Vantagens e Desvantagens da ICSI na Reprodução Equina

e aí oi oi gente é só renata eu faço parte do grupo de estudos de reprodução animal da universidade anhembi morumbi e esse é o nosso canal no youtube se inscreva para não perder nenhum vídeo oi gente eu sou a gabriele eu também faço parte dos aqui do geap e hoje a gente vai falar para vocês um pouquinho e desvantagens as desvantagens da y uma já falou dá o seu joinha e se viu o nosso canal para sempre acompanhar os nossos vídeos é bom pessoal hoje a gente vai falar um pouquinho de led alguns focos

principais sobre a técnica da esse a gente vai falar comer sobre o surgimento da técnica como é feita a recuperação oocitária né pra gente finalizar a técnica da ipse e as vantagens e desvantagens as principais vantagens e desvantagens da pele bom pessoal a técnica da icsi lá basicamente consiste em você injetar apenas um espermatozoide dentro do citoplasma do os cito por conta disso a gente acaba pulando alguns fenômenos que acontecem na fecundação natural e outras técnicas já que espermatozoide é injetado diretamente dentro do o tipo é alguns esses fenômenos são igual está escrito aqui nos

slides que é a capacitação espermática a reação emocional a penetração do espermatozoide atrás na zona pelúcida e a fusão das membranas plasmáticas do ovócito e espermatozóide a primeira técnica de icsi com sucesso em equinos ocorreu em 1996 e a partir de então começou a estudar cada vez mais a técnica em 2002 é começou a utilizar o cliente subiu é uma pipeta de injeção com vibrações por minuto e essa é proprietário ajudando muito na aumento das taxas de clivagem 69/89 por cento e a partir daí a técnica só vem melhorando cada vez mais são os equipamentos

que a gente utiliza na técnica e é o guia esse preto onde a gente vai posicionar proibido atrasou e agulha para fazer aspiração esses currículos é o banho-maria onde a gente vai deixar o link de dps que a solução salina dispôs faz nada e a gente justin uma temperatura ideal a agulha com duas vezes o sistema de aspiração que fica conectada no recipiente da bomba vácuo e ao lado a gente tenha bom e regula o vácuo que vai ser realizado para fazer aspiração desses políticos da gente realizar a técnica da opel que é aspiração dos

folículos a gente precisa estar com animal num tronco de contenção e esse animal precisa estar sedado porque apesar de ser uma técnica relativamente simples ela é uma técnica invasiva apesar de pouco invasiva é uma técnica invasiva eu esse animal tem que estar deve estar devidamente ser dado é para que ele não sinta dor não sinta desconforto e que a técnica seja realizada com a maior segurança tanto para o animal como para o veterinário então vamos lá conforme a gabi tinha falado no slide anterior aqui a gente tem uma um banho maria por russ os pedestres

aqui tá vendo esse bbs que vai ser utilizado para aspiração ele tem que estar heparinizado para evitar que se formem com em que bar entupir todo o sistema aí de aspirações é muito importante que ele esteja heparinizado tá né é o pds ele é conectado em uma das vias da agulha aqui ó agulha que tá aqui na mão do calvin nessa foto tá então ele é conectado nessa nessa nessa bia é o veterinário com a mão transmetal vai colocar o ovário no fundo do da vagina e para que ele consiga ver a imagem na clube

tá quando ele conseguir ter a imagem do folículo que ele vai acertar aquele vai colocar a agulha ali no ultrassom ele vai furar o fundo da vagina vai furar o ovário até chegar no folículo quando ele chegar nesse folículo uma outra via da dessa agulha é conectada numa seringa que tá na mão dessa pessoa aqui nessa foto não sei se vocês conseguem ver tá essa seringa é muito importante que ela não tenha engulo porque eu lembro ele pode ser tóxico para os oócitos então todo o procedimento até laboratorial ele não pode ter seringa com engulo

inclusive aqui na hora da lavagem desse folículo então o que que a gente vai fazer a pessoa que ela vai encher esta seringa e essa seringa vai injetar é esse esse pbs heparinizado e do folículo então a gente faz aproximadamente umas 10 lavagens nesse folículo e da pessoa vai injetando aos poucos aqui quando foi livro infantil o veterinário agulha começa aspirar esse líquido que tá lá dentro né e veterinário começa a escarificar esse folículo porque oocito da égua diferente de algumas outras espécies ele é muito aderido na parede do folículo então ele tem que fazer

