antígenos solubles o inclusive fragmentos proteolizados pero también pueden activarse como consecuencia de la interacción que ocurre entre células como los macrófagos subcapsulares que tienen la capacidad de poder ofrecer antígenos desde su superficie o inclusive de las propias células dentríticas migrantes o células

dendríticas presentes en la zona del folículo recordemos como decíamos en diapositivas anterior que los linfocitos B foliculares vírgenes se encuentran en forma transiente en el folículo migrando desde las zonas periféricas hacia el interior del folítico del folículo En búsqueda potencial de ese antígeno que lo va a activar como vemos en este vídeo de la izquierda complejos o inmuno complejos representados acá en color rojo pueden ser capturados por macrófagos macrófagos que no los fagocitan sino que los mantienen en la superficie celular y logran emitir prolongaciones para poder entrar en contacto con los linfocitos B a nivel

del límite del folículo observamos en este vídeo a los linfocitos B en color celeste y a los macrófagos con digamos cargados con todos estos inmunos complejos Y entonces podemos ver podemos observar este como los linfocitos B van movilizando similidándose tratando de poder establecer contacto con los macrófagos para entonces poder capturar antígenos y así activarse como consecuencia de la Unión de un antígeno pcr a través de cualquiera de estos sistemas el Linfocito B activado entra en un programa de procesamiento antigénico y conformación de la capacidad de presentar antígenos esto lo va a desarrollar a través de

las moléculas de clase 2 en presencia de moléculas coestimuladoras sí migrando hacia las zonas periféricas de ese folículo en donde va a buscar como veremos a continuación la colaboración con linfocitos T la tapa 2 y 3 hace referencia por un lado a la activación de los linfocitos helpers vírgenes presentes en las zonas t del ganglio y a la interacción que se va a establecer entre esos linfocitos helper activados y las células y los linfocitos B activados las células dendríticas migrantes de las regiones donde han sido activadas portando ya los antígenos procesados para ser presentados a

través de las moléculas de clase 2 en presencia de moléculas coestimuladoras o los propios antígenos solubles o particulados que puedan acceder a través del linfático a las zonas t van a permitir que los linfocitos tcd 4 vírgenes puedan interaccionar y reconocer esos epitopes presentados como a través de las moléculas de clase 2 y de moléculas coestimuladoras como el cd80 86 presentes en las células dendrítica el C de 28 presente en el Linfocito T y cam 1 y lfa1 de esta manera como observamos digamos en este video las células dendríticas en color verde y los linfocitos

helpers en rojo [Música] la interacción la primera interacción conduce a la proliferación de de estos linfocitos y la generación de un programa de diferenciación en presencia de interloquina 21 hacia lo que vamos a definir como un perfil Linfocito T gelper folicular Linfocito teja el perforicular expresa en su superficie el receptor cxcr-5 un sector muy importante para poder entender que este Linfocito va a permanecer en el ganglio e inclusive va a migrar hacia las zonas periféricas hacia el borde del folículo como consecuencia de la atracción quimiotáctica que la quimioquina cxl-rense producida por las células dentríticas foliculares

ejerce en el borde del folículo los linfocitos helper foliculares activados van a reconocer los antígenos presentados por los linfocitos B que previamente habían sido activados por los mismos epitopes peptídicos De esta manera como observamos en este vídeo los linfocitos B en rojo y los linfocitos B en verde están interaccionando en una primer cobala colaboración que conduce a al menos dos eventos diferenciales por un lado estos linfocitos B activados van a diferenciarse hacia la formación de células plasmáticas debida media corta que secretan igm como anticuerpo principal por el otro lado hay una estirpe o mejor dicho

hay alguna de estas células activadas que van a permanecer en el folículo y van a constituir lo que podemos definir como linfocitos B dependientes del centro germinal el centro germinal es una estructura que se va conformando como consecuencia de la activación de estos linfocitos b y su migración hacia regiones del folículo en donde va a haber una concentración no solamente de células dendríticas foliculares sino también del Linfocito gelper foliculares que van a migrar digamos por acción quimiotáctica hacia esas regiones de tal manera que en la medida que el proceso va ocurriendo se van Estableciendo dentro

