VÍDEO 7

Delta tá o delta ele é um grande sinal por exemplo vocês estão acostumada ah coloquei para estabilizar hoje o delta máximo que eu que a gente observou era 17 aí você chega aqui semana que vem o delta máximo É de 30 pode procurar que tem alum razam mentinho Ah o d é de 50 é um razão 100 nossa acima de 200 é bolha bolha é bolha no sistema tá pegaram essa ou não Qual o código vamos bloquear agora para o delta baixo Ok Maravilha perfeito coloca injetar Delta médio até 100 150 micr vazamento pode ser

vazamento na entrada da coluna saída da coluna saída da coluna não até entrada da coluna alguma tubulação anterior ou então No pior dos casos o selo do da bomba tá começando a Se romper começando a ficar Riscado a só troc no selo mas iso é mais difícil de acontecer então Delta baixo injeta Delta médio até 100 150 200 pequeno vazamento procura na entrada da coluna Delta de amplitude muito alta 1000 PSI de de Delta 500 PSI de Delta 600 PSI de Delta qualquer variação acima de 300 é bolha aí o que que você faz para

o fluxo an que tá tudo mergulhado lá dentro S bem bonitinho Purga todo mundo de novo 5 minutos e Purga para todos os canais Purga pode purgar coloca para estabilizar de novo se continuar o a variação muito grande para tudo de novo Purga de novo só tch não é possível é possível a bolha fica lá às vezes presa e não não sai tem alguns componentes da bomba que tem a capacidade de reter uma uma bolha e por conta da viscosidade de algum solvente você não consegue eliminar essa bolha então Purga bastante se Depois da terceira

purga você não conseguiu resolver tá com amplitude muito grande aí você vai fazer o seguinte vai parar tudo fazendo vai pegar todos os canais vai colocar num frasco 100% metanol vai pedir ele purgar tudo de novo 100% metan metanol em todos osais tiis nos canais por isso que hplc disco P né do HP na verdade é High Performance Liv de cromat é Alguns falam que é Rai P de paciência porque você tem que ter paciência tem H mas depois de purgar os canais com metanol você volta os canais daí pro solvente que é da sua

do seu meta mesmo aí você segue Tranquilo isso aí eu ten por sete canais porgo sete porgo mas eu fico olhando o delta então mesmo purgando no metanol vou ter que acompanhar o delta saber se ele reduzível é sim o o delta na verdade aqui você vai monitorar ele sempre que você já tiver com o método eh iniciado né então aqui ele tá com 9010 que é o início do nosso método a 1.4 ml por minuto durante a Purga a gente acaba não não monitorando o delta mesmo porga quanto ele tá purgando sempre ao final

uma hora que começa a operar mesmo o equipamento em si táa purg metanol você Purga tudo no metanol aí pode parar a Purga de 5 minutos minutos aí você volta nos canais de de início do sua sua operação Tá bom eu acho que as principais informações do console estão aqui nisso que eu acabei de falar para vocês tem outras informações man agora acho que não faz menor sentido Então pode Minimizar lá ô thago eu posso fazer tudo isso importa a coluna tá ali as coisas tiver tudo normal a coluna você para vocês evitarem problemas a

única coisa você tem que tomar cuidado na coluna é primeiro na C1 toma cuidado passar 100% de água só tem uma coluna que suporta que é c18 que suporta 100% de á á só uma coluna só uma tecnologia de coluna todas as outras não é recomendado você usar 100% de água e o segundo bo de coluna vocês tem que tomar cuidado é quando vocês usarem tampão quando usar tampão tomem cuidado que precisa fazer uma limpeza Eu tenho um documento de limpeza de coluna depois deixo com vocês Caso vocês precisem fazer daí é só seguir o

que tá Escrito Lá tem um passo a passo super tranquilo tá a gente tem aqui a tela do Run samples e dentro da tela do Run samples a gente vai usar muito aqui embaixo Ó você tem single samples sample set is Running Então nada mais é do que caso eu queira fazer uma injeção única eu posso deixar aqui ticado ele vai me dar essas opções aqui se eu clic em samples ele aparece uma lista ou seja seja amostras né eu consigo injetar tudo que eu quiser aqui agora cada linha dessa aqui pode ser uma injeção

uma corrida cromatográfica tudo bem O sample set é quantas listas dessa eu vou ter correndo então eu posso criar mais de uma lista para correr e o Run é o que tá correndo no momento então se você clicar em Running tá vendo não tem nada assim como nos samples não tem nada pra gente dar o pontapé Inicial aqui né Vamos começar a fazer uma corrida a gente vai ter que preencher essa lista aqui tá então vou pedir PR Adrian clicar aqui ó no primeiro quadradinho no R embaixo não desculpa no samples S aqui isso do

lado pode ser esse aí então pega essa coluna aqui isso arrasta para aí eu tá bom tá vocês viram que ela clicou aqui no primeiro apareceu uma um monte de coisinha né Uhum cada coluna dessa aqui representa uma ação que a gente precisa preencher Plate well o Plate well é a posição do vi que a gente vai injetar então lembra que eu falei para vocês que aqui no Plate tem 48 posições tem um Plate um no Plate dois o cortezinho aqui indica a posição que a gente vai colocar lá dentro do Plate e ele fica