essas escarificação da parede do folículo para que o rosto consiga vir junto com esse líquido se não tivesse qualificação as taxas de recuperar a pequena tá então é que começa a fazer isso a gente vai aproximadamente 10 lavagens para garantir de alguma forma e esse folículo vem aí na durante a inspiração e vamos lá aí ele vai cliente daqui através da agulha esse líquido vai lá para ovário faz em inflar o furico a gente faz os 10 lavagens e esse líquido volta por conta da bomba de vácuo por isso pela outra via a outra via

não é conectado aqui nesse recipiente tá e tem vácuo então essa água volta por conta desse a água não né desculpa a gente o pds acaba retornando por conta do vácuo que tem é que esse recipiente tem e junto com ele traz aqueles políticos tá elsa tratamento camisinha protetora que higiênica sanitária para essa é muito importante e que e já colocado até por contar uma questão de higienização e segurança tanto do animal também como do veterinário e tudo isso daqui também é feito obviamente como lubrificação aqui é dessa camisinha com lubrificação aqui da santos entao

clicle na água fazer sempre pensando na segurança aí da égua uma coisa também importante aqui antes desse procedimento é importante que a gente limpe o reto do animal coloque atadura na no rabo do animal tem dure esse rabo o amarrar esse mago de uma forma que ele não atrapalha no procedimento e que seja feita a lavagem tanto da vulva como do anos pelo menos três vezes com detergente e esteja de uma forma manual pra gente conseguir tirar essa sujeira que tem ali na região de forma manual com detergente e a depois a gente tecla essa

área e aí pode fazer aspiração normalmente e depois que esse recipiente que a gente colocou lá no slide anterior que recebeu os oócitos com ps heparinizado a gente tira esse recipiente lá da bomba de vácuo e leva para o laboratório que é montado no mesmo local onde a inspiração está ocorrendo para a gente poder selecionar esses oócitos tá a questão de seleção é um pouco complicada quando a gente fala de equinos porque na verdade a gente não seleciona nada a gente na verdade é coleta esses ossos e manda para o laboratório em outras espécies de

fato eles selecionam qual tem mais célula da granulosa qual que não tem como ficar mais escondido qual que não tá é desnudou não eles fazem essa seleção nos referimos a gente utiliza todos os ácidos que são recuperados na opel então é importante que no laboratório a gente tem os equipamentos que estão aí colocados no slide é importante algumas coisas o pds que a gente vai utilizar aqui para lavar esse ó se ele não vai ser mais de paralisado porque como não tem mais perfuração do animal e nada disso e todo o sangue que eventualmente veio

aí da aspiração ele já está entronizado então a gente não precisa usar nada heparinizado no laboratório é importante usar também luvas nitrílicas porque aquela luva de procedimento comum ela tem um talco é em o material dela também não é legal pode ser tóxico para os ossos então a gente usa essas roupas nitrílicas para fazer sua seleção bom então como que funciona a gente vai pegar aquele recipiente a gente pega um filtro de embrião mesmo e a gente lava essa esse conteúdo que veio no recipiente várias vezes até que está esse pps fique bem translúcido vamos

ver assim porque ele vem com a sujidade ele vem com um pouco de sangue ele vem meio turvo né quando você leva esse conteúdo pelo laboratório que você faz várias filtragens para que esse conteúdo fique mais transparente e fique mais fácil de visualizar os oócitos quando você colocar na placa de petri então depois disso você vai colocar também esse conteúdo já filtrado numa placa de petri e quando a seringa a gente pega um pouquinho de pbs me lava o fundo desse filtro para ter certeza que nem um os tu ficou preso ali no fundo que

a gente a agulha é uma seringa com agulha até que uma certa pressão para que se tiver algum outro ali preso no fundo a gente consiga retirar bem aí com esse lavado também a gente coloca isso na placa de petri a placa de petri que tem que estar arriscada porque fica muito mais fácil de localizar esses ossos assim também e aí a gente com uma pipeta e com a ponteira da pipeta a gente começa a procurar na lupa né e é esse aparelho aí que você pode ver na foto que a gente coloca lá começa

a procurar e com a pipeta a gente vai colocando esses oócitos numa outra da placa menorzinha que tem um outro lavado e a gente vai fazer algum é uma lavagem de si só sitos nessa outra placa menor muito semelhante com que a gente faz com lavagem de embrião também bom então o embrião a gente passa lá nas gotinhas para que seja ele fique mais rico vamos ver assim e é exatamente isso que a gente vai ser embrião também quando a gente tira dessa placa de petri e coloca numa outra placa de petri é menorzinha aí