del folículo áreas de concentración de estos linfocitos activados en presencia de las células dendríticas foliculares linfocitos gelper foliculares y células también del estroma reticular de ese folículo la etapa 4 hace referencia a lo que está ocurriendo en este centro germinal como consecuencia de la concentración de estas linfocitos B dependientes del centro germinal se genera una zona rica en células con una alta actividad proliferativa células que definimos como centroblastos y que dan de alguna manera como resultado que reconozcamos a esta zona como la zona oscura presente en el centro germinal estos entroblastos además de proliferar están

experimentando un proceso denominado hipermutación somática la hiper mutación somática da como resultado la posibilidad que cada célula pueda generar nueva diversidad sobre la región variable de los receptores que previamente había conformado esta este fenómeno de hipermutación ocurre como consecuencia de la actividad de una enzima esta encima la citidina de esa amenaza inducida por activación que básicamente lo que hace es generar fenómenos de mutación puntual en las cadenas en las Perdón en las regiones variables de las cadenas que codifican para el bcr como consecuencia de la permutación somática digamos los centroplastos este van a poder expresar

nuevos receptores con diferente diversidad de tal manera que en un momento determinado de este fenómeno de proliferación y mutación hipersomática los estroblastos se van a movilizar hacia las zonas donde encontramos a mayor concentración de células dendríticas y linfocitos gelper foliculares Estas son las que denominamos son las claras Y en esas zonas claras es donde los linfocitos centroblastos que han experimentado esta permutación somática deberán ser nuevamente seleccionados para volver a este definir los las capacidades de reconocimiento y mejoramiento en la afinidad de esos receptores las células dendríticas foliculares son un linaje de células dendríticas especializados fíjense

que interesante la este la cantidad de prolongaciones que podemos observar en estas células dendríticas e inclusive a la derecha vemos digamos un poquito pequeño pero vemos la relación entre la célula dendrítica y todos los linfocitos en este caso los denominamos centroscitos que van a estar siendo seleccionados como consecuencia de estos fenómenos de permutación somática básicamente lo que hace un centrocito para poder ser seleccionado es reconocer en la superficie de estas células dentíticas foliculares antígenos complejos de anticuerpos con antígenos complejos del antígeno con complemento Y si esa célula a través de su nuevo receptor o este

receptor que ha experimentado estos fenómenos de permutación somática tiene la capacidad de poder entre comillas robarle si robarle estos antígenos a la célula dendrítica digamos ese fenómeno permite entonces que la célula dendrítica lo incorpore y pueda sobrevivir a la selección lo podemos observar digamos en en este vídeo en rojo las células dentríticas foliculares en verde a los linfocitos b y fíjense cómo se ve claramente que el Linfocito B Le Está sacando parte de su membrana sí lo cual le permite entonces a ese Linfocito B este completar el ciclo de sobrevida lo podemos observar también en

este video donde vemos las células dentíticas foliculares acá se ve mucho mejor las prolongaciones y vemos los linfocitos b y vamos a ver cómo estas células dendríticas foliculares que tienen digamos en estos puntos rojos los complejos digamos este de inmuno complejo de anticuerpos también los linfocitos B terminan extrayendo digamos los antígenos de la superficie Y de esa manera Entonces los aquellos linfocitos B que han logrado Mostrar buena afinidad por esos este antígenos lograron extraerlos son linfocitos B que van a sobrevivir mientras que aquellos que no han logrado esa capacidad terminan muriendo por apoptosis la sobrevida

que le da a ver logrado extraer los antígenos de las células dentíticas foliculares le permite a este centrocito nuevamente Ingresar a un modo de procesamiento antigénico para establecer una segunda colaboración con los linfocitos gelper foliculares En esta segunda colaboración nuevamente se ponen en relevancia No solamente la presentación a través de las moléculas de clase 2 para que pueda haber interacción con el tcr sino también la presencia de moléculas coestimuladoras como el cd40 el cd40 ligando ico icos ligando Sí y un perfil de citoquinas que el gel perforicular va a determinar y que va a definir

digamos nuevos eventos nuevos cambios en ese centro uno de los cambios uno de los primeros cambios que vamos a poder observar es de nuevo la actividad de esta enzima la citidina de saminasa inducida por activación en este caso para poder promover lo que conocemos como el cambio o el switch de isotipo es decir en la célula lo que va a volver a ocurrir es un proceso de recombinación génica nada más que en este caso no catalizado por las recombinazas rac1 y rack 2 responsables de las recombinaciones Durante los momentos ontogénicos sino recombinación catalizada por esta

