Alesco | Cuidados com o biotério e sua importância para a experimentação animal

[Música] [Música] [Música] olá a todos meu nome é thiago piolli eu sou médico veterinário formado pela universidade federal rural do rio de janeiro sou doutor em ciências pela unifesp e neurofisiologia neurocirurgia e hoje atua como gerente da américa latina da empresa lesco também atuou como clínico veterinário clínica e cirurgião de pequenos animais e hoje vou falar um pouco pra vocês a respeito das novas tecnologias hoje empregadas em biotério isso eh eh eh a sua importância para a experimentação animal ou seja o que existe hoje de equipamentos e sistemas de barreiras que ajudam e auxiliam nos

principais meios de pesquisa então qualquer grande importância de falar sobre esse tema é produzir animais com qualidade animais certificados animais que estejam aptos a pesquisa que tenham menos fiéis a experimentação animal que gerem menos transtornos aos pesquisadores é que o objetivo seria melhorar os resultados experimentais diminuído fiéis diminuindo os erros é com qual objetivo também de reduzir o uso desses animais e também de prevenir a contaminação de nós operadores que lidamos propriamente com os animais como também dos próprios animais já que eles têm também menos fatores de interferência falando então da biossegurança que quebre o

segurança também segurança por definição é o conjunto de ações destinadas a prevenir controlar e minimizar e muitas das vezes eliminar todos os riscos inerentes às atividades de pesquisa produção desenvolvimento tecnológico serviço e inúmeros outros e essa biossegurança apóia se em três principais pilares de sustentação que deve se conversará harmoniosamente entre si com o objetivo de reduzir e eliminar todos os fatores de interferência quem são esses três pilares de sustentação os técnicos alunos as pessoas que lidam propriamente com os animais o outro os animais propriamente ditos e um terceiro o sistema de barreiras que compreende o

desenho arquitetônico a capacitação é do rh os procedimentos operacionais padrões estabelecidos nesse meu hotel sério e equipamentos dentre inúmeros outros então vou falar um pouco sobre cada um para que vocês entendam todo o contexto e importância dessa via segurança em relação ao primeiro pilar de sustentação às pessoas que trabalham diretamente nesse biotério qual que é o fator de interferência principal as alergias essa é a principal causa de afastamento de um terço das pessoas que trabalham dentro desses biotérios ou seja 33% das pessoas são afastadas por apresentar reações de hipersensibilidade e atualmente e de alguns anos

pra cá inclusive já foram identificados e inúmeros fragmentos antigênicos que geram essas reações de hipersensibilidade nas pessoas que ali trabalham tanto encaminhou os atos cobaias e coelhos elas são passadas através de inoculação por suspensão desses aerosóis está ou por empresas desses materiais ou por limpeza do próprio ambiente que suspende é esses particulados esses fragmentos antigênicos ou por outros fatores que dentro do biotério está como o sacrifício dos animais cirurgia coleta de tecidos é transporte dos animais tudo envolvido nesse biotério tudo através desse manejo pode gerar esses processos de imprescindibilidade em relação aos sinais químicos nós

observamos inúmeros sinais na qual a pessoa apresenta a partir do momento que tenha essa reação de possibilidade observamos muitas vezes uma congestão nasal resfriados repetitivos são todas as seguintes alérgicas envolvidas irritação ocular gerando também conjuntivite alérgica na pele a gente pode observar vermelhidão prurido erupções cutâneas todas as dermatites de contato também até sintomas mais crônicos mais severos como asma bronquite processos disse ney qos tosses incessantes producentes ou não estertores pulmonares dentre inúmeros outros segundo grande pilar de sustentação desse biotério os animais quais são os fatores de interferência desses animais há inúmeros vocês observam que inúmeros

fatores envolvem esses animais como o seu fator genético sua qualidade sanitária o macro e micro ambiente e vou falar sobre todos eles para vocês entenderem todo o contexto em relação ao fator de interferência da base genética é importante que o pesquisador identifique se o animal que tipo de status genético que ele possui seu animal o gene com geninho recombinante transgênico um pouquinho um nocaute um nível sanitário status sanitário de nice animal aqui cênico um germe fui assim o animal youtube ótico seu animal stf que é específico patógeno flui ou seu animal convencional simplesmente ou seja