pode ter duas três gotas para a gente poder fazer essa transferência de gotas essa lavagem desses ossos passado desse dessa plaquinha a gente vai colocar no tubinho de transporte esterilizado também com um mês específico aí esse e-mail se vocês perguntarem qual é o meio que a gente utiliza a gente vai achar bazar artigos e falam de vários meios e várias vários produtos misturados aí nesse meio e aí cada laboratório tem fala que o meio é o segredo dele que faz aí oócito ser melhor ter mais taxas de enfermagem ter mais taxas de sucesso aí de

cada laboratório isso aí é o segredo de cada laboratório então é difícil a gente ficar falando que tem cada meio cada laboratório bom então a gente vai colocar isso na nesse os ossos nesse recipiente lá trace recipiente colocando identifica no também o horário que é extremamente importante o horário que esses ossos foram colocados nesse recipiente de transporte é o nome da égua para identificar também de quem são esses ossos e não ter problema lá no laboratório e a quantidade de ossos que você colocou o dente desse desse recipiente lembrando que cada laboratório também que uma

quantidade específica para colocar dentro desse recipiente então tem laboratório trabalhar com 10 9 com cinco também tem uma quantidade específica para colocar dentro desse recipiente então é importante você saber quantos oócitos podem ter no máximo em cada recipiente de transporte feito isso a gente coloca esse recipiente com o meio seus ossos dentro da transportadora que nessa e você tá vendo aí nos slides essa transportadora ela tem que estar a 22 graus e os ossos vão ficar lá até todo aspiração acabar e tudo mais e isso for de fato por laboratório para eles fazerem aqui vagem

fazer a fecundação a maturação dos ossos todos os outros procedimentos laboratoriais é bom corinthians realizar aspiração a gente encontra os folículos dominantes e folículos imaturos é esse é um pouco contraditório porque tem profissionais que preferem aspirar mais folículos dominantes item profissionais que já preferem o folículo maduro porque é o folículo maduro ele tem mostrado no continente né com estudos e ele pronto possui mais felizes o ócio recuperado desse folículo ele possui mais resistência do que o ócio encontrado no folículo dominante muitas vezes quando você aspiram porém pronominal dominante aí só se tu vem com a

zona da granulosa mundo expandida e me enviaram claro pela aspiração equina como a gente não tem muito né vou fazer essa seleção de ar vou aspirar só os polígonos e fatores dominantes as você acaba sendo todos os folículos né mas a gente sente essa um dos ossos aspirados no folículo dominante que o folículo imaturo os folículos dominantes eles têm uma taxa de recuperação maior né setenta e oitenta por cento porém os folículos imaturos tem uma taxa de recuperação muito baixa mas como eu já comentei oócito o deles tem se apresentado mais resistente do que o

dos folículos dominantes é bom pessoal episódios são extremamente sensíveis na internet então cuidado muito grande para fazer o envio para o laboratório e no laboratório esse é uma recomendou a gente meio que acaba não tendo uma seleção neve esses zoológicos a gente acaba é pegando tantos consegue com células do cumulus bandidos os rios desmundos não tem não tem esse controle mesmo que a gente prefira e só se tu venha com mais células do cumulus mais células da granulosa eles dizem que eu acho que eles têm mais chances de ter sempre vale a gente acaba não

tendo muitas da seleção é para maturação em seguida esse ó se tu é assim como ele também já comentou com vocês a gente não tem uma ideia assim exata do que utilizado como componente para fazer essa maturação é muito dos laboratórios privados e eles acabam a gente não tem essa informação exata o segundo alguns estudos que a gente conseguiu acompanhar alguns dos componentes e podem ser utilizados são esse que a gente ele citou aqui e é o resto f12 gonadotrofinas o fator de crescimento epidérmico e os atos orofecal de viseu e o suplemento de insulina

transferir na selênio também é muito importante que esses ossos sejam maturados em um ambiente extremamente controlado 15 por cento de co2 em torno de 36 a 38 horas tá bom eu e a gabi nós lemos alguns estudos que falava e escrevia na verdade o passo a passo ali do que acontece dentro do laboratório para que a técnica da ix seja realizado então depois da maturação é esse só se tu sair sim eles estão selecionados eles são deslocados manualmente tem uns ossos que tinha células do que usei são retirados de forma manual e aí o os