enzima acompañada de otras enzimas dentro del proceso que básicamente lo que va a permitir Es que en la célula dependiendo de cuáles sean los perfiles de citoquinas que dominan ese ambiente se defina Cuál va a ser la región o el Gen constante que va a dar origen a las a los nuevos receptores que a futuro serán los anticuerpos es decir la recombinación podrá ser con las los genes constantes gama para las inmunoglobulina G con los genes constante Alfa para las inmunoglobulinas a con los genes constantes epsilon para las inmunoglobulinas el otro evento digamos sustancial una

vez ocurrido este Suite isotipo tiene que ver con los eventos finales y la diferenciación hacia las células efectoras de los linfocitos B Es decir hacia la formación de células plasmáticas productoras de anticuerpo y hacia la diferenciación hacia los perfiles de memoria si hacemos una recapitulación de los eventos principales que están ocurriendo en este centro germinal Lo que podemos decir es que en la zona oscura los eventos de proliferación e hiper mutación somática que logran aumentar la variabilidad de las regiones variables de esos receptores permite establecer eventos de selección de estos centros por parte de las

células dendríticas foliculares la capacidad de poder extraer los antígenos digamos ofrecidos por estas células permite que el Linfocito B vuelva a realizar una colaboración con el linfocitos t gel perforiculares y dar como consecuencia o digamos reciclaje nuevamente a la zona oscura para nuevos eventos de proliferación e y permutación somática o su diferenciación hacia las poblastos y linfocitos B de memoria no poder interactuar de manera eficiente con las células dentíticas foliculares conduce a la apoptosis de esos centros las células plasmáticas y los linfocitos B de memoria digamos van a migrar de este los sitios de los

centros germinales hacia los este hacia los lugares donde están ocurriendo los fenómenos de respuesta inmunitaria para poder desde ahí producir los anticuerpos este definidos de acuerdo a las respuestas que está imperante por otro lado un grupo de células plasmáticas que expresan el receptor cxr4 van a ser de alguna manera quimiotractadas hacia la médula ósea en donde van a ser nichos y permanecer Digamos como consecuencia de la expresión de la quimioquina cxl-12 generando digamos un Nicho de células plasmáticas de vida media larga que van a van a producir por anticuerpos en forma continua y son los

que definen el mantenimiento de nuestros anticuerpos en algunos casos de por vida aquellas digamos células plasmáticas que permanecen en los tejidos Digamos como consecuencia de la su actividad efectora in situ en un momento determinado pueden luego de la resolución de los del proceso inmunitario pueden morir por apoptosis hagamos algunas consideraciones respecto de el otro linaje obtenido a partir de los linfocitos B transicionales en el ganglio además de los linfocitos B foliculares que son los linfocitos de la zona marginal los linfocitos de la zona marginal se ubican en el Humano básicamente en lo que es la

zona marginal del vaso pero también se ubican en el seno subcapsular en los ganglios algo interesante respecto de los linfocitos B de la suman marginal Es que además de presentar receptores con mayor capacidad polivalente de reconocimiento también son células que presentan receptores de reconocimiento de patrones razón por la cual objetivamente puede ser activados por un número mayor de estímulos a diferencia de los linfocitos b foliculares e inclusive dado que pueden recibir más de un estímulo al mismo tiempo no todos los linfocitos de las este B de la zona marginal necesitan de una colaboración con los

linfocitos t para completar su proceso de diferenciación de esta manera son células muy interesantes para tener en cuenta para la presencia de ciertos antígenos como el son por ejemplo antígenos polisacáridos que pueden ser reconocidos por estas células y estas células al activarse van a poder diferenciarse directamente a plasmoblastos secretores de igm en general estos células plasmáticas suelen ser células plasmáticas de vida media corta también estos linfocitos de la zona marginal por su estratégica ubicación puede ser activados como consecuencia del ofrecimiento de este de antígenos no dependientes de la respuesta del linfocitos t como pueden ser

este antígenos ofrecidos por neutrófilos por células dendríticas inclusive por la presencia de macrófagos en la misma zona marginal también Es verdad que los linfocitos de la zona marginal pueden activarse en lo que denominamos antígenos t dependiente es decir aquellos antígenos que desencadenan respuestas asociados a los linfocitos t y ahí es donde estas linfocitos de la zona marginal también permiten que la respuesta no solamente se establezca en función de la diferenciación a células plasmáticas productoras de igm sino que también se ha visto que pueden haber procesos inclusive de hipermutación somática y de switch de isotipo los