você sabendo a genética e ea base sanitária dele status sanitários você consegue identificar e muitas vezes prevê como que é essa exposição ao antígeno a um produto químico cada animal e cada status responde diferentemente essas disposições em relação ao agora ao macro ambiente quais são os fatores de interferência temperatura se você tiver realmente nesse biotério uma temperatura muito alta você pode dar uma diminuição ou interrupção na reprodução ou seja uma diminuição tá nesse e permitisse de produtividade se tiver uma temperatura muito baixa muito fria você vai observar realmente afecções respiratórias características em relação à umidade

relativa umidade relativa muito alta você observa também uma proliferação um aumento na proliferação de microorganismos é principalmente as bactérias urease positivas aquela transformam a uréia e amônia que você observa então um aumento de microrganismos em um aumento de amônia gerando assim todas as doenças do trato respiratório também diminui da imunidade e apareceram ainda mais outras bactérias e outros vírus oportunistas diferentemente de uma umidade baixa o que acontece com o ressecamento de pele e muitas vezes observamos também uma patologia chamada ringue tenho o ringue tenho nada mais é do que uma concepção anular da porção média

de estado essa calda fazendo com que não haja a perfusão adequada perfusão sanguínea dessa cauda gerando esse ressecamento e queda dessa causa animal muitas vezes acaba perdendo a sacada cauda acaba gerando dor um animal e você obrigatoriamente têm que afastá lo da sua produção e do seu experimento também em relação à luminosidade também uma luminosidade não adequada fora dos padrões preconizados pelos comitês de ética e pelo consepe pelo its você gera pode gerar também os animais um dano na retina uma cegueira tá e todas as alterações nos parâmetros biológicos toda mudança em um nível cercade

ano também em relação ao ruído também se você tem um fluido em excesso atrapalha também esses animais gera inúmeros transtornos o animal fica estressado animal diminui a produtividade pode gerar canibalismo mudança em todo o contexto e você ter um resultado falso positivo ou falso negativo então muitas vezes animal tem que ser afastado da sua produção agora falamos do fator genético sanitário microambiente agora vamos falar quais são os fatores de interferência no micro ambiente então falamos fator de interferência relacionados à qualidade sanitária a qualidade genética ao macro ambiente está faltando o microambiente que a caixa onde

o animal vive tá então é um normalmente o ambiente é que produz grandes quantidades de poluentes porque a língua animou defeca animal urina ali ele se alimenta ali cúpula que a então ele sofre efeitos de tudo que está ali presente nesse ambiente o que são os materiais utilizados na cama a razão a cama como essa cama ela tem uma boa relação e duas copa ela absorve bem essa urina essa unidade qual é o intervalo de troca dessa cama como é que você faz isso em relação à ração é uma ração de qualidade gera um nível

nutricional adequado para esse animal pode ter realmente uma qualidade de vida um bom crescimento fisiológico essa razão é estar eleita já era muito pobre esse micro ambiente os animais eles aspiram isso outro fator também que também só que grande efeito também a densidade populacional ou seja quantos animais por caixa vocês costumam a lei já existe uma normativa internacional na qual nós seguimos também o concerto também segue que preconiza o peso do animal por centímetro cúbico que deve preocupar se você tiver uma população muito grande dentro de uma caixa isso também influencia negativamente a sua criação

ao passo que se você tiver uma criação poucos animais numa caixa algumas espécies ou em imagens também são suscetíveis gostam de viver em harmonia em comunidade como rato que o animal muito sociável então os poucos animais está sujeito também o animal fica estressado e muda todo o parâmetro fisiológico além daquele ambiente outro fator de grande influência o sistema de ventilação como que é feito no sistema de ventilação da sua no seu na sua caixa do seu ambiente é um sistema chamado vg de ventilação geral de lei dura onde o área de entra nesse ambiente e

ele é retirado desse ambiente ou através do sistema chamado investisse metilação entre a caixa na qual área insuflado dentro do micro jogador fazendo um arraste homogêneo de toda a umidade e amônia ali presente muitas vezes nós observamos que esses último sistema chamado em vencer o intervalo de trocas ele é maior você consegue trocar o animal há muitas vezes a cada semana há dez dias logicamente dependendo do seu substrato da sua cama na sua forragem ali utilizada e tem tudo isso que eu falei em consequência direta sobre os animais gerando estresse canibalismo diminuição ou aumento dos