textos que apresentaram o corpúsculo polar que nada mais é do que eu vou falar aqui de uma forma mais fácil mas não é não é uma bolinha tá mas é essa estrutura e aparece aqui no hospital após a sua maturação a usam ácidos que não apresentar em o corpúsculo polar após a maturação é porque teve alguma intercorrência o que é durante essa maturação e eles são descartadas então são só utilizados para esse aqueles oócitos que depois de ter mundo depois da maturação apresentar em essa estrutura que a gente chama de corpúsculo polar a é esse

o ácido depois ele fica no meio apropriado para aí se ocorrer eu olhei trocado de meio ele tava naquele meio lá que é para maturação internet tocada de um meio para o meio para ir sim propriamente dito a gente é a gente não nos laboratórios utilizam o instrumento de peso drill que a a gabi já comentou lá no começo que aumenta as chances da técnica é e aí a gente vai pegar o sêmen e se espremem ele tem que ser devidamente processado e aí lá também mostra aí todo detalhamento nos trabalhos que a gente fala

de como esse se ele tem que ser processado e um dos espermatozoides esses sêmen ele é selecionado e desde que esteja também viável esse espermatozoide entre aspas assim estar vivo certo é esse espermatozóides tem a calda sei que você é seccionada desculpa é e aí ele é introduzido com uma agulha específica dentro diretamente dentro do oócito conforme o vídeo que a gente vai ver daqui a pouco tá bom então aí depois disso esse oócito que agora já está fecundado ele vai de para o outro meio específico para quem vagem também vai para um meio controlado

e aí a gente espera ocorrer aqui embaixo em até 24 horas depois de 24 horas todos esses oócitos que estavam fecundados em são olhados visualizados e aqueles que não ocorreram que imagem dentro de 24 horas elas também são descartados tá e aí a cada 20 e vai correndo essa imagem a cada 24 horas a gente vai olhar esses embriões que avaliação embriões em todos aqueles que pararam na imagem anterior as 24 horas eles são descartados e aí a gente depois de sete dias tem 22 segmentos aqui a gente pode ter o gente verifica esses embriões

e aí pode utilizar daqui alguns anos daqui alguns meses utiliza esse material biológico quando o proprietário do animal é quiser utilizar lá numa receptora ou a gente espera mais dois dias e aí a gente pode fazer a inserção direta desse embrião numa receptora e aí esperar a gestação da égua e o pessoal esse é um vídeo e eu ele re pegou na internet não no youtube mesmo em humanos é a técnica da em cima humanos mas ela corre muito parecido forma muito parecida em equinos aí vocês estão vendo o cito né essa é a agulha

e contendo espermatozoides essa guria atravessa o citoplasma e é feita a injeção visita matozoide também se podem ver o corpúsculo polar nave em cima como a rio comentou que aquela bolinha e mais uma vez qual é a perfuração oi e a injeção espermatozóide e é legal gabi só comentando aqui que a gente consegue ver o espermatozoide na agulha e consagrando também está matozoide ele passando no momento e isso sendo introduzido mesmo dentro do do o situ e a gente consegue ver de forma muito clara também corpúsculo polar você vê que todos os ossos que passaram

aí durante o vídeo eles foram selecionados com o corpo os popular então a gente percebe que a técnica realizada em humano ela de fato muito semelhante do que é realizar a líquidos 1 é bom pessoalmente comentou com vocês a gente já tá um pouquinho também da das vantagens que não são bem desvantagem conhecem mais as dificuldades da técnica que a gente acaba tendo aí no decorrer e as vantagens de você realizar a esse é as principais dificuldades que a gente conseguiu pontuar foi a necessidade de mão de obra qualificada eu acho que como vocês já

viram os lados anteriores é uma técnica ruim detalhada uma tem que ter que pedir muito cuidado muito treino então você precisa de uma mão de obra tanto muito específica a realização da técnica numero telefonico luz as piratas comparado a outros animais por exemplo em bovinos que a gente consegue fazer em questão da superpopulação em águas a gente já não tem essa essa característica o número de folículos que a gente aspira é muito menor os mesmo induzindo e bora do confira essa geral ea recuperação os itália né porque como o número de folículos é muito em