linfocitos B de la zona marginal tienen la capacidad de poder migrar al folículo primario y en consecuencia derivar sin derivar antígenos a las células dendríticas foliculares que posteriormente podrán ser utilizados para la selección de linfocitos de foliculares por lo tanto es bastante interesante digamos este considerar a los linfocitos B de la zona marginal también como células muy importante en la respuesta este humoral frente a una variedad de antígenos si nosotros queremos hacer un análisis finalmente de cómo observamos digamos la respuesta efectora generada por estas células plasmáticas sean células plasmáticas derivadas de los linfocitos de la

zona marginal o células plasmáticas derivadas de los linfocitos este foliculares de vida media corte y de vida media larga el análisis que podemos hacer es que ante la exposición a un antígeno determinado en este caso al antígeno a va a producir una respuesta de anticuerpos en donde las células principales van a digamos productoras van a ser esas células plasmáticas de vida media corta y que ante una segunda exposición a ese mismo antígeno va a haber una respuesta de anticuerpos totales este mucho más importante del punto de vista cuantitativo e inclusive mucho más rápida cuando consideramos

los tiempos en donde se alcanzaron los máximos Sí ahí es donde vamos a poder poner en consideración la presencia del linfocitos B de memoria como consecuencia de la respuesta primaria que pueden diferenciarse a nuevas células plasmáticas de vida media corta y la actividad de las propias células plasmáticas de vida media largas que son las que mantienen ahora en esta respuesta secundaria los niveles de anticuerpo a niveles este [Música] mayores de lo que había ocurrido en la primera respuesta si sobre este perfil de anticuerpos totales nosotros hacemos una análisis más este específico en función de los

dos grandes isotipos que representan un poco la respuesta primaria y secundaria a nivel del plasma lo que podemos decir es que ante la primera exposición sí fíjense como debemos esperar aproximadamente una semana a unos 7 días para poder empezar a encontrar niveles de igm esto tiene que ver con esto que venimos este Charlando desde hace un rato piensen que para poder comenzar a producir anticuerpos los linfocitos B tienen que proliferar tienen que generar la interacción con los linfocitos de helper esos linfocitos de gelper foliculares también han tenido que ser activados también han tenido que proliferar

Y eso requiere tiempo fíjense como acá claramente Se observa que hay una digamos hay un tiempo entre que aparece la igm y comienzan a aparecer la igg esto tiene que ver principalmente con la participación del centro germinal en lograr que se establezcan los mecanismos adecuados adecuados para poder conformar el suite de isotipo en esas centrocitos y que digamos indudablemente la respuesta que prima como de mantenimiento en esta respuesta primaria es mantener los de igg no tanto los niveles de igm como que las células de memoria principales que se están conformando tienden a ser células Mejor

dicho no las células de memoria sino los plasmocitos de vida media larga que se mantienen tienden a ser más plasmocitos secretores de igg mientras que quizás los plasmocitos secretores de igm tienen de hacer plasmositos de vida media más corta por eso sí Aproximadamente a los 20 días 20 30 días seguimos manteniendo niveles de igg este cuantificables pero hemos perdido los niveles de igm piense como ante una segunda exposición sí aparecen nuevos respuestas igm este puede ser producto no solamente de la presencia de células de memoria este que secretan igm sino también de quizá nuevos epitopes

antigénicos que han sido reconocidos pero creo que lo más remarcable en esta respuesta secundaria es como la respuesta de anticuerpos de tipo igg se hace mucho más importante del punto de vista cuantitativo y además mucho más rápida respecto de la respuesta primaria claramente esto pone en evidencia lo que definíamos antes la presencia de linfocitos B de memoria que tiene una capacidad de respuesta muchísimo más rápida sí Para poder diferenciarse a células plasmáticas ya con perfiles de isotipos de tipo igg Les propongo entonces que ahora recapitulemos a través de algunas ideas claves de todo esto que

hemos charlado sobre la activación y mecanismos efectores de los linfocitos B la activación de los linfocitos B foliculares comienza cuando capturan antígenos en los folículos linfoides de los órganos linfáticos secundarios sea en forma directa o a través de macrófagos subcapsulares o células dendríticas portadoras de antígenos los linfocitos foliculares activados se marginalizan hacia el borde del folículo y presentan epitopes antigénicos a través del complejo mayor histocompatibilidad de clase 2 y la participación de moléculas coestimuladoras como el cd40 el cd40 ligando a los linfocitos t foliculares generados a su vez por activación y diferenciación de los linfocitos