índices de produtividade são pequenos detalhes que realmente fazem uma grande diferença continuando ainda nesse microambiente está falando especificamente agora sob a amônia e co2 esses são os principais gases capazes de produzir uma toxidade sistêmica nos animais são os vilões do biotério e isso já sabido desde a década de 50 da onde estão relacionados à sua produção está relacionada diretamente com inúmeros fatores sejam elas a temperatura a humidade relativa à frequência de limpeza dessas gaiolas a densidade de ocupação a espécie animal também o volume e como falei a constituição da sua cama a sua produção é

ocorre através da hidrólise da uréia por bactérias urease positivas presente nas fezes e urinas essas bactérias essas que transformam a uréia e amônia que é um gás tóxico e que produz essa toxicidade sistêmica existe hoje uma faixa tolerável tapar esses roedores um limite de 25 ppm no entanto um estudo mais recente mostrou que quanto menor essa faixa melhor para os animais continuando em relação ao micro ambiente especificamente a moniz co2 esses dois vilões desse meio ambiente nós observamos alguns efeitos fisiopatológicos esses animais e esses efeitos eles estão diretamente relacionados ao tempo de exposição onde de

uma forma aguda observamos sintomatologia como irritação de vias aéreas superiores diminuição da freqüência respiratória e redução do peso corporal já cronicamente o animal exposto por um tempo específico nós observamos sintomatologia como lesões e trato respiratório não só agora superior mais inferior alterações em inglês e mia na concentração de proteínas plasmáticas contagem de leucócitos eritrócitos como consumo diminuição no consumo de co2 redução do tônus muscular alterações no equilíbrio do base nas atividades de enzimas também hepáticas e com criativas e insuficiência renal crônica e até mesmo distúrbios do sistema nervoso central isso também já são tradição sintomas

conhecidos já há muitos anos e até teses de mestrado e doutorado que fala se sobre isso e hoje já é bem sabido um outro fator um outro efeito importante que o baterista chega para o pesquisador e fala o doutor eu não sei que tá acontecendo com os animais eles estão bem diferentes nós temos observado um maior intervalo entre os partos quando a fêmea tem o parto tem a gestação nós observamos um menor número de filhotes por esse parto além disso mais filhotes morrem têm uma mortalidade e quando ele está a ser os que sobrevivem têm

o menor ganho de peso conseqüentemente nós observamos que é por causa desse vilão chamado amônia amônia gera todos esses transtornos que eu falei já até agora gerando viés e diminuindo a reprodutibilidade dos resultados experimentais como vocês podem ver essas fotos são algumas alguns exemplos de animais cronicamente espostos amônia onde nós observamos animais a dinâmicos apáticos está com um comportamento diferenciado no característico pode gerar também problemas anatômicos e fisiológicos o animal pode ter porfirina que é uma secreção vermelho acastanhado pelas células de hardware presente na conjuntiva nós observamos também nessas outras fotos e isso aqui a

doença chamada ringue tail e tenho é aquela diminuição da umidade de si micro ambiente onde essa constricção anulado essa calda e essa calda cai e ela pudesse gerador e você necessariamente deve afastar esse animal na sua pesquisa então como reduzir esses prejuízos através do terceiro pilar de sustentação dos sistemas de barreira esse vai ser o nosso foco hoje eo porquê utilizar essas novas tecnologias hoje empregada nestes biotérios e o que são sistemas de barreiras eles definem se como os sistemas que combinam os aspectos construtivos do próprio biotério os equipamentos nele contidos e todos os métodos

operativos que vocês estabeleceram e que buscam estabilizar as condições das áreas atingidas minimizando a probabilidade de patógenos e outras substâncias indesejáveis contaminarem animais de áreas limpas ea nós seres humanos e não importa se a biblioteca de criação ou de experimentação e quais são os exemplos de barreiras sanitárias são vários podemos utilizar vários exemplos um deles quais são os materiais utilizados na construção desse biotério como que é o piso desse br onde derrapante tem bons comento como que a parede ela é pintada lavável uma pintura que você consegue desinfetar lavar têm bordas arredondadas como que é