baixo e também tem o fato dos folículos ficarem grudados na parede variani precisa fazer toda a escarificação a você acaba tem um pouco mais de dificuldade para fazer a recuperação desses negócios em algumas das vantagens também é dessa técnica primeiro que ela está evoluindo e acho que é uma tendência assim é para aqueles casos que nunca foram solucionados que a gente não sabe por quê que a égua no empenha nunca e já foi tentado de tudo naquela égua todos os protocolos todos as formas de tentar fazer a empenhar e não conseguiu seja porque ela é

subfértil seja porque existe algum problema ali ou na fossa ovulatória ou no oviduto que de repente esse o ácido não consegue chegar ali até o vitor tu mesmo ou que de repente o espermatozóide não consegue também é de alguma forma chegar nesse ouvido tu ou atravessar uma barreira que tem dentro do útero dessa égua então isso é uma das grandes vantagens da ipse e acho que uma das e agora vendo pelo lado ali do garanhão é a gente consegue utilizar galinhas garanhões subir fez também porque é mesmo que que o sêmen desse garanhão não seja

de boa qualidade como na isso a gente consegue selecionar apenas um espermatozoide esse um que seja bom já consegue fazer fecundação num ócito então isso é bastante interessante aqueles garanhões onde há escassez de sêmen no mercado seja porque ele faleceu já morreu e ele não existe mais aí você me no mercado o porquê errado mesmo de conseguir seja porque importado e as exercícios de trazer aqui para o brasil ou para outras localidades a gente também consegue reaproveitar essa palheta então geralmente os laboratórios hoje estão fazendo elas colocam nessa paleta em 10 pedacinhos vamos dizer assim

e conseguem utilizar um pedaço uma vez que eles vão utilizar ali esse esse sêmen né então é uma fração muito pequena ali desse cm que está congelado numa paleta que já é pouco né e aí eles conseguem ainda ri congelar e sistema então utilizar uma outra vez então assim vai ser utilizado essa essa uma fração ali que eles pegam dessa palheta eles conseguem reutilizado diversas vezes por conta dessa possibilidade de recongelamento obviamente que a gente tem que prestar atenção é que existe servir para serem e que o recongelamento às vezes também não surge tanto efeito

mas é sim uma possibilidade e sim acontece em diversos garanhões e com sucesso tá bom então acho que essas são as principais vantagens aí que a técnica traz hoje em dia pelo brasil é só complemento a fmc séries muito comentário sobre a icce atrapalhar outras técnicas né substituir outras técnicas e não é isso né aquele que se ela é uma técnica que ela veio para complementar né animais que não conseguem utilizar up animais como ele comentou o sêmen de garanhões de mortos então ela só vai auxiliar ainda mais na possibilidade da pres bom e é

legal também só colocar aqui a ver com essa técnica ela pode ser realizada a cada 15 dias na égua e ainda não há estudos que comprovem que isso pode afetar de alguma forma a fertilidade da égua muito pelo contrário tá a fertilidade da égua é obviamente a gente tá falando das regras que não são não estão com problemas ali na questão de fertilização tá como foi colocado aqui é por mim ali uma das vantagens mas éguas normais elas não apresentam problemas de fertilidade posterior a técnica ou posterior a várias realizações dessa técnica numa mesma égua

tá então a gente já tem aí vários laboratórios que fazem isso durante a anos já e as réguas continuam é continua o fez para utilizar aí até como você vem colocou para fazer inseminações enfim ou até a própria gestação aí de um potro se for da que se [ __ ] que o proprietário espera aí pra essa régua futuramente também então assim é bom pessoal é isso muito obrigada por terem assistido nosso vídeo esperamos que você tenha entendido um pouco mais sobre a técnica da isso que a gente tenha passado para vocês a informação de

forma clara e espero também é que vocês vão atrás de um pouco mais a fundo que a gente conseguiu passar aqui porque o que a gente passou foi bastante básico mas a gente consegue achar muitos artigos sobre o assunto principalmente artigos em inglês já que a técnica aqui no brasil ainda é muito nova é e que com certeza vocês vão conseguir se aprofundar no assunto queria agradecer novamente por vocês estarem aqui com a gente não esqueçam de ir no seguir nas redes sociais instagram facebook e se inscrever aqui no canal para vocês acompanharem a gente

e terem conteúdo dos próximos vídeos que viram é isso muito obrigado mais uma vez pessoal até mais e até tchau tchau