helpers vírgenes por células dendríticas esta primer colaboración TV conduce a la proliferación clonal del linfocitos b y a su diferenciación a por lo menos tres subtipos celulares linfocitos B de memoria independientes del centro germinal células plasmáticas de vida media corta productoras y secretoras de igm y linfocitos B que se van a hacer dependientes del centro germinal estos linfocitos B dependientes del centro germinal se agrupan en estructuras denominadas centros germinales dentro de los folículos linfoides que incluyen a su vez a células dendríticas foliculares linfocitos t gel perfoliculares y células del estroma para experimentar procesos que aumenten

la diversidad y afinidad de sus receptores de anticuerpos en la zona oscura del centro germinal los entroblastos experimentan proliferación e hipermutación somática con el fin de generar variantes de mutaciones aleatorias en la región variable del bcr generando mayor diversidad de reconocimiento estos centroblastos ahora como centrositos migran hacia la zona Clara donde son sometidos a la selección por células dendríticas foliculares aquellos en trocitos que generan receptores de alta afinidad para el antígeno son seleccionados positivamente mientras que aquellos entrocitos que mantienen receptores autoreactivos o de baja afinidad son eliminados por apoptosis los entrocitos seleccionados vuelven a experimentar

una segunda colaboración con los linfocitos gelper foliculares que conduce a la reorganización de los segmentos génicos que codifica la región constante el FC de la cadena pesada esto lo denominamos cambio o switch de isotipo el cambio de isotipo es dependiente de la citoquina generadas por los linfocitos gelper foliculares que determinan Qué clase de anticuerpo es el que se va a producir y gg1 y gg2a y g2b y gg3 y gg4 y Georgia como resultado de las interacciones entre los entrocitos y las células dietéticas foliculares y los linfocitos de gelper foliculares se generan cuatro destinos principales

puede haber un reingreso a la zona oscura para reinicio de un nuevo ciclo la diferenciación el linfocitos B de memoria la diferenciación a células plasmáticas efectoras y la diferenciación a células plasmáticas de memoria o células plasmáticas de vida media larga las células plasmáticas migran a la médula ósea donde se establecen en nichos especiales conocidos Como nichos plasmáticos y continúan produciendo anticuerpos contra sus antígenos específicos los linfocitos de memoria pueden circular en Sangre y los tejidos linfoides distribuyéndose por todo el cuerpo si el organismo se encuentra nuevamente con el mismo antígeno ya sea debido a una

reinfección o una exposición posterior esto linfocitos B de memoria se pueden activar rápidamente a células plasmáticas o al linfocitos bectores A diferencia de los linfocitos de foliculares que expresan principalmente receptores monoreactivos y dan lugar anticuerpos altamente específicos y de alta afinidad los linfocitos B de la zona marginal expresan verse receptores más polireactivos y producen rápidamente anticuerpos de menor afinidad por otro lado los linfocitos B de la zona marginal son sensibles a la estimulación a través de receptores de reconocimiento de patrones principalmente receptores tipo tol lo cual contribuye a una respuesta primaria acelerada de anticuerpos particularmente

contra patógenos transmitidos por la sangre y antígenos t independientes dada su localización principal en la zona marginal del vaso y en los senos subcapsulares del ganglio los linfocitos B de la zona marginal producen anticuerpos naturales principalmente de tipo igm independiente de la estimulación en algunos casos antígenos extraños dado que presentan auto y o polireactividad pueden facilitar tanto la neutralización de patógenos Invasores como promover funciones de limpieza como la eliminación de células apostólicas finalmente los linfocitos B1 también son linfocitos que producen anticuerpos naturales de tipo igm en ausencia de estimulación antigénica estos anticuerpos son particularmente eficaces

en la detección de antígenos conservados y de estructuras repetitivas presentes en muchos patógenos bien con esto estamos en principio fin digamos a este encuentro en donde pudimos poner en relevancia los aspectos principales relacionados con los procesos ontogénicos del Linfocito B los mecanismos que conducen a su activación y los principales fenómenos efectores de las células plasmáticas como las células responsables de la producción de anticuerpos los espero en próximos encuentros Muchas gracias por haber atendido