o teto como é comum que a iluminação os sistemas de ventilação de filtragem outro exemplo os equipamentos de filtração e filtro hepa absoluto ou afro normal futuro simples de silencia se você vai criar um animal e se pega você tem que ter você tem que ter um filtro adequado para isso existe pressão diferenciada entre os ambientes pressão positiva pressão negativa você autoclave os seus produtos e materiais ou você desinfecta qual é o desinfectante que você utiliza no qual o tempo de exposição e se desinfetante você retira adequadamente disse antes para não deixar resíduo nesses produtos

e todos fazem uso de uma higiene pessoal adequada todos utilizam e feliz adequadamente touca luvas máscara pouco a mais ea exigência para determinadas áreas todos seguem os procedimentos operacionais padrões já estabelecidos indexados no seu biotério eu falo não só pelos pescadores que ali trabalham mas para todos que ali prefeitura vamos fazer uma pesquisa um docente que vai fazer uma uma injeção um animal um procedimento propriamente dito tá e por fim os equipamentos de proteção coletiva dentre todos os exemplos que já se tem até agora eu vou mostrar hoje pra vocês quais são os principais equipamentos

de proteção coletiva hoje utilizados no mundo dentre os equipamentos de proteção coletiva mais utilizados podemos citar hoje os racks ventilados esses sim são equipamentos seguros adequados e hoje nós latino-americanos não perdemos nada os europeus e americanos tanto em tecnologia quanto em produção científica então o que esses racks ele geram para o macroambiente para a sala propriamente dito para o ambiente de biotério eles diminui consideravelmente a exposição de amônio co2 para nós operadores ele admite diminui também consideravelmente a dispersão de fragmentos antigênicos e de outros contaminantes esse biotério diminui também a troca de ar de 25

para 18 10 trocas de ar nesse ambiente diminui então consequentemente a renovação desse a necessidade de renovação desse ar e consequentemente o consumo de energia também gerando uma significativa economia não só na estruturação desse biotério mas também no decorrer da sua utilização uma magia uma grande economia paraense biotério agora em relação ao meio ambiente o que esse hack gera por ter essa ventilação entre a caixa ou seja o guarani sofá do dem dentro dessa caixa dentro desse micro isolador a uma renovação constante desse ar pode ir de uma faixa de 20 a até 70 troca

azar de acordo com a normativa internacional sem gerar estresse esses animais tanto faz esse ar sem o fado por baixo ou por cima desse micronutriente isolador tá ele também gera um maior intervalo de troca dessas camas podendo dessa forrageira podendo e de uma semana até 15 dias dependendo do substrato que você utiliza evita também a contaminação cruzada o spred porque esses animais eles estão em caixas estanques em caixas em micro ambientes onde uma caixa não se comunica com a sua adjacente gerando um ambiente único e individualizado e porquê que os sacs ventilados esses equipamentos de

proteção coletiva são os mais vendidos do mundo hoje os racks ventilados são os equipamentos onde nós observamos um melhor custo benefício o hack retirado precisa de apenas duas coisas pra funcionar uma tomada 110 ou 220 e uma saída de exaustão para jogar para fora desse ambiente do macroambiente todos esses poluentes e contaminantes e nós claro indicamos também é outros fatores para melhorar a relação de pensar nesses animais logicamente seguir todos os procedimentos operacionais estabelecidos é tomar cuidado com o ciclo cairu excluir escuro 12 por 12 é a tematização ambiental dentre inúmeros outros são equipamentos hoje

também com baixo consumo esses motores possuem ímãs permanentes dentro também também trabalhando com o eletromagnetismo então o consumo vai de 40 a 120 watts de potência em equipamentos altamente duráveis nós observamos inclusive em algumas universidades alguns biotérios equipamentos com 10 15 20 anos e também dispensa o uso de no breaks especificamente os minis voadores e racks da lesco porquê porque em cima dessas caixas existem os top filters que tóquio ter é uma grande área que permite a troca gasosa entre o meio externo interno caso acabe essa energia então os animais ali vivem por tempo indeterminado