designado como na coluna numeração e na linha eh o alfabeto então a b c d e f 1 2 3 4 5 6 7 8 se eu tenho um viio na posição um de injeção do Plate um eu vou ter que colocar aqui para ele essa designação como que eu escrevo essa designação Deixa eu só ver um negócio clica aqui nesse aqui é tem como selecionar por exemplo o que que vai est no meu Plate ele puxar é não sei deixa eu ver se tem Ah eu acho que sim clica aqui no molinha inserte á

ai que bonitinho bonitinho né Aí no caso aí eu tenho a primeira linha né aí eu seleciono el pode ser pressa nessa linha pode se fcar no final ele já Talvez sim não tenho certeza ele é bem inteligente mas aí aqui ele pegou o A1 né Aí ele repetiu aqui é ele repetiu S que eu acho que tinha já carregado uma né ele só acrescenta na verdade tá e dá para excluir aqui colar po dar um ok aqui aí aqui se eu seleciono a linha inteira e vou em delete ali ele deleta aí ele já

at parece Excel não parece é bem só que mais assustador aí eu posso tipo ir selecionando aonde eu vou ter a a amar no Plate então Plate um esse aqui seria essa posição segundo terceiro e assim por diante tá tá volume de injeção é o quanto de alícota ele vai puxar de dentro do vum que tá aqui dentro tá E aí você vai me perguntar thgo e aí quant é que o in que você me diz a gente tem limites máximos e limites mínimos com precisão né limite máximo 50 microlitos e o limite [Música] mínimo

a gente poderia ter uma injeção aí de 0,5 micol estal quem manda quem manda no volume de injeção é a coluna cromatográfica e a concentração do seu analit uma coluna de 5 cm se você injeta um volume muito excessivo ela não consegue não tem sítios ativos suficiente para poder resolver para poder ter interação parte das suas moléculas vão interagir partes não vão Esse é o cromatograma fica duplicado o pico você não tem uma uma resolução adequada enfim é um uma outra história então a gente pode começar como algo coerente que é 10 microl de ção

tá ótimo e depois você pode variar isso dependendo do desenvolvimento de método seu tá vamos deixar 10 aqui a terceira coluna é número de injeções desse Vaio então a gente quer que injeta uma vez ou duas vezes se eu colocar dois ali ele vai injetar duas vezes o mesmo Vaio tá uma duplicata uma duplicata do mesmo vai mas aí e deixar po deixar um dear um mesmo o Label seria é é muito usado o Label para é informações de quem faz análises clínicas não é o caso de vocês aqui quando o pessoal tem código de

barra e tal coloca de amostra coloca aqui no lro então você pode deixar sem nada aqui não tem problema sample name pode escreve testte pra gente porque eu queria fazer uma injeção do que tem aqui como eu não anotei no vi que era esse aqui no hum é o que que tem Ah é Então é para ser uma cafeína né Nós vamos descobrir agora teste teste Ô thago uma uma dúvida é por exemplo a gente trabalha né fazendo repetições né das análises eu poderia fazer três injeções no mesmo vai a invés de usar três vaios

com a mesma então pode mas não é a mesma coisa se três vaios seria repetição mesmo vaios seria uma duplicata né é uma duplicata triplicata isso is nesse tipo de análise é é assim depende que você quer medir por exemplo se você mede do mesmo Vaio você vai medir a reprodutibilidade do equipamento uhum se você quer medir a reprodutibilidade do seu método Mas você vai ter que colocar em três vai separado Trip já faz separado é isso isso aí aqui eu coloco teste em todas não não não só vamos fazer o seguinte é pode só

vamos preencher a primeira aí depois a gente vê as demais tá tá L tempa descobrir o lev eu ainda não vou é paraa quantificação Então não vamos colocar nada por enquanto aqui a função é que assim ó aqui a gente vai ter que dizer pro software o seguinte o que que é padrão o que que é amostra quando a gente quiser referenciar uma em relação à outra hum tá então se você tiver eh querendo comparar quantificar uma coisa com a outra você vai ter um rio com padrão e um rio com amostra o software ele

não sabe que é amostra o que que é padrão a gente tem que dizer para ele então aqui o tipo de função quando você clica nessa ele abre olha o tanto de coisa então você pode tá injetando um padrão você pode tá injetando uma amostra você pode estar injetando um controle você pode fazer dessa linha uma linha só de Equilíbrio cromatográfico dá para você fazer tudo que você quiser você imaginar você consegue fazer aqui tá basicamente vocês vão usar INJET Standard e INJET sle tá basicamente por qu quando você tiver injetando padrão você diz Para

Ele olha tô injetando um padrão com qual concentração Aí você coloca o level o level Entenda como sendo uma equiparação mesmo da dessa concentração que você tá injetando se você tem um padrão uma concentração você pode colocar Olha é o level um para mim e aí você coloca qual é a concentração dele dentro do level já eu falo disso se eu ten uma curva concentrações diferentes levels diferentes Aí você coloca concentração um level 1 concentração dois level 2 3 4 5 você vai montar uma curva de calibração tudo bem Depois eu falo sobre curva de

calibração tá caso eu deixo como tanto faz porque nós não vamos e colocar o a concentração em si Vamos colocar sle ai tá é nessa coluna lembra que a gente criou o método set e dentro desse método set tem um instrument método só tem el M set bonitão lá você vai chamar ele lel reference nada processing pode deixar normal nós não vamos usar o processamento agora mas ele Ah você pode pedir para ele não processar é que a sample list você pode fazer tudo nela equilibrar o seu sistema você pode pedir para purgar o seu

sistema você pode pedir para injetar um branco você pode pedir para injetar controle padrão amostra