logicamente que se for um ambiente muito quente no estado muito quente os animais estão sujeitos a virem a óbito é claro mas esse equipamento foi feito dessa forma para que permita essa troca gasosa e manter animal por tempo indeterminado além disso os sites ventilados também são adequados a todas as normativas internacionais e todas as legislações vigentes em relação aos muitos jogadores são essas caixas que nós inserimos nos sacs ventilados ela gera um ambiente único individualizado esses animais aumentando assim a relação de bem estar deles gerando conforto também além disso evita a dispersão de fragmentos higiênicos

e de outros contaminantes além também de evitar a dispersão de odores não influenciando a sua caixa adjacente então é possível sim vários pesquisadores é utilizar esse sistema com diferentes caixas onde uma caixa não vai se comunicar com sua já senti realmente o único individualizado todas as caixas micros jogadoras são feitas hoje de poles o forno coupole fez fortuna ou pode ter amido que é um são polímeros altamente duráveis não de formam na autoclave e dura por anos pra cada pesquisador e qual a vantagem dos muitos jogadores e sistema chamado investir e ventilação entre a caixa

onde o ar eles o fado diretamente nesse meio ambiente fazendo arraste homogêneo da amônia e de toda unidade ali contida passando agora então um segundo grande equipamento de proteção coletiva muito utilizado também que são os isoladores as bolhas jogadores a ação equipamentos também de alta segurança onde o pesquisador não têm contato direto com os animais nas paredes dessas bolhas no pé jogadoras estão fixadas na parede interna luvas onde o pescador tem que enfiar a mão e ali trabalhar com esses animais por meio dessas luvas evitando assim a contaminação direta do pesquisador com esses animais evitando

o erro de manipulação é utilizado tanto para cá mudou quanto para rato quanto pra roubar e as ponto pra aves também existem os jogadores pra aves também e você pode você tem a opção de escolher o pressão positiva com pressão negativa pressão positiva é muito ar entrando pouco ar saindo é como se fosse uma bexiga um papo o equipamento fica insuflado ou seja nada do microorganismo que está no exterior vai deter esse ambiente porque que têm pressão têm pressão positiva protege quem protege quem está dentro desse ambiente indicado realmente para animais é de uma colônia

de fundação uma atrizes altamente selecionadas para animais aqui cênico sem nenhuma flora é nem uma microbiota animais guineto bióticos animais em molo deficientes transgênicos enfim ou a pressão negativo o que é pouco ar entrando muito ar saindo então protege quem protege quem está do lado de fora indicado realmente para animais altamente contaminados você animais em quarentena que você não sabe qual o agente microbiológico ali presente para laboratórios de controle de qualidade animal técnicas de descontaminação seja ela está economia ou transferência de embriões enfim um outro equipamento de proteção coletiva são as instâncias ventilados que também

gera uma proteção ao animal uma proteção a esse ambiente essa área de trabalho eliminando assim os odores e à dispersão desses fragmentos antigênicos no entanto o sistema de ventilação dela é diferente do rock mint lado o sistema de ventilação dela chamado v pds de que a ventilação geral de leitoras md direcional onde o ar ele entra pela lateral desse instante e passa por cima desse micro isolador não fazendo o arraste dentro desse mix jogador então pra que essa harmonia que é um gás pesado saia desse micro ambiente é importante que esses animais andem que esses

animais faça um turbilhão lamento iniciar nesse meio ambiente essa harmonia acende e ela é arrastada por esse pressa ventilação semi direcional de um lado para o outro por isso que o intervalo de troca é menor você muitas vezes acaba trocando dia sim dia não ou todos os dias dependendo da concentração claramente a concentração de animais dentro desta caixa e também do seu substrato da cama da forragem que você utiliza a vantagem é que você consegue utilizar diferentes modelos de caixa nos seus corpos utilizando um tanto caixas tamanho p m ou g e nós indicamos esse

equipamento para alguns projetos especiais como por exemplo o ciclo invertido na qual você consegue colocar um contact preto colocar um timer nessa nesse instante e alunos dentro fazendo com que haja a inversão de ciclo claro escuro podemos colocar também seria rodas de atividade tirar toda a parte militar e colocar tudo em polipropileno e utilizar para a telemetria também surge telemetria podemos inserir também gaiolas metabólicas fazer monitoramento de crises epilépticas entre inúmeros outros como vocês podem observar essas ilustrações nessas fotos nessa primeira por exemplo nós adaptamos gaiola de coelhos aqui dentro dessas instâncias podemos adaptar também

delas metabólicas enfim para o uso de morcegos e outras espécies também para experimentação um outro equipamento de proteção coletiva bastante utilizado também são os módulos de tron o ca esses módulos de trocas são extremamente importantes para que se mantenha realmente o status sanitário desses animais não adianta você ter somente um rack ventilado um instante se você não tem um módulo de troca para fazer a simples operação de troca desses animais e tirar esses animais dos racks ventiladas nos micros jogadores e trocá-los da caixa suja para colocar na caixa limpa então esse modo de troca ele

cria uma área de proteção controlada impedindo assim a contaminação de agentes externos ele possui filtro hepa filtro absoluto com eficiência de 99,99 por cento de filtragem desses microrganismos ele permite assim a manipulação de ambos os lados está é a manipulação de animais certificados de que na qual você consegue manter o status sanitário deles seja animais spf minuto bióticos para organismos geneticamente modificados dentre outros ele protege tanto o operador quanto esse micro ambiente ele é leve compacto ele o médico você consegue andar com ele muito diferentes alas no diferentes espaços dentro de si biotério e como

falei ambos os lados podem ser utilizados facilitando assim o manejo ea velocidade de troca dessas caixas nesse biotério como vocês podem ver aqui na ilustração o fluxo de ar nesse módulo de troca o ar então ele é captado por esses don peppers laterais passa por um filtro grosso o corpo desse modo de troca ao lado nesse corpo ainda tem um filtro hepa o ar ele é completamente filtrado sobe por esse duto encontra um outro filtro no teto deste modo esse módulo e desce fazendo esse circuito reverberante de circulação de ar um ar filtrado por um

filtro absoluto podemos citar outros equipamentos de proteção coletiva bastante utilizados inclusive na rotina matéria podemos citar aqui as lavadoras de caixa de bebedouros adaptadas a cada micro isolador adaptada a cada bebedouro aumentando essa essa esse manejo de limpeza facilitando a vida dos operadores acelerando todo esse processo essa rotina dentro de cada biotério e por fim um outro equipamento bastante utilizado na europa e estados unidos e que vem tomando grande forma que nosso país são os sacs prazer para fish e esse hack possui todos os principais componentes de filtragem seja os filtros mecânicos para retirada de

sujidades os filtros químicos para retirada de substâncias químicas que interferem na reprodução e crescimento adequado dessa espécie e os filtros biológicos que transforma a harmonia e nitrato e ela e nitrito e ela é retirada é uma substância menos tóxica a esses peixes além disso esse hack também faz um monitoramento em tempo real dos principais parâmetros dessa água que é o ph a condutividade ea temperatura em resumo então o pessoal então dentro da ciência de animais de laboratório é a uma grande importância que se que todos os animais sejam tem uma qualidade apropriada sejam certificados para

que você mantenha uma padronização em diferentes aspectos seja uma organização dos aspectos genéticos dos aspectos sanitários no macro e micro ambiente com qual objetivo e você produzir diferentes linhagens dentro do seu critério e você reduzir o número de animais porque você também está reduzir os fatores de interferência você está melhorando a reprodutibilidade desses animais então você tá e além disso tem uma universalidade você consegue trabalhar com esses animais em diferentes locais onde seja porque você tem uma padronização em todos os processos e procedimentos nem com um solitário e é isso que eu tinha pra dizer

pra vocês pessoal que era então a lesco que confiou no meu trabalho me disponibilizou minha vida até aqui quero agradecer também ao professor gustavo toda sua equipe que acreditou também na nossa empresa acreditou no nosso potencial e eu me deixa à disposição caso tenha alguma dúvida muito obrigado [Música] [Música] [Música] [Música] [Música] [Música] [Música] [Música] [Música] o [Música] [